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《华中科技大学》 2013年
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近红外光照射碳纳米管靶向特异性热消融卵巢癌的研究

袁美娟  
【摘要】:目的: 碳纳米管具有吸收近红外光(NIR)并将其转化为热能形成局部热效应从而杀伤肿瘤细胞的特点。本课题以CA125为靶点,特异性地增加卵巢癌细胞中碳纳米管的蓄积,再利用近红外线(NIR)辐射来杀伤卵巢癌细胞。 方法: 1.应用化学方法将CA125单克隆抗体与多壁碳纳米管共价结合起来,形成CNTs-MAb复合物。 2.应用细胞免疫荧光检测卵巢癌SKOV-3细胞(CA125阳性)和骨肉瘤MG-63细胞(CA125阴性)CA125抗原表达的有无以及CNTs-MAb结合SKOV-3细胞的特异性。 3.应用CCK-8检测相同浓度的MAb、MWCNTs和CNTs-MAb分别作用于卵巢癌SKOV-3细胞和骨肉瘤MG-63细胞在近红外激光照射(1064nm,60J,300ms)后两种细胞的存活率;检测不同的浓度0、1/1024mg/ml、1/512mg/ml、1/256mg/ml、1/128mg/ml、1/64mg/ml、1/32mg/ml、1/16mg/ml、1/8mg/ml CNTs-MAb的作用下,近红外激光照射后卵巢癌SKOV-3细胞和骨肉瘤MG-63细胞的存活率。 4.应用流式细胞术法检测不同的浓度0、1/256mg/ml、1/128mg/ml、1/64mg/ml、1/32mg/ml、1/16mg/ml、1/8mg/ml CNTs-MAb的作用下,近红外激光照射后卵巢癌SKOV-3细胞和骨肉瘤MG-63细胞的凋亡率。 5.通过建立卵巢癌和骨肉瘤裸鼠模型,每组分别给予1/128mg/ml的MAb、MWCNTs和CNTs-MAb,近红外激光照射,观察肿瘤生长状况。 结果: 1. TEM检测结果显示CA125单克隆抗体结合到了多壁碳纳米管上。 2.细胞免疫荧光检测卵巢癌SKOV-3细胞有CA125抗原的表达,而骨肉瘤MG-63细胞无CA125抗原的表达,CNTs-MAb可以特异性的结合SKOV-3细胞。 3.相同浓度的MAb作用于SKOV-3和MG-63细胞NIR照射后,细胞的存活率与对照组相比无统计学差异(P0.05),相同浓度的MWCNTs和CNTs-MAb作用于SKOV-3和MG-63细胞NIR照射后两组的细胞存活率与对照组相比均明显降低(P0.05),CNTs-MAb和MWCNTs作用于SKOV-3细胞NIR照射后两组的细胞存活率有统计学差异(P0.05),而CNTs-MAb和MWCNTs组作用于MG-63细胞NIR照射后两组的细胞存活率无统计学差异(P0.05)。近红外激光照射后随着CNTs-MAb浓度的增加SKOV-3细胞和MG-63细胞的存活率均降低,与对照组相比均有统计学差异(P0.05);相同剂量组的CNTs-MAb分别作用于SKOV-3和MG-63细胞NIR照射后的细胞存活率比较,两种细胞在1/1024、1/512mg/ml两个剂量时细胞的存活率无统计学上的差异(P0.05),SKOV-3细胞在其余各剂量组时细胞的存活率均较MG-63细胞低(P0.05),其中的最佳浓度为1/128mg/ml。 4.随着CNTs-MAb浓度的增加,照射近红外激光后卵巢癌SKOV-3和骨肉瘤MG-63细胞的凋亡率均明显增加,每一个相同剂量组的CNTs-MAb分别作用于两种细胞,SKOV-3的细胞凋亡率明显高于MG-63细胞(P0.05)。 5.照射近红外激光后,MAb组卵巢癌和骨肉瘤肿瘤的直径没有减小,MWNTs组抑制了两种肿瘤的生长,其对两种肿瘤的抑制作用无统计学差异(P0.05),CNTs-MAb使得两种肿瘤直径均缩小,而卵巢癌肿瘤直径缩小较骨肉瘤缩小的多,差异有统计学意义(P0.05)。 结论: 1.多壁碳纳米管共价结合C125单抗在近红外激光存在的情况下能够靶向特异性的热消融卵巢癌细胞。 2.在体和体外实验均表明多壁碳纳米管共价结合C125单抗在近红外激光下靶向特异性热消融卵巢癌细胞的最佳浓度是1/128mg/ml。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R737.31

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