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《华中科技大学》 2012年
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心肌梗死后大鼠心肌白介素-17的表达及其与室性心律失常的关系

陈昭喆  
【摘要】:第一部分白介素-17在心肌梗死大鼠心肌中的表达特点 目的研究白介素-17(IL-17)在心肌梗死大鼠心肌中的表达特点。 方法采用液氮冷冻法建立大鼠心肌梗死(MI)模型。将66只雄性SD大鼠心肌梗死模型随机分为1天组、3天组、1周组、2周组、4周组及8周组,每个亚组8-9只,另设假手术组8只。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)、免疫荧光激光共聚焦技术(LSCM)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IL-17的表达。 结果ELISA、Western blot、激光共聚焦(LSCM)的结果均表明在大鼠心肌梗死的发生发展过程中,IL-17在心肌组织大量表达,且随着时间变化而逐渐升高,在4周表达最为显著。 结论IL-17作为一种强力的促炎症因子在心肌梗死大鼠心肌组织中大量表达,有可能与心肌梗死后的心室重塑及心律失常的发生有关。 第二部分心肌梗死后大鼠心肌白介素-17的表达与室性心律失常的关系 目的探讨大鼠心肌梗死(MI)后白介素-17(IL-17)的表达在室性心律失常发生中的作用。 方法采用液氮冷冻法建立大鼠心肌梗死(MI)模型。将MI大鼠随机分为心肌梗死对照组(心梗组)、小鼠同型IgG组(IgG组)和IL-17抗体组(Ab组)。每组又随机分为3个亚组:2周组、4周组及8周组,另设假手术组(S组)。共138只。假手术组和心肌梗死对照组分别腹腔注射PBS溶液(0.8mlPBS溶液,并注入0.2ml空气促使液体分散到腹腔内),小鼠同型IgG组、IL-17抗体组分别注射小鼠同型IgG1+PBS溶液(100ug IgG1溶于0.8ml PBS,同样注入0.2ml空气)、小鼠抗人IL-17单克隆抗体+PBS溶液(100ug IL-17抗体溶于0.8ml PBS溶液,同样注入0.2ml空气)。每隔1天用药1次,连续用药5次。运用程序电刺激方法,观察各组室性心律失常的诱发率,同时用Western Blot和激光共聚焦(LSCM)显微镜检测IL-17蛋白表达水平。 结果与S组比较,MI组大鼠心肌组织IL-17表达显著增加(P0.05),2周、4周、8周各个亚组及总的室性心律失常诱发率均明显增高(P0.05);与MI组比较,IL-17抗体组IL-17表达显著减少(P0.05),室性心律失常诱发率亦明显降低(P0.05)。大鼠心肌IL-17的表达水平和室性心律失常诱发率之间呈正相关性(r=+0.88,P0.05)。心肌梗死对照组、小鼠同型IgG组、IL-17抗体组的各个时间点亚组,即2周、4周、8周亚组之间及其总的室性心律失常诱发率无显著差异(P0.05)。 结论MI后大鼠心肌组织IL-17表达明显增加,大量IL-17表达与MI后室性心律失常的发生密切相关。IL-17的大量表达可能对心肌梗死后室性心律失常折返环的形成有诱导或促进的作用。 第三部分白介素-17致体外大鼠心脏室性心律失常的研究 目的研究白介素-17(IL-17)对体外大鼠心脏致室性心律失常的直接作用。 方法采用大鼠体外心脏灌流模型,观察不同浓度的IL-17灌流下自发和诱发的体外大鼠心脏室性心律失常。 结果不同浓度的IL-17灌流能引起体外心脏室性心律失常,且室性心律失常发生次数随着IL-17浓度的增加而增多(P0.05);经IL-17抗体处理后同等浓度的IL-17引起的室性心律失常较前明显减少(P0.05),经程序电刺激快速室性心律失常的诱发率在IL-17抗体组也明显降低(P0.05)。 结论IL-17能够直接引起体外心脏室性心律失常。 第四部分白介素-17对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响 目的研究白介素-17(IL-17)对大鼠心室肌细胞膜短暂外向钾电流(Ito)的影响,探讨其致室性心律失常的机制。 方法用酶解法分离大鼠心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录技术,观察不同浓度的IL-17对Ito的影响。 结果当IL-17浓度大于等于37.5ng/L时,随着IL-17浓度升高,其对Ito电流密度的抑制作用逐渐增强。37.5、75、150、300、600ng/L IL-17对Ito电流密度的抑制百分比分别为12.7±3.4%(与对照组比较P0.05)、20.3±5.5%(P0.05)、27.1±6.0%(P0.05)、35.7±7.1%(P0.05)、47.2±9.3%(P0.01)。 结论IL-17可浓度依赖性地抑制大鼠心室肌细胞的Ito电流密度,可能与室性心律失常的发生有关。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R542.22

【参考文献】
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