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《华中科技大学》 2007年
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干旱和盐胁迫条件下空心莲子草差异蛋白的鉴定

田秀红  
【摘要】: 深入了解植物抗旱、抗盐的生理特性与分子遗传基础,研究相关基因的表达及基因产物的调控,已成为近年来植物分子生物学研究领域的前沿内容之一。蛋白质是基因表达的最终产物,在植物抵抗外界胁迫中扮演着重要的角色。 实践证明空心莲子草(Alternanthera philoxeroides (Mart.)Griseb)适应性广,抗逆性强。研究空心莲子草的抗逆机理,可以为提高植物抗逆性提供理论依据。为鉴定分离干旱和盐胁迫前后空心莲子草根、茎、叶各组织差异表达的蛋白质,并为将来进一步分离其编码基因,本文提取了干旱和盐胁迫条件下空心莲子草根、茎、叶各组织蛋白质,并进行了SDS-PAGE分析。 研究结果表明:空心莲子草在干旱和盐胁迫条件下根、茎、叶各组织蛋白质表达量都有所变化。在干旱胁迫下空心莲子草叶中42 kD、茎中66 kD、根中72 kD蛋白表达量都明显增加,而根中29 kD蛋白表达量减少;在盐胁迫下空心莲子草叶中69 kD、茎中66 kD、根中40 kD蛋白表达量都明显增加,而茎中38 kD蛋白表达量减少。这些结果为将来进一步用质谱技术和二维电泳技术分离分析空心莲子草抗旱抗盐相关蛋白质奠定了基础。 肌动蛋白基因编码生物体内一种很重要的组成型表达蛋白质,被看作看家基因,经常用在Northern和半定量、定量RT-PCR中作为内标。本研究还分离了空心莲子草肌动蛋白基因,根据Genbank上一藜科植物(Chenopodium rubrum)的Actin基因的EST序列,设计引物进行RT-PCR,扩增后测序得到230 bp长的核苷酸序列。经同源性比较,这条序列与上述藜科植物Actin的EST序列基本一致,表明我们得到了空心莲子草肌动蛋白部分编码序列,并已被我室其他同学用在Northern和半定量RT-PCR中作为内标。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S451

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