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CD4~+CD25~+调节性T细胞在母胎耐受中作用的探索性研究

王轶英  
【摘要】: 目的:研究正常妊娠不同孕期及子痫前期、原因不明反复自然流产、体外受精与胚胎移植孕妇外周血及脐血中CD4~+CD25~+T_r细胞的比例变化,探讨CD4~+CD25~+T_r细胞在妊娠中的作用。 研究CD4~+CD25~+T_r细胞的特征性标志FoxP3及NRP-1及其它免疫相关分子(CXCR4/SDF-1、IDO、HLA-G、CTLA-4等)在母胎界面的表达情况,初步探讨其在母胎耐受中的作用。 研究雌激素对混合淋巴细胞培养体系中CD4~+CD25~+T_r细胞的影响。 方法:应用流式细胞技术检测孕妇外周血及脐血中CD4~+CD25~+T_r细胞的比例变化;分别应用原位杂交法、免疫组化、Westernblot、RT-PCR、Real-time PCR法检测母胎界面胎盘组织中FoxP3、NRP-1、IDO、HLA-G、CXCR4/SDF-1、CTLA-4等表达情况。 混合淋巴细胞培养体系(C57BL/6小鼠脾细胞作为反应细胞,与BALB/C小鼠脾细胞混合)中加入17-β-雌二醇,培养24小时,经荧光抗体标记后,流式细胞仪检测反应细胞的增殖及培养体系中CD4~+CD25~+T_r细胞的变化,并用Real-time PCR法检测培养体系中FoxP3 mRNA的表达。 结果:正常妊娠过程中孕妇外周血中CD4~+CD25~+T_r细胞比例呈规律性变化:妊娠早期较高,中期升至最高,分娩时降至最低,低于正常孕龄非妊娠妇女(P<0.05);反复不明原因自然流产者与正常妊娠分娩时比例接近,低于正常妊娠早期(P<0.05);子痫前期患者CD4~+CD25~+T_r细胞比例较低,低于同孕期的正常妊娠(P<0.05);体外受精与胚胎移植术成功者CD4~+CD25~+T_r细胞比例明显高于未成功者(P<0.05)。 胎盘/绒毛组织中有FoxP3、NRP-1、IDO、HLA-G、CXCR4/SDF-1、CTLA-4的表达且这些免疫相关分子的表达变化趋势与CD4~+CD25~+T细胞比例变化一致。 体外试验中与雌激素共同培养后,混合淋巴细胞培养体系中CD4~+CD25~+T_r细胞的比例明显升高(P<0.05),FoxP3 mRNA表达明显增加(P<0.05)。 结论:CD4~+CD25~+T_r细胞在正常妊娠的免疫耐受中发挥重要作用;胎盘局部表达的免疫相关分子对于维持CD4~+CD25~+T_r细胞所产生的母胎耐受起一定作用;CD4~+CD25~+T_r细胞比例降低可能与一些免疫异常相关妊娠(不明原因反复自然流产、子痫前期等)发病有关;雌激素可诱导CD4~+CD25~+T_r细胞产生,促进混合淋巴细胞培养体系中FoxP3表达,这可能是雌激素诱导妊娠免疫耐受的途径之一。


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