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《华中农业大学》 2010年
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猪圆环病毒2型(WH株)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒混合感染致病性的研究

宋飞  
【摘要】: 通过流行病学调查,PCV2分布极为广泛,猪群抗体阳性率较高,PRRSV是严重危害猪群的健康健康、给世界养猪业带来巨大损失的重要传染病,并且这两种病毒的混合感染率在PCV2阳性猪中占很大比例,并且常常伴随着细菌或其他病原体的继发感染,造成猪群严重的临床症状甚至很高的死亡率。而当前人们尚未清楚地认识到这两种病毒的协同致病机制,给PCV2和PRRSV的混合感染的防制带来困难。因此本实验以猪肺泡巨噬细胞(Porcine alveolar macrophages, PAMs)为模型观察PCV2和PRRSV共感染在体外对PAM的影响;通过人工感染仔猪,进行PCV2和PRRSV单独感染及混合感染对仔猪致病性的研究,以期为两病毒混合感染的诊断和防制提供依据。 一、PCV2和PRRSV混合感染PAMs的影响 体外分离培养PAMs后,分别单独感染PCV2、PRRSV和按照不同顺序混合感染PCV2和PRRSV,于接种后6h、24h、48h、60h取样,用real-time PCR和间接免疫荧光(indirect immunofluorescence, IFA)检测PCV2的滴度,同时观察细胞病变和细胞凋亡率,检测细胞因子如TNF-α、IL-8和IFN-γ的表达水平。结果如下: 1、PAM在体外培养不分化增殖,real-time PCR和IFA结果都显示了PCV2在PAMs中没有增殖现象,PCV2和PRRSV混合感染虽不促进PCV2的增殖,但是造成了PCV2在胞浆的分布不均匀,成点状或放射状分布。 2、相对于病毒单独感染组,PCV2和PRRSV混合感染组造成了很高的细胞死亡率(50%)和较高的细胞凋亡率(15%)。 3、相对于病毒单独感染组,PCV2和PRRSV混合感染组TNF-α、IL-8的表达量明显增加,但是IFN-γ的表达水平也明显受到抑制,表现出一定程度的免疫抑制。 二、、PCV2和高致病性PRRSV人工感染仔猪临床学指标的测定与分析研究 通过人工感染28日龄断奶仔猪,建立PCV2和PRRSV单独感染以及PCV2/PRRSV混合感染病理的模型。对感染猪的临床症状、排毒量、病毒在组织中的分布规律和病理变化进行检测。 1.初步研究表明PCV2/PRRSV混合感染能复制出典型的PMWS临床症状,造成猪只发热、精神沉郁、进行性消瘦,明显严重于任一病毒单独感染组。 2.通过对不同病毒感染组的病毒血症、排毒规律进行检测,结果显示,PCV2感染组的病毒血症持续整个试验过程,而PCV2/PRRSV混合感染组血清中病毒载量高于PCV2单独感染组。 3.剖检结果显示PCV2和PRRSV混合感染能引起与PMWS一致的严重的组织病变,包括间质性肺炎和淋巴组织出血肿大,与临床的PMWS病变基本相一致,并且混合感染比任一单独病毒感染症状都严重。定量PCR检测PCV2在各个组织的分布,结果显示PCV2主要分布在像脾脏、扁桃体、淋巴结等一些免疫器官和组织,并且PCV2/PRRSV混合感染促进了PCV2在组织中的增殖,加重了组织的损伤。
【学位授予单位】:

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