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《华中科技大学》 2010年
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分泌性珠蛋白在慢性鼻—鼻窦炎中的表达及表达调控的研究

王男  
【摘要】:背景:分泌性珠蛋白是一类非糖基化二聚体小型分泌蛋白,表达于鼻窦、肺、乳腺、唾液腺、汗腺、前列腺等的上皮细胞与细胞分泌相关。人类的分泌球蛋白包括子宫珠蛋白(又称为SCGB1A1、Clara细胞蛋白、Clara细胞10 - kDa蛋白、CC10蛋白),疏脂蛋白A (SCGB1D1),疏脂蛋白B(SCGB1D2),淋巴珠蛋白(SCGB1D3),疏脂蛋白C(SCGB2A1,乳腺球蛋白B),乳腺球蛋白A(SCGB2A2),高表达I型(子宫珠蛋白相关蛋白2, SCGB3A1)和子宫珠蛋白相关蛋白1(UGRP - 1,SCGB3A2),聚氯联(二)苯(RYD5,SCGB1C1),γ-干扰素诱生SCBG(ⅡS,SCGB1D4)。但对于任何一种SCGB蛋白的具体生理功能,目前还没有达成普遍的共识。在人类疾病中SCGB的多肽似乎在免疫调节和抗炎活动中起着重要的调节作用,因此SCGB蛋白的表达水平可能对疾病的诊断及预后效果的评价会有一定的指导作用。在慢性鼻-鼻窦炎的发病发展过程中SCGB的表达变化可能会帮助我们认识和评估该慢性疾病。在这项研究中,我们采用不同的方法来检测SCGB蛋白在正常对照组、慢性鼻-鼻窦炎患者和慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者的鼻腔黏膜中表达情况,以及不同的炎症细胞因子对其核酸表达的调控。我们采用多聚酶链式反应限制性(酶切)片断长度多态性来研究UGRP1 -112G/A单核苷酸多态性,来揭示UGRP1 -112G/A单核苷酸多态性是否与慢性鼻-鼻窦炎的发展相关。 方法:采用逆转录PCR和实时定量PCR对不同的分泌性珠蛋白(SCGB)在正常对照组、慢性鼻-鼻窦炎患者组和鼻息肉患者组的鼻腔黏膜组织的核酸水平表达进行了检测。使用免疫组织化学方法对SCGB3A2(UGRP1)蛋白的定位及在三组中的表达水平进行了研究。此外,采用体外组织块培养的方法,研究不同剂量和时间段肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素4(IL - 4),干扰素-γ(干扰素-γ)和白细胞介素13(IL - 13)对SCGB家族的基因调控。采用多聚酶链式反应限制性(酶切)片断长度多态性来研究UGRP1 -112G/A单核苷酸多态性与慢性鼻-鼻窦炎发生发展的关系。应用Lund-Mackay方法对在鼻窦计算机断层扫描(CT)进行评分。 结果:与对照组相比SCGB3A2和SCGB2A1核酸表达在慢性鼻-鼻窦炎及鼻息肉组织中明显下调。体外组织块培养,经不同细胞因子刺激后,两者的反应相反。鼻息肉组织中的SCGB1D4和SCGB1C1核酸水平表达明显较慢性鼻-鼻窦炎和对照组升高,体外组织块培养使用不同细胞因子进行刺激,两者的核酸表达水平变化趋势相反。SCGB2A2,SCGB 1D1和SCGB 3A1的核酸表达在慢性鼻-鼻窦炎组织中明显比鼻息肉组织,正常对照组高。免疫组化显示SCGB3A2蛋白的表达在慢性鼻-鼻窦炎及鼻息肉组织较正常对照组明显减弱。UGRP1 -112G/A的单核苷酸多态性与慢性鼻-鼻窦炎和正常对照组中的表达无差异,与慢性鼻-鼻窦炎的分组以及病情的严重程度均无关系。 结论:SCGB家族可能在CRS的发病中起重要作用,并与疾病严重程度和治疗反应密切相关。在慢性鼻-鼻窦炎,鼻息肉的病变过程中,不同的细胞因子可以通过调节SCGB家庭的核酸表达来调节鼻黏膜的功能。UGRP1 -112G/A的单核苷酸多态性对中国汉族人群慢性鼻-鼻窦炎的发生发展并无实质性的影响。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R765

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