收藏本站
《华中科技大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

血小板衍生生长因子在人肝癌细胞中的表达及意义

邵勤  
【摘要】: 背景与目的: 血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor, PDGF)及其受体PDGFR(platelet-derived growth factor receptor)在多种人类肿瘤中表达,参与肿瘤发生、发展,因此日益引起关注。本文旨在研究PDGF及PDGFR在人肝癌HepG2细胞中的表达情况及其对细胞增殖和凋亡的作用。在此基础上,观察大黄素对HepG2细胞体外增殖的影响并探讨其与PDGF作用的相关机制。从而为抗肿瘤治疗提供有用的实验依据。 方法: 1.体外培养人肝癌HepG2细胞,用免疫组织化学方法检测细胞中PDGF及PDGFR的表达并予分型。 2.经外源性PDGF-A、PDGF-B细胞因子(0-20ng/mL)作用培养细胞后,用MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞仪(FCM)检测细胞周期分布和细胞凋亡;免疫组织化学半定量分析NF-κB和PDGFR表达情况;电镜观察细胞超微结构变化。 3.体外培养HepG2细胞,经不同浓度PDGF或PDGF与大黄素共同作用。实验分组:⑴对照组;⑵PDGF-A(1.25ng/mL)处理组;⑶PDGF-A(2.5ng/mL)处理组;⑷PDGF-A(5.0ng/mL)处理组;⑸PDGF-A(10ng/mL)处理组;⑹PDGF-A(20ng/mL)处理组;⑺PDGF-B(1.25ng/mL)处理组;⑻PDGF-B(2.5ng/mL)处理组;⑼PDGF-B(5.0ng/mL)处理组;⑽PDGF-B(10ng/mL)处理组;⑾PDGF-B(20ng/mL)处理组。用MTT法检测细胞活力;FCM检测细胞周期和细胞凋亡;免疫组织化学法检测细胞NF-κB的表达变化情况。经不同浓度大黄素(1.0μg/mL、2.0μg/mL、4.0μg/mL)作用HepG2细胞,免疫组化半定量分析PDGF蛋白表达变化情况。 结果: HepG2细胞表达PDGF-A、PDGF-B及其受体PDGFR-α、PDGFR-β。PDGF-A、PDGF-B、PDGFR-β为胞质阳性表达,PDGFR-α为胞质及胞核阳性表达。 外源性PDGF-A及PDGF-B均可促进HepG2细胞增殖,细胞增殖曲线显示作用强度与生长因子浓度关联,在0-20ng/mL浓度范围内呈峰形变化,5ng/mL浓度时作用最强;抑制细胞凋亡,影响细胞周期进展,使G0/G1期细胞比例下降,S期细胞比例上升,增殖指数PI升高;并促进细胞NF-κB表达,对PDGFR表达有上调作用,PDGF-A以α受体上调作用为主,PDGF-B以β受体上调作用为主。且PDGF-B作用强于PDGF-A。电镜观察细胞超微结构显示极度增殖活跃表现。 大黄素可明显抑制PDGF诱导的HepG2细胞增殖,促进细胞凋亡,改变细胞周期,使G2/M期细胞比例升高,S期细胞比例降低。大黄素还可阻断PDGF对NF-κB表达增强的诱导作用。且大黄素能抑制HepG2细胞自身PDGF的表达,作用强度呈剂量依赖性。 结论: HepG2细胞自分泌表达PDGF及PDGFR。 PDGF/PDGFR对肝癌细胞的发生、发展起重要的促进作用。PDGF对HepG2细胞生长的影响作用可能与其促进NF-κB表达及上调PDGFR表达有关。 大黄素对PDGF诱导的HepG2细胞增殖有显著的抑制效应,其机制可能与直接抑制PDGF的作用有关。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R735.7

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王辉;叶燕;黄树林;禹志领;;Hsp70.1在冬凌草甲素处理的肝癌细胞中的作用研究[J];广东药学院学报;2011年04期
2 彭安;陈敏珍;申东兰;;康莱特注射液诱导Bel-7402人肝癌细胞分化的研究[J];齐齐哈尔医学院学报;2011年14期
3 李胜昔;曾斌;石巍;廖爱军;曹文涛;;姜黄素对肝癌细胞HepG2的抗癌作用及P21WAF1/CIP1表达的影响[J];现代生物医学进展;2011年14期
4 梁慧敏;时小燕;随裕敏;朱斌;;莲房花青素诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的研究[J];中国实用医药;2011年19期
5 刘英芹;姚海涛;王秀岩;张晓波;孙广臣;;大蒜素诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡的形态观察[J];中外医学研究;2011年23期
6 李羚青;赵映前;;MTT法检测牛黄参胶囊对HepG2细胞增殖影响的实验研究[J];湖北中医杂志;2011年09期
7 孔彦平;张静;肖睿娟;郭国英;王毅刚;;AFP调控的携带Mn-SOD基因的腺病毒对肝癌细胞的杀伤作用[J];浙江理工大学学报;2011年05期
8 姜子瑜;华海清;秦叔逵;杨爱珍;;复方苦参注射液对人肝癌细胞SMMC-7721增殖与细胞周期的影响[J];吉林中医药;2011年07期
9 韩大跃;张晨;;榄香烯联合热疗体外对肝癌SMMU7721细胞增殖的影响[J];临床军医杂志;2011年04期
10 唐佳艳;洪阳;向敏;郑洋;王艳;胡晓霞;潘娅;王旭东;周力;陈腾祥;;钙激活中性蛋白酶在肝癌细胞迁移能力中的作用[J];贵阳医学院学报;2011年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李祺福;洪水根;;中国鲎血低分子活性物质对癌细胞增殖分化的调控[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
2 张锦堃;张娟;李军;;树突状细胞与肝癌细胞融合瘤苗的制备和特性[A];第五届全国生物医学体视学学术会议、第八届全军军事病理学学术会议、第四届全军定量病理学学术会议论文汇编[C];2002年
3 张之勇;韩丽辉;孙汶生;;神经营养因子受体TRKB与肝癌细胞BEL7402抵抗失巢凋亡的研究[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年
4 金吴东;陈龙华;;mIκBα基因转染肝癌细胞HepG2的放射增敏作用[A];2007第六届全国放射肿瘤学学术年会论文集[C];2007年
5 田德安;;Smac和AIF基因在肝癌细胞中的表达及与细胞凋亡关系的试验研究[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
6 傅遍红;吴泽志;秦建;;整合素亚单位对肝癌细胞与层粘连蛋白趋化迁移运动的影响[A];渗流力学与工程的创新与实践——第十一届全国渗流力学学术大会论文集[C];2011年
7 王芳;杨富;张玲;徐丹;霍希松;毕海珊;孙树汉;;微小RNA17-5p通过靶基因E2F1激活热休克蛋白27促进肝癌细胞转移(英文)[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年
8 施冬云;冯颖;谢飞舟;刘珊林;;缺氧应激对正常肝细胞和肝癌细胞能量代谢通路的不同影响[A];中国活性氧生物学效应学术会议论文集(第一册)[C];2011年
9 毛华;袁爱力;赖卓胜;张振书;张亚力;周殿元;;VEGF诱导肝癌细胞恶性表型及p38MAPK信号通路的调控作用[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
10 赵航宇;梁健;姜晓峰;杜志安;王学范;魏云涛;姜洪磊;;斑蝥酸钠维生素B6诱导肝癌细胞HepG2凋亡的实验研究[A];第十二届全国肝癌学术会议论文汇编[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 李大庆;我科学家发现肝癌细胞演化和迁移新路径[N];科技日报;2011年
2 贾玉容;Survivin蛋白促进肝癌细胞快速增生[N];中国医药报;2004年
3 江山;小心肝癌细胞“吃”血糖[N];大众卫生报;2005年
4 胡德荣;纳米磁微粒烧死肝癌细胞[N];健康报;2005年
5 史凤芝 陈英云;砒霜可诱导肝癌细胞“自杀”[N];大众卫生报;2000年
6 朱恒顺;山大一项免疫学成果通过鉴定[N];科技日报;2002年
7 记者 张建松;肝癌细胞为何转移[N];新华每日电讯;2000年
8 张建松;肝癌细胞转移相关染色体被发现[N];中国医药报;2000年
9 李 戎 闫智勇 李文军 张天娥;中医药防治原发性肝癌机理研究进展[N];中国中医药报;2003年
10 李洁;几种中药抗癌又保肝[N];医药经济报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 宋关斌;肝癌细胞力学特性及其与细胞周期的关系研究[D];重庆大学;2002年
2 吴建兵;RNA干扰抑制BMP-2基因表达对肝癌SMMC7721细胞增殖和侵袭的影响及机制[D];南昌大学;2010年
3 崔恒武;电化学对体外肝癌细胞生物学行为的作用及对肝癌患者免疫功能的影响[D];第二军医大学;2002年
4 刘妍;双特异性抗肿瘤重组腺病毒对肝癌细胞及其模型动物的治疗作用研究[D];吉林大学;2011年
5 黄海燕;表达Apoptin基因重组腺病毒对肝癌细胞BEL-7402及转移模型的抑制作用[D];吉林大学;2011年
6 李劲东;MCT1、CD147在人肝癌中的表达及其反义RNA表达载体对肝癌细胞的影响[D];中南大学;2010年
7 张弘超;树突状细胞联合多烯紫杉醇对肝癌生物学行为的影响[D];中国医科大学;2008年
8 谭晓虹;P21~(WAF1/CIP1)对肝癌细胞SMMC-7721生物学行为的影响及其与POLD1基因关系初探[D];广西医科大学;2010年
9 曹献英;纳米羟基磷灰石诱导肝癌细胞死亡的作用靶点及机理研究[D];武汉理工大学;2005年
10 张之勇;肝癌细胞通过Synoikis-like方式抵抗失巢凋亡的研究[D];山东大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 邵勤;血小板衍生生长因子在人肝癌细胞中的表达及意义[D];华中科技大学;2007年
2 杨辉;抑制促血管生成素-2基因表达对肝癌血管生成的影响[D];遵义医学院;2010年
3 张勇;B7-1基因转染肝癌细胞的实验研究[D];苏州大学;2002年
4 来文;肝癌细胞膜单克隆抗体Hepama-1的质量控制及其放射性标记物的临床前毒理学研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2004年
5 赵航宇;斑蝥酸钠维生素B6联合X射线诱导肝癌细胞HepG2凋亡的研究[D];中国医科大学;2010年
6 沈徐宁;NSC 74859通过抑制STAT3的表达可以增加Cetuximab对肝癌细胞的生长抑制作用[D];浙江大学;2010年
7 张璐;小鼠H22肝癌细胞肺高转移株的建立及其生物学特性的测定和RhoC基因的表达[D];中国医科大学;2010年
8 张晋;视蛋白基因3(opsin3)参与调节肝癌细胞5-Fu耐药性的机制研究[D];南京医科大学;2010年
9 李权林;苦参碱对肝癌细胞NF-κB、p53、DcR3 mRNA表达的影响[D];川北医学院;2011年
10 刘雪梅;rAdinbitor的抗肿瘤作用及其机制研究[D];大连医科大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026