收藏本站
《华中科技大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

悬浮阵列技术检测循环肿瘤细胞预测乳腺癌早期复发转移

柯峰  
【摘要】: 研究背景 乳腺癌是严重威胁妇女健康的疾病,乳腺癌的早期检出能够降低乳腺癌病人的死亡率。乳腺癌病人死亡与早期肿瘤复发转移密切相关,而早期转移往往发生在乳腺癌的较早阶段。而循环肿瘤细胞具有原发肿瘤的特征,肿瘤转移前后都可以检测到循环肿瘤细胞。乳腺癌循环肿瘤细胞的检测意义重大,包括乳腺癌的早期诊断,复发转移的早期诊断,指导术后治疗等多个方面。因此通过改善血液中隐蔽转移肿瘤细胞的检测方法以做出乳腺癌早期复发转移的诊断,对于病人的预后以及治疗措施的选择具有重大意义。 悬浮阵列是一种多功能的生物芯片平台,它有机地整合了编码微珠、激光技术、应用流体学、高速数字信号处理器和计算机运算法则,造就了其检测的高特异性和高灵敏度,可广泛应用于DNA杂交、免疫分析、基因及蛋白质表达谱分子检测等多个研究领域,也是目前唯一被美国FDA批准用于临床诊断的生物芯片平台。 本课题基于Luminex?100激光流式分析仪平台,建立可以同时检测乳腺癌患者外周血中8种循环肿瘤细胞基因(包括hMAM、HER2、CK-19、SBEM、EPG2、hTERT、β-HCG和B305D)表达水平的悬浮阵列方法,以探讨多基因联合检测在乳腺癌早期复发转移诊断中的应用价值。 方法 1.参考国外文献我们选择了8种循环乳腺癌细胞相关基因进行研究,并使用Primer 5.0软件设计引物和探针序列; 2.将人乳腺癌细胞株MCF7加至健康人外周血中,制成含有不同浓度乳腺癌细胞的外周血标本模型,用于建立可以同时检测8种循环肿瘤细胞基因表达水平的逆转录PCR方法; 3.合成好的探针用于包被Luminex微珠,制备Luminex杂交液; 4.建立可以同时检测8种循环肿瘤细胞基因表达水平的悬浮阵列方法,并进行方法学评价; 5.收集乳腺癌患者外周血标本,以悬浮阵列技术检测乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞癌基因; 6.分析乳腺癌相关基因表达与肿瘤组临床病理因素、临床分期的关系,并用Cox比例风险模型寻找乳腺癌术后复发转移的独立预后因素。 结果 成功建立了可以同时检测乳腺癌患者外周血中8种循环肿瘤细胞基因(包括HER2、CK-19、hMAM、SBEM、hTERT、β-HCG、EGP2和B305D-C)表达水平的悬浮阵列测定方法,本方法检测限为从1ml全血中可以检测到50个MCF7细胞。悬浮阵列方法特异性评估分析结果显示,每种微珠上包被的特异性探针仅和相应基因的PCR产物杂交,没有发现交叉反应,未检测到假阴性和假阳性的结果。在全部73例乳腺癌患者中,单个基因检测的阳性率从大到小排列的结果为hMAM、HER2、CK19、SBEM、EPG2、hTERT、β-HCG和B305D,分别为58%、58%、53%、52%、31%、26%、22%和15%;多基因联合检测与血清CA15-3比较,检测乳腺癌预后有更高的灵敏度(P0.05);8个乳腺癌相关基因的表达与患者的年龄、肿瘤大小和肿瘤类型无关(P0.05),其中只有SBEM的表达与临床分期有比较明显的相关性(X2=8.310,P=0.0400.05)。Cox比例风险模型发现hMAM、SBEM、HER2、ER为乳腺癌复发转移的独立预后因素,其相对危险度(HR)分别为2.66、2.88、2.63和0.43。 结论 建立的悬浮阵列方法在乳腺癌的预后判断和临床治疗方面具有很大的实用价值。外周血循环肿瘤细胞hMAM、SBEM和HER2的表达可以作为分子标记物预测乳腺癌的复发转移。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R737.9

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 骆福添,胡孟璇;Cox模型在肿瘤预后因素分析中的应用[J];癌症;1991年01期
2 杨华伟,曹骥,杨南武,刘剑仑,张传珉,陈建思,洪坚善,蒋奕,苏建家;乳腺癌患者外周血SBEM mRNA的检测及其临床意义[J];癌症;2005年07期
3 郑唯强,詹镕洲,龚志锦,李全华,黄丽娟;Cox模型在乳腺癌临床病理学预后分析中的应用[J];第二军医大学学报;1995年03期
4 周生余,石远凯;乳腺癌患者骨髓和外周血中潜伏肿瘤细胞的检测与临床意义[J];国外医学(肿瘤学分册);2001年03期
5 罗晋卿,苏辉民,蒙晞;1981~1996年梧州市女性乳腺癌发病率分析[J];广西预防医学;1999年03期
6 陈静,周金陵,马红兰;恶性肿瘤患者手术使用物品脱落细胞阳性率的观察及管理[J];解放军护理杂志;2000年05期
7 曹文俊,吴华成,璩斌,樊绮诗;外周血基因转录本检测中2种标本处理方法的比较[J];上海医学检验杂志;2003年05期
8 黄进肃,董强刚,周允中,廖美琳,包国良;围手术期血循环中肺癌细胞与预后的关系[J];肿瘤学杂志;2002年01期
9 赵增顺,王少文,焦喜林,陈金辉;胃癌根治术对单细胞入血转移的影响[J];华人消化杂志;1998年07期
10 骆成玉,赵丹宁,李世拥,苑树俊,梁振家;大肠癌骨髓微转移的检测及其对治疗的反应[J];中国肿瘤临床与康复;2001年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张月君;王本忠;张敬杰;王劲;;动态检测乳腺癌患者外周血中CK19表达的临床研究[J];安徽医学;2010年03期
2 万圣云,刘弋,张俊舜;5-Fu缓释剂对直肠癌区域性化疗局部药物浓度的影响[J];安徽医药;2003年04期
3 闵华庆,洪明晃,马骏,张晶,张锦明,张锋,苏勇,邱枋;鼻咽癌新分期的研究[J];癌症;1992年04期
4 杨贤卫,郑国梁,林浩皋;572例放疗前CT扫描的鼻咽癌患者的生存分析:探讨提高生存率的关键因素[J];癌症;1992年05期
5 鲁藜,邓华瑜,范维珂;MUC1的表达与乳腺癌细胞粘附的关系[J];癌症;2004年11期
6 王贵英,王士杰,李勇,范立侨,宋振川,王力利,赵群,焦志凯,张志栋,赵雪峰,王东;磁激活细胞分选结合荧光激活细胞分类检测胃癌骨髓微转移的临床价值[J];癌症;2005年05期
7 J.Arturo Londoo-Vallejo;;影响端粒结构和动力学的微演化过程:端粒在癌症中的作用[J];癌症;2008年07期
8 佘明金;秦凤展;;乳腺癌骨髓微转移的检测及其意义[J];蚌埠医学院学报;2006年02期
9 张键;骆成玉;段煜飞;;乳腺癌新辅助化疗患者外周血乳腺珠蛋白测定的临床意义[J];北京医学;2011年11期
10 杨红;张铀;杨玲;高春林;王欣;;MUC1基因在血液系统恶性肿瘤中的表达及临床意义[J];白血病.淋巴瘤;2006年06期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 李勇;王贵英;王士杰;范立侨;宋振川;王力利;赵群;焦志凯;杨进强;赵雪峰;王爱军;刘羽;张志栋;王冬;;胃癌患者骨髓微转移细胞的MACS富集及检测的临床价值[A];第三届中国肿瘤学术大会教育论文集[C];2004年
2 邱立华;王华庆;刘贤明;张会来;钱正子;李维;侯芸;周世勇;郝希山;;衰竭期骨髓转移癌临床表现及治疗对策[A];第十一届中国抗癌协会全国淋巴瘤学术大会教育论文集[C];2009年
3 裘华森;魏星;周济春;;消化道肿瘤肝转移的介入治疗[A];第五届中国中西医结合围手术期医学研讨会论文集[C];2010年
4 陈欢;魏巧;秦广琪;顾燕子;张颛顼;孙孟红;;悬浮液体芯片在血清样本质控监测的应用[A];上海市制冷学会2013年学术年会论文集[C];2013年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 马震;粪便标本基因标记物mRNA表达检测及其对结直肠癌诊断的研究[D];吉林大学;2011年
2 周密;膀胱尿路上皮癌CCR7表达的意义[D];中南大学;2011年
3 王水;乳腺癌哨兵淋巴结活检的临床和实验研究[D];南京医科大学;2002年
4 李捷;肺癌术中肿瘤细胞血行播散的检测及意义[D];中国人民解放军军医进修学院;2003年
5 陈文军;胃肠道恶性肿瘤微转移的临床研究[D];浙江大学;2003年
6 王道荣;转移相关基因CD44和胃癌关系的研究[D];南京医科大学;2003年
7 徐建国;携带人内皮抑素基因的增殖型腺病毒对结肠癌的治疗作用[D];第二军医大学;2003年
8 朱雪琼;子宫平滑肌肿瘤的鉴别诊断及双向电泳分析[D];浙江大学;2004年
9 吴文川;胰腺癌MUC1-VNTR核酸疫苗的实验研究[D];复旦大学;2004年
10 马全;黑色素瘤相关抗原基因及其抗原肽负载树突状细胞免疫治疗乳腺癌的实验研究[D];南京医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张琳;宫内发育迟缓后发生胰岛素抵抗的分子机制[D];南京医科大学;2010年
2 张志萍;粘蛋白MUC1在子宫内膜腺癌组织中的表达及其与ER、PR蛋白表达的相关性[D];郑州大学;2010年
3 张明强;食管鳞癌患者外周血YY1mRNA表达及其意义[D];郑州大学;2010年
4 王利;新辅助化疗前后宫颈癌组织中CD44V6、MUC1的表达及其意义[D];郑州大学;2010年
5 杨乙;电刺激小脑顶核诱导脑缺血再灌注大鼠TERT的表达及其对线粒体凋亡途径的影响[D];广西医科大学;2011年
6 刘超;远端胃癌肝动脉旁淋巴结微转移的研究[D];广西医科大学;2011年
7 关新垒;MUC1在子宫内膜腺癌的表达及临床意义[D];吉林大学;2011年
8 刘建;非小细胞肺癌患者外周血微转移的意义研究[D];昆明医学院;2011年
9 王蒙;原发性乳腺癌患者循环肿瘤细胞及肿瘤干细胞的检测及临床意义[D];河北医科大学;2011年
10 郭磊;一种新型磁性纳米材料对微量乳腺癌细胞富集的研究[D];华东理工大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 叶静;乳腺癌易感基因的研究进展[J];癌症;2002年09期
2 赵增顺;消化道恶性肿瘤的骨髓单细胞转移[J];国外医学(肿瘤学分册);1996年06期
3 王旭,乔尚琳,梁桂华;灰色动态模型预测恶性肿瘤死亡率的分析[J];济宁医学院学报;1994年04期
4 刘宁,张伟,邵永孚,王洪平,金玉生;hMAM mRNA在乳腺癌组织中的表达[J];实用癌症杂志;2000年06期
5 张天德;用灰色动态模型预测恶性肿瘤死亡率发展趋势[J];现代预防医学;1995年02期
6 曹文俊,拉夏德,吴华成,顾志冬,朱正纲,樊绮诗,王亚新,许叔祥;逆转录-实时定量PCR检测胃癌和肠癌病人CEA基因的表达[J];诊断学理论与实践;2002年01期
7 韩兢,王洁贞,胡平,李会庆;恶性肿瘤死亡率预测模型的探讨[J];中国卫生统计;1998年05期
8 王启俊,祝伟星,袁光亮,邢秀梅;北京地区乳腺癌流行现状及趋势[J];中国肿瘤;1996年06期
9 罗好曾,赵天寿;武威市女性乳腺癌发病率对比分析[J];中国肿瘤;1996年06期
10 罗晋卿,邓小勤,苏辉民,郑裕明;梧州市主要恶性肿瘤发病情况分析[J];中国肿瘤;1997年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王波;子宫内膜癌患者血液中循环肿瘤细胞角蛋白20的检测[J];国外医学.妇产科学分册;2001年03期
2 李旭芬,郑树,张行;结直肠癌患者外周血中癌胚抗原-mRNA的表达及其临床意义[J];中华消化杂志;2002年08期
3 潘吉勇;;RT-PCR检测胃癌患者循环肿瘤细胞的MUC1与c-Met及其临床意义[J];国际肿瘤学杂志;2006年09期
4 马琼;周勇;裘秀春;;循环肿瘤细胞自激注入的研究进展[J];现代肿瘤医学;2011年06期
5 穆新林,李龙芸;肺癌患者循环癌细胞的检测及临床应用[J];中国医学科学院学报;2004年03期
6 韩晶;朱虹光;;免疫磁珠法富集循环肿瘤细胞研究进展[J];复旦学报(医学版);2009年03期
7 于韶荣;魏嘉;钱晓萍;刘宝瑞;;循环肿瘤细胞与个体化药物治疗[J];癌症;2009年11期
8 洪士开;陆云飞;;胃肠道癌循环肿瘤细胞的研究现状[J];临床医学工程;2010年10期
9 乔媛媛;张达矜;何立东;解鹏;赵晓航;;消化道肿瘤外周血循环肿瘤细胞与上皮间叶转变的相关性研究[J];海军总医院学报;2011年01期
10 林晓铭;程德志;蒋成榜;孙成超;何志锋;张翔;;非小细胞肺癌患者循环肿瘤细胞和血管内皮生长因子的联合检测[J];温州医学院学报;2010年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 宋彦龄;安源;张薇婷;朱志;俞春东;杨朝勇;;循环肿瘤细胞捕获检测新方法[A];中国化学会第28届学术年会第3分会场摘要集[C];2012年
2 陈倩;崔巍;戈烽;林平;;循环肿瘤细胞和肺癌TNM分期的相关性研究[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
3 周韵斓;;循环肿瘤细胞:肿瘤检测模式的变革和趋势[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
4 黄士昂;胡艳洁;范灵灵;刘伟;李欣;郑金娥;贺艳丽;;运用多参数流式细胞计数监测乳腺癌Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ期病人外周血中的循环肿瘤细胞及对其预后的评估[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
5 张品南;许杨扬;杨小敏;;血循环肿瘤细胞研究进展[A];2008年浙江省病理学学术年会论文汇编[C];2008年
6 于韶荣;魏嘉;钱晓萍;刘宝瑞;;循环肿瘤细胞与个体化药物治疗[A];第三届中国肿瘤内科大会教育集暨论文集[C];2009年
7 李应龙;石家齐;;膀胱移行细胞癌患者外周血EGFR mRNA的表达及意义[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
8 厉波;季海生;王斌;;套式RT-PCR检测癌胚抗原mRNA在乳腺癌、乳腺增生性病变患者外周血的表达及临床意义[A];第四届全国临床检验学术会议论文汇编[C];2006年
9 王正;黄同海;杨林;林少霖;钱有辉;丘平;欧竹君;;应用免疫磁珠技术检测肺癌患者外周血微转移[A];中华医学会第六次全国胸心血管外科学术会议论文集(胸外科分册)[C];2006年
10 米振国;王斌;李志斌;史天良;任连生;张少云;郭素堂;;树突状细胞疫苗对人化荷人膀胱癌SCID鼠循环微转移转归影响的研究[A];第九届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 刘海英;“捕蝇纸”型循环肿瘤细胞检测装置问世[N];科技日报;2009年
2 刘海英;循环肿瘤细胞具有“自激注入”能力[N];科技日报;2009年
3 刘海英;上皮间质转化基因可用于检测循环肿瘤细胞[N];科技日报;2009年
4 闻谊;美评出年度十大医疗技术创新[N];中国医药报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 秦英刚;循环肿瘤细胞与中、西医治疗肺癌患者疗效及预后的相关性研究[D];北京中医药大学;2013年
2 李世超;循环肿瘤细胞评估乳腺癌手术致微转移风险及辅助治疗疗效的临床初步研究[D];第三军医大学;2012年
3 胡艳洁;循环血液中乳腺癌细胞的鉴定及临床应用[D];华中科技大学;2010年
4 朱自满;T7 RNA聚合酶催化的荧光扩增技术检测结直肠癌循环肿瘤细胞及其临床意义[D];第三军医大学;2008年
5 柯峰;悬浮阵列技术检测循环肿瘤细胞预测乳腺癌早期复发转移[D];华中科技大学;2007年
6 周春;应用Cell-search System检测肾癌患者循环肿瘤细胞的方法探索[D];北京协和医学院;2012年
7 刘志东;非小细胞肺癌循环肿瘤细胞定量检测的临床研究[D];北京市结核病胸部肿瘤研究所;2007年
8 左国华;肝癌患者外周血中循环肿瘤细胞的检测及其生物学特性[D];第三军医大学;2008年
9 任传利;胰腺癌外周血循环肿瘤细胞的鉴定及其生物学意义研究[D];中国协和医科大学;2008年
10 刘毅;采用外周血进行肿瘤分子诊断的转化医学研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高飞飞;食管鳞状细胞癌患者外周血中循环肿瘤细胞的检测和临床意义[D];河北医科大学;2012年
2 任延毅;循环肿瘤细胞与乳腺癌预后关系的荟萃分析[D];辽宁中医药大学;2013年
3 杨阳;胰腺癌不同治疗手段对循环肿瘤细胞的影响[D];苏州大学;2014年
4 方帅;上转换纳米探针在循环肿瘤细胞的富集与检测中的应用[D];苏州大学;2014年
5 李军;食管鳞癌外周血循环肿瘤细胞检测及临床意义[D];南方医科大学;2012年
6 嵇金陵;一种新型免疫磁珠富集技术和肺癌循环肿瘤细胞检测[D];安徽医科大学;2013年
7 李裕明;上皮间质转化标志物在循环肿瘤细胞上表达与肝癌转移相关性研究[D];第三军医大学;2013年
8 陈克秀;流式细胞术检测乳腺癌患者循环肿瘤细胞的表达及其与中医辨证分型的关系[D];福建中医药大学;2013年
9 缪苏宇;Sipal基因多态性与原发性乳腺癌患者相关性及外周血循环肿瘤细胞相关性研究[D];南京医科大学;2012年
10 韩志刚;免疫磁性微球的制备及在乳腺癌诊断中的应用研究[D];内蒙古师范大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026