收藏本站
《华中科技大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

纳豆激酶(NK)分离纯化、生物活性

付正纲  
【摘要】:纳豆激酶(Nattokinase, NK)是从日本传统食品纳豆(Natto)中提取出来的一种具有溶血栓作用的酶,与目前常用的心脑血管疾病的治疗药物如链激酶等相比,具有安全性好、作用迅速、价格低等优点,同时还对心脑血管疾病具有预防作用,但纯纳豆激酶在pH5迅速失活,影响了其应用。 纳豆作为食品已有2000多年的历史,作为食物必须要在胃肠进行消化,必然要经历低pH环境和胃蛋白酶等的水解作用,这是否说明纳豆中含有能与纳豆激酶结合的物质,使纳豆激酶在胃部环境下依然能保持活性?这引起了我们研究的兴趣。 我们通过培养基-纤维蛋白平板法从购买和自己分离的纳豆菌中快速筛选出了一株高产酶的纳豆菌种,并用其作为纳豆种子菌的菌种,以蒸煮处理的大豆为培养基,通过固体浅盘发酵法制备得到纳豆。又改进了提取、分离、纯化工艺,以酸法提取(0.2M醋酸为缓冲液)和凝胶过滤(Sephadex G-25 凝胶柱)纯化得到了纳豆激酶酶制品。实验证明该酶制品不仅对纤维蛋白有很好的溶纤作用,而且对大鼠血纤维也有很好的溶栓作用,还证明该酶制品对大鼠新鲜血液有很好的抗凝性能。尤其重要的是,通过该工艺得到的酶制品在pH2.45并经胃蛋白酶处理后,仍保持高活力。通过SDS-PAGE凝胶电泳发现其中有5个大分子量的蛋白与该激酶共存,很可能是这些物质和纳豆激酶结合,屏蔽了纳豆激酶的水解位点,使纳豆激酶在pH2.45并经胃蛋白酶处理后,仍保持较高的活力。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:TQ464.8

手机知网App
【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 王冬燕;王远红;郭丽萍;吕志华;;纳豆中氨基酸态氮含量的测定[J];食品工业科技;2010年09期
2 孙婕;刘宁;;纳豆的保健功效[J];中国调味品;2007年07期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 孙婕;刘宁;;纳豆的保健功效与人类健康[A];食物功效成分与健康——达能营养中心第九次学术年会会议论文集[C];2006年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王正刚,丁贵平,蔡正森;纳豆激酶的发酵工艺研究[J];氨基酸和生物资源;2001年02期
2 杨星勇,卢晓风,程惊秋,裴炎,阎光凡,张玉方;杭州虻纤溶酶的纯化及其生物活性分析[J];动物学报;2000年02期
3 张彦斌,徐长法;溶栓剂蛋白质工程的新进展[J];北京大学学报(自然科学版);2000年02期
4 迟玉杰,刘淑兰;对蚯蚓纤溶酶分子量的测定及其溶栓效果的观察[J];东北农业大学学报;1999年02期
5 朱秀清,付春梅;大豆肽食品的开发[J];大豆通报;1998年04期
6 郑冰冰,王丽萍,曲竞南;赤子爱胜蚓溶栓作用的研究[J];哈尔滨师范大学自然科学学报;2000年01期
7 彭先凤,陶建宁,杨继虞,彭余田,鲍锦库;赤子爱胜蚓五种纯化纤溶酶的理化性质研究[J];华西药学杂志;1999年02期
8 钱斌,孙迎庆,郭雁,党昕,茹炳根;尿激酶原-RGDS双功能分子——构建、表达及性质研究[J];中国科学C辑:生命科学;1999年02期
9 从玉文,刘耀明,陈家佩;蚓激酶的研究进展[J];中国生化药物杂志;2000年03期
10 黄志立,罗立新,杨汝德,梁世中;纳豆激酶[J];生命的化学;2000年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜琼;赵璇;马明;;豆豉纤溶酶产生菌的筛选[J];安徽农业科学;2007年01期
2 姜琼;陆云华;熊曼萍;;豆豉纤溶酶研究进展[J];安徽农业科学;2007年17期
3 陆云华;张新;;豆豉纤溶酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J];安徽农业科学;2007年23期
4 吕美云;张新;陆云华;;豆豉纤溶酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[J];安徽农业科学;2008年06期
5 吴建章;刘忠民;;功能食品纳豆对骨代谢的影响[J];安徽农业科学;2010年31期
6 敬俊锋;陈斌;李莹;何正波;;纳豆激酶研究进展[J];安徽农业科学;2011年07期
7 陈创前;蔡会武;邵纪生;王永红;;大豆蛋白复合酶解法研究[J];安徽农业科学;2011年10期
8 路龙女;唐欣昀;;纳豆固体发酵和液体发酵条件的研究[J];安徽农业科学;2011年26期
9 齐海萍;胡文忠;姜爱丽;田密霞;;豆豉纤溶酶基因在枯草杆菌中表达的研究进展[J];安徽农业科学;2012年07期
10 张欣;;纳豆生产优良菌株的筛选研究[J];安徽农业科学;2012年22期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 邓露芳;王加启;姜艳美;卜登攀;魏宏阳;周凌云;王金枝;;产气法评价纳豆芽孢杆菌对瘤胃液体外发酵的影响[A];第三届中国奶牛发展大会论文集[C];2008年
2 季红;吴正钧;陆孝义;;纤溶酶研究进展及以此为借鉴的乳源抗凝肽研究展望[A];中国奶业协会年会论文集2008(下册)[C];2008年
3 孙妍;王加启;奚晓琦;卜登攀;魏宏阳;周凌云;;产蛋白酶和纤维素酶纳豆芽孢杆菌益生菌株的筛选及其生长特性研究[A];首届中国奶业大会论文集(上册)[C];2010年
4 孙婕;刘宁;;纳豆的保健功效与人类健康[A];食物功效成分与健康——达能营养中心第九次学术年会会议论文集[C];2006年
5 丁有学;刘兰;;纳豆激酶研究进展[A];2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2007年
6 彭润玲;徐成海;张世伟;李成华;寇巍;;真空冷冻干燥工艺参数对纳豆激酶活性的影响(英文)[A];真空技术与表面工程——第九届真空冶金与表面工程学术会议论文集[C];2009年
7 杨艳燕;李顺意;高尚;闫达中;陈勇;;豆豉纤溶活性物—纳豆激酶的分离分析[A];中医药现代化研究学术大会论文集[C];2001年
8 高大海;梅乐和;林东强;姚善泾;;纳豆激酶的分离纯化及酶学性质的研究[A];首届长三角科技论坛——长三角生物医药发展论坛论文集[C];2004年
9 梅乐和;胡升;许静;姚善泾;郑晓冬;;纳豆枯草杆菌的筛选和纳豆激酶发酵条件优化[A];首届长三角科技论坛——长三角生物医药发展论坛论文集[C];2004年
10 阮红;;γ-聚谷氨酸高效工程菌株的构建和代谢调整[A];浙江省生物化学与分子生物学学术交流会论文集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张少平;豆豉纤溶酶定向进化及突变酶基因的表达研究[D];华南理工大学;2010年
2 高卫华;芽孢杆菌胞外蛋白酶合成及抑菌功能的调控机制研究[D];南开大学;2010年
3 周波;枯草芽孢杆菌Na-002纳豆激酶基因的克隆、表达及定点突变研究[D];山东农业大学;2011年
4 王少华;日本刺沙蚕蛋白酶的纯化、鉴定及日本刺沙蚕纤溶酶的部分药效学研究[D];吉林大学;2011年
5 董绪燕;油料作物中有效成分分离制备及其检测方法研究[D];华中科技大学;2011年
6 刘俊;解淀粉芽孢杆菌C06防治桃褐腐病菌的机制及其产生的γ-多聚谷氨酸在定殖中的作用[D];南京农业大学;2010年
7 吕凤霞;内生多粘芽孢杆菌纤溶酶的纯化、性质及其基因的克隆与表达[D];南京农业大学;2009年
8 彭勇;豆豉溶栓酶的纯化及其基因的克隆与表达研究[D];四川大学;2002年
9 赵蕾;小麦纹枯病菌产生的一种胞外蛋白酶及其致病机理的研究[D];山东农业大学;2003年
10 雷引林;球形纤维素/钛白粉复合扩张床吸附剂的制备及其在蛋白质纯化中的应用[D];浙江大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 占慧琴;纳豆激酶对兔缺血型视网膜病变模型影响的实验研究[D];南京医科大学;2010年
2 杜学敏;蚯蚓纤溶酶的分离纯化及部分组分的性质[D];河北大学;2007年
3 相朝清;固定化碱性蛋白酶制备大豆肽及其抗氧化活性研究[D];河南工业大学;2010年
4 王少晶;不同负荷训练和补充大豆多肽对延缓大鼠肾衰老的研究[D];河北师范大学;2010年
5 孙木华;维尔迈5号治疗下肢深静脉血栓形成后遗症的临床观察[D];黑龙江中医药大学;2010年
6 周海;蚓激酶的提取纯化、酶学性质及抗血栓效果研究[D];武汉工业学院;2010年
7 李斌;发酵豆粕工艺的研究与开发[D];山东大学;2010年
8 郭妍妍;纤溶酶基因在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达[D];河北农业大学;2011年
9 张红丽;枯草芽孢杆菌BS-3纤溶酶的分离纯化及其基因的克隆表达[D];河北农业大学;2011年
10 焦龙;毕赤酵母工程菌pk53产纤溶酶发酵的优化研究[D];河北农业大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 段智变;温晓庆;董改香;江汉湖;;口服纳豆抗氧化功效研究[J];安徽农业科学;2007年35期
2 曹敏章 ,潘晶华,王邗,华玉凡;纳豆保健作用及其栽培新品种选育[J];大豆通报;2002年04期
3 郭德军,孙晶东,肖念平;纳豆加工工艺的研究[J];黑龙江八一农垦大学学报;2005年05期
4 安晓琼;李梦琴;;纳豆的生理功能[J];食品与药品;2006年01期
5 黄志立,罗立新,杨汝德,梁世中;纳豆激酶[J];生命的化学;2000年02期
6 谢秋玲,郭勇;纳豆——一种多功能食品[J];食品工业科技;1999年01期
7 吕雪娟,梁兰兰,黄华京,秦燕,宁正祥;游离氨基酸含量对食品风味特征的影响[J];食品科学;1996年03期
8 宋国安;纳豆的功能与开发应用前景[J];食品研究与开发;2002年05期
9 纪宁;孔繁东;祖国仁;季瑛;黄朝明;;纳豆菌抗菌作用的研究现状与展望[J];食品研究与开发;2006年01期
10 谢秋玲,郭勇,林剑;一种潜在的溶血栓药物——纳豆激酶[J];药物生物技术;2001年01期
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 刘振杰;郭伟鹏;张菊梅;吴清平;林秀华;;纳豆的保健功效及开发应用[J];热带农业工程;2010年03期
2 孙清荣;;纳豆食品生产状况调研[J];食品工程;2010年04期
3 张春红;凡晶;李文龙;;响应面法优化薏米纳豆生产工艺的研究[J];食品工业;2011年12期
4 王冬燕;王远红;郭丽萍;吕志华;;纳豆中氨基酸态氮含量的测定[J];食品工业科技;2010年09期
5 关茵;肖然;李春;;从工艺角度改善纳豆风味的研究[J];中国酿造;2010年06期
6 张莉;王君高;薛鸿毅;夏媛媛;;纳豆食品发酵条件的优化[J];中国酿造;2012年02期
7 韩彦彬;王彦武;黄超培;覃辉艳;杨俊峰;何励;傅伟忠;;纳豆胶囊对高脂血症模型大鼠血脂调节作用的研究[J];中国卫生检验杂志;2010年12期
8 田青;惠明;宫燕燕;;调味纳豆食品开发及工艺计算探讨[J];河南工业大学学报(自然科学版);2011年03期
9 齐凤元;李欢欢;杨利;王国洋;马勇;;响应面法优化花生纳豆的发酵工艺[J];中国粮油学报;2012年10期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 李小丽;纳豆芽孢杆菌分离及纳豆激酶活性的研究[D];安徽农业大学;2009年
2 王建;纳豆激酶的发酵、纯化条件的优化及开发应用[D];陕西科技大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵新淮,冯志彪,刘宏芳;大豆蛋白水解物铁结合能力的测定研究[J];东北农业大学学报;1996年03期
2 张洪基,肖昌华,唐绍宗,杨筠茹;尖吻蝮(Agkistrodon acutus)蛇毒的分离及其生物活性的研究[J];动物学研究;1980年02期
3 黄如训;杨露春;;脑梗塞治疗的新药研究[J];国外医学(内科学分册);1987年03期
4 陈海敏,华欲飞;大豆蛋白在化妆品中的应用[J];广西轻工业;2000年02期
5 彭先凤,曾蓉,陈丽波,杨继虞,邵承斌,刘开熹;药用蚯蚓纤溶酶的制备及其性质的研究[J];华西药学杂志;1998年01期
6 彭先凤,陶建宁,彭余田,鲍锦库;赤子爱胜蚓五种纤溶酶组分的分离纯化及对纤维蛋白原酶解的初步研究[J];华西药学杂志;1999年01期
7 季健平;吴再彬;刘歧山;张运生;叶铭;李明举;;超氧化物岐化酶超微量快速测定法[J];南京铁道医学院学报;1991年01期
8 邓勇,吴煜欢;大豆多肽研究与开发:现状·问题·建议[J];中国农业大学学报;1999年04期
9 汪家铭;大豆多肽开发应用潜力大[J];四川粮油科技;2000年02期
10 邢宝东,殷慎敏,茹炳根;蚯蚓纤溶酶的分离纯化及性质[J];生物化学与生物物理学报;1997年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李宁;纳豆的研究与应用[J];微生物学杂志;1996年02期
2 鲍艳霞,陈钧,钱之玉,倪孟祥,王萍;固态发酵产纳豆激酶的工艺优化[J];沈阳药科大学学报;2004年06期
3 王发祥,钟青萍,钟士清;纳豆菌的研究和应用[J];广州食品工业科技;2003年S1期
4 王刚;陈光;薛健;高俊鹏;;9株纳豆菌产酶活力的比较研究[J];吉林农业大学学报;2006年04期
5 鲍时翔,田艳,黄惠琴,凌华,吕家森;纳豆菌液体发酵生产纳豆激酶的研究[J];药物生物技术;2002年06期
6 祖国仁;孔繁东;刘阳;王聪;吴迪;;纳豆菌固体发酵条件及产品成分分析[J];食品工业科技;2006年12期
7 田青;惠明;宫燕燕;;调味纳豆食品开发及工艺计算探讨[J];河南工业大学学报(自然科学版);2011年03期
8 王正刚,丁贵平,蔡正森;纳豆激酶的发酵工艺研究[J];氨基酸和生物资源;2001年02期
9 史旭东;孙丹;韩继福;;纳豆菌I液体发酵生产纳豆激酶最佳培养基的筛选[J];齐齐哈尔大学学报;2006年03期
10 郭海勇;王波;乔继伟;王刚;李娜;赵匠;;纳豆激酶固体发酵条件优化[J];吉林师范大学学报(自然科学版);2008年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙婕;刘宁;;纳豆的保健功效与人类健康[A];食物功效成分与健康——达能营养中心第九次学术年会会议论文集[C];2006年
2 苏旭;李滨;陈福真;;急性下肢深静脉血栓形成205例的综合治疗[A];《中华急诊医学杂志》第八届组稿会暨急诊医学首届青年论坛论文汇编[C];2009年
3 王进华;王小平;郝美金;薛军强;;彩色超声心动图对急性心肌梗塞溶栓治疗前后心功能变化的研究[A];庆祝中国超声医学工程学会成立20周年——第八届全国超声医学学术会议论文汇编[C];2004年
4 魏洁;赵莘瑜;;经颅多普勒超声对脑梗死患者溶栓治疗前后的检测及其临床意义[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年
5 潘仁龙;;自发性脑室内出血应用重组链激酶灌注治疗[A];中国医师协会神经外科医师分会首届全国代表大会论文汇编[C];2005年
6 李斌;廖旺;王卫;王圣;王青;黄雪汝;王瑜;赵军;;未达溶栓标准的急性ST段抬高心肌梗死冠状动脉造影特点[A];第十三次全国心血管病学术会议论文集[C];2011年
7 俞梅敏;焦建伟;茹炳根;;一种同时兼有溶栓—抗栓功能分子的研究[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
8 潘宁;李丹;杨欣;黄雪兰;王薇;卢晓潇;;彩色多普勒超声诊断下肢静脉血栓及溶栓后效果的应用[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
9 闫福岭;方树友;许予明;;尿激酶不同途径给药治疗超早期脑缺血的多中心临床研究[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年
10 刘林红;王冬梅;董丽君;姜兴余;;门冬氨酸钾镁极化液在急性心肌梗死溶栓治疗中的作用[A];中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 黄世涛;纳豆食品可调理人体生理机能[N];消费日报;2008年
2 徐铮奎;纳豆激酶陷信任危机 行业亟待规范自律[N];中国医药报;2010年
3 李木子;纳豆不等于纳豆激酶 说纳豆溶血栓是张冠李戴[N];粮油市场报;2011年
4 陈列欢;溶栓有了新“钻头”[N];医药经济报;2004年
5 记者何德功;纳豆激酶可溶化血栓[N];人民日报;2003年
6 乌兰;神奇的纳豆[N];人民日报海外版;2002年
7 于濛;快速交通能否“溶栓”[N];中国财经报;2005年
8 秋;比利时用新型激酶溶栓[N];中国高新技术产业导报;2001年
9 任儒倬 董长林 吴延华;瑞通立获两项国家级殊荣[N];国际商报;2010年
10 吴延华;瑞通立被列为国家火炬计划项目及国家级重点新产品[N];中国贸易报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘朔;纳豆激酶基因密码子优化设计与合成及在毕赤酵母中的高效表达[D];南京农业大学;2007年
2 谢秋玲;纳豆激酶液体发酵的条件优化及其调控的研究[D];华南理工大学;1999年
3 张东方;参环毛蚓中抗栓活性蛋白酶的研究[D];辽宁中医学院;2004年
4 郑忠亮;纳豆激酶结构与功能的研究[D];武汉大学;2005年
5 石炳兴;靶向溶栓抗凝双功能融合蛋白的构建表达及在血栓疾病治疗中的应用研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
6 何迎春;非溶栓指征急性脑梗死治疗时间窗及中药复方中风醒脑口服液干预的临床和细胞培养研究[D];成都中医药大学;2004年
7 朱立成;纳豆激酶和hGM-CSF在家蚕杆状病毒表达系统中表达纯化及活性研究[D];浙江大学;2005年
8 苏华波;新型葡激酶突变体的研制、性质及药效学研究[D];复旦大学;2004年
9 齐海萍;豆豉纤溶酶的制备、酶学特性及功能性质研究[D];江南大学;2004年
10 吕淼华;固体生物质对扩张床吸附的影响和方法研究[D];浙江大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 付正纲;纳豆激酶(NK)分离纯化、生物活性[D];华中科技大学;2005年
2 黎婉园;纳豆激酶液体发酵的研究[D];华南理工大学;2011年
3 霍金柱;高效纳豆激酶菌株的筛选及纳豆生产[D];重庆师范大学;2011年
4 王建;纳豆激酶的发酵、纯化条件的优化及开发应用[D];陕西科技大学;2012年
5 梁爽;纳豆激酶肠溶胶囊的制备及其抗血栓作用的研究[D];吉林大学;2011年
6 李会荣;纳豆激酶的优化、提取分离纯化及基因克隆[D];河北联合大学;2011年
7 梁剑光;纳豆激酶发酵控制及其酶学特性研究[D];南京工业大学;2003年
8 曹峰;纳豆活性成分冷冻干燥工艺条件及储存稳定性的研究[D];山东轻工业学院;2008年
9 张利;纳豆激酶溶血栓作用及作用机理的研究[D];内蒙古农业大学;2003年
10 陈景鑫;纳豆激酶微胶囊的制备及其稳定性研究[D];黑龙江八一农垦大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026