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《华中科技大学》 2010年
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Nucleostemin在大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞诱导分化中的研究

裴方  
【摘要】:目的:探讨Nucleostemin(NS)在大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞诱导分化中的机制及作用。 方法:取材选用的是4~6周龄雄性S-D大鼠的双侧胫骨和股骨骨髓基质细胞,并进行原代及传代培养。细胞培养至第3代设置对照组,分别将混合骨髓间充质干细胞用普通培养液和矿化培养液培养。依次通过相差倒置显微镜观察细胞生长、MTT法检测细胞增殖、碱性磷酸酶(AKP)和茜素红钙染色共同分析细胞的成骨活性。免疫组化SABC法及免疫荧光法检测NS在细胞中的表达情况,在普通培养基和成骨细胞诱导培养基作用下比较NS分别的表达情况。 结果:在矿化培养基诱导下大鼠骨髓间充质干细胞其NS的表达较普通培养基培养下的表达明显减弱,且呈时间依赖性衰减。骨髓间充质干细胞在矿化液作用下可诱导为团状分布的成骨细胞。成骨细胞的NS表达则为阴性。MTT检测显示矿化液培养细胞生长潜伏期长,对数生长期较对照组延长。 结论:①此方法可以获得大量骨髓间充质干细胞。②骨髓间充质干细胞通过矿化诱导液作用可分化为成骨细胞。③NS作为核干细胞因子基因调控片段,其蛋白表到量在干细胞中相当丰富。当细胞定向分化后,其表达明显减少。④因此,NS基因直接参与细胞增殖调控,很可能作为大鼠骨髓间充质干细胞是否具有潜在分化能力的标志性因子。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R329

【参考文献】
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【共引文献】
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