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《华中科技大学》 2010年
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功能化自组装多肽水凝胶与神经干细胞生物相容性研究

张振兴  
【摘要】: 目的:获得均一性的神经干细胞方法:取新生1天内乳鼠的大脑皮层,机械分离出神经干细胞,无血清培养液培养,倒置相差显微镜观察干细胞的生长情况,Nestin免疫荧光法对神经干细胞进行鉴定结果:分离培养出的细胞聚集成神经球,呈悬浮状,可在体外大量增殖和长期存活。Nestin染色呈阳性结论:体外成功地分离及培养了大鼠NSCs 目的:设计与合成功能化自组装多肽水凝胶方法:采用固相法合成多肽RADA16与RADA16-IKVAV,将两者混合制备功能化自组装多肽水凝胶IKVAVmx。原子力显微镜观察其形态学特征结果:IKVAVmx可自组装形成水凝胶,原子力显微镜证实其由纳米纤维交织而成结论:成功地合成了IKVAVmx自组装多肽水凝胶 目的:检测功能化自组装多肽水凝胶体外与神经干细胞的生物相容性方法:采用无血清培养法从新生大鼠皮层分离培养NSCs。将NSCs分别接种到功能化自组装多肽水凝胶IKVAVmx(实验组)与自组装多肽水凝胶RADA16(对照组)表面。用CCK-8法检测细胞在两种水凝胶中的增殖能力。倒置显微镜观察细胞在两种水凝胶中的形态。激光扫描共聚焦显微镜观察细胞迁移情况。应用Nestin、MAP2、GFAP和CC-1免疫荧光染色,检测神经干细胞分化情况。Western blot检测两种水凝胶中NSCs的MAP2蛋白表达情况。结果:实验组中NSCs的增殖及迁移能力均明显高于对照组(P0.05);实验组中MAP2阳性细胞百分率较对照组显著提高(P0.05),GFAP阳性细胞百分率较对照组显著降低(P0.05)。实验组中MAP2的蛋白表达含量明显高于对照组(P0.05)。结论:功能化自组装多肽水凝胶具有良好的细胞生物相容性,从而为神经组织工程提供了一个有前景的生物材料。
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R741

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