收藏本站
《华中农业大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

ETEC对断奶腹泻仔猪胃肠道紧密连接蛋白ZO-1的影响

高红梅  
【摘要】: 仔猪早期断奶技术是国内外集约化和规模化养猪生产中普遍关注和采用的先进技术。仔猪在断奶前后胃肠道微生物区系发生了很大变化。目前研究认为仔猪早期断奶后产生腹泻这一临床症状的主要原因是幼龄仔猪消化道组织及其功能发育尚未完全成熟,断奶应激易导致仔猪胃肠道功能紊乱,使仔猪胃、肠道屏障受损,从而导致仔猪“断奶综合征”的发生。研究表明:肠黏膜上皮的完整性是仔猪早期断奶综合征发生的关键。肠黏膜屏障包括完整的肠上皮细胞及其细胞间连接所构成的机械屏障、肠道正常微生物群所构成的生物屏障和肠道相关淋巴样组织及其分泌抗体所构成的免疫屏障。紧密连接是肠上皮细胞间的主要连接方式,对维持上皮细胞极性、调节肠屏障的通透性、防止细菌、内毒素和毒性大分子物质进入体内发挥着重要作用。ZO-1是组织紧密连接的重要组成成分,其表达上调可调节组织的通透性。因此,在分子生物学水平上检测ZO-1的变化对研究断奶仔猪腹泻的机理具有重要的意义,同时可以降低仔猪断奶综合征的发病率。 研究目的:建立起PCR反应体系,可以同时检测LT、ST-Ⅰ和ST-Ⅱ三种大肠杆菌毒力因子。检测紧密连接蛋白ZO-1在断奶仔猪ETEC性腹泻时胃肠道组织中的分布及表达水平及意义。 实验方法:本实验选取24头断奶仔猪,攻入ETEC,分别取1d、3d、5d、7d的胃黏膜、回肠及结肠组织,采用半定量PCR法摸索反应适合的条件,实时荧光定量PCR的方法检测胃肠道紧密连接蛋白ZO-1以及内参基因GAPDH的mRNA丰度;采用Western blotting的方法检测胃肠道紧密连接蛋白ZO-1的蛋白表达量。 实验结果:成功地建立了ETEC肠毒素三种毒力因子LT、ST-Ⅰ和ST-Ⅱ的PCR分子生物学检测方法,为研究ETEC性断奶仔猪腹泻提供了科学的理论依据。实时荧光定量PCR结果表明:ZO-1 mRNA的表达水平与组织的分化水平有关,随着断奶仔猪腹泻程度的加重,ZO-1的表达率也随之下降。胃肠道紧密连接蛋白ZO-1在三种组织中均有表达,可见在攻入ETEC后5d、7d表达量差异极其明显,且其表达量随着腹泻时间的延长逐渐呈降低趋势;Western blotting结果表明:ZO-1蛋白表达量逐渐降低,表达水平明显低于内参基因的表达量。 分析总结:通过本实验成功的揭示了肠屏障功能调控的部分分子机制,对于提升该领域的基础科学理论水平具有重要的临床实践意义,而且为断奶仔猪生产提供了技术研究平台,为营养调控仔猪肠道结构与功能提供了一些理论依据,为防治“仔猪早期断奶综合征”,提高仔猪成活率开辟出了一条新思路,从而促进养猪业的增效和增收。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S858.28

知网文化
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 高志光,秦环龙;肠上皮细胞紧密连接的生物学功能及在肠屏障中的作用[J];肠外与肠内营养;2005年05期
2 彭镜;尹飞;甘娜;张红媛;;体外血脑屏障模型的建立[J];中国当代儿科杂志;2005年06期
3 张雪寒,何孔旺,张书霞;产肠毒素性大肠杆菌肠毒素的研究概况[J];动物医学进展;2003年03期
4 赵思成;仔猪断奶后下痢与日粮[J];国外畜牧学(猪与禽);1996年01期
5 谢华,何韶衡,郑坚;蛋白酶抑制剂对肥大细胞类胰蛋白酶分泌的影响[J];免疫学杂志;2002年04期
6 谢华,何韶衡,陈萍,于润江;哮喘与非哮喘中肥大细胞脱颗粒的研究[J];免疫学杂志;2003年01期
7 鲍欢,包仕尧;缺氧后血脑屏障紧密连接变化的分子机制[J];国外医学(脑血管疾病分册);2005年08期
8 张强,毛泽彬,张志文,辛殿旗,郭应禄;肾癌相关基因克隆——肾癌cDNA消减文库的构建[J];生物化学与生物物理进展;2000年03期
9 何韶衡,谢华,何永松;蛋白酶激活受体2(PAR-2)激动剂对肥大细胞释放类胰蛋白酶的影响[J];生理学报;2002年06期
10 季国忠;朱人敏;;胃黏膜屏障在消化性溃疡中作用的研究进展[J];现代消化及介入诊疗;2006年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈兰英,赵桢,王晓涛,屈二军,陈建南;HSP70基因在人胃癌、食道癌及宫颈癌中高表达和癌变关系的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年04期
2 程烽;盛燕;施静艺;陈漪;徐潮;刘智;梁军;潘春明;朱忠勇;宋怀东;;重叠延伸PCR法构建UGRP1基因启动子的点突变表达载体[J];癌变.畸变.突变;2007年01期
3 温居一;张积仁;李鹏;张军;王斌;;NADH对二乙基亚硝胺所致L02人肝细胞株p53基因突变和c-erbB2基因表达的影响[J];癌变.畸变.突变;2009年05期
4 金艺凤;李铁臣;王莹;刘东华;孙珍贵;;ERCC1和XPD单核苷酸多态性与非小细胞肺癌铂类化疗敏感性的关系[J];癌变·畸变·突变;2010年05期
5 王继英;武英;郭建凤;呼红梅;张印;;莱芜黑猪保种群促卵泡素β亚基和雌激素受体基因、基因型变化情况[J];山东农业科学;2007年01期
6 陈静;胡晓辉;苗华荣;张建成;禹山林;;花生SRAP-PCR技术体系的优化[J];山东农业科学;2008年05期
7 陈长宝;朱树华;周杰;;改良CTAB法提取成熟肥城桃果实的总RNA[J];山东农业科学;2009年05期
8 葛宏华,肖亚中,姚建平;人心室肌球蛋白轻链1基因的克隆及其体外的表达与纯化[J];安徽大学学报(自然科学版);2004年06期
9 侯新东;盛桂莲;张桦;腊萍;;质粒DNA提取方法的探讨[J];安徽农学通报;2006年13期
10 吴金节,章孝荣,王勇,蔡良清,刘有水;复方中药制剂防制仔猪早期断奶应激综合症的研究[J];安徽农业科学;2001年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 朱林;江昌俊;叶爱华;李叶云;余梅;邓威威;;茶树ATP硫化酶和硒半胱氨酸甲基转移酶基因植物表达载体的构建[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 徐波;张莉;李启云;王景会;姜媛媛;杨贞耐;;牛凝乳酶成熟肽基因在大肠杆菌中的表达[A];中国奶业协会年会论文集2008(下册)[C];2008年
3 刘冬光;廖娟红;于清龙;陈颖钰;陈焕春;郭爱珍;;融合蛋白Rv3872/CFP-10/ESAT-6的制备及在牛结核诊断中的初步应用[A];中国奶业协会年会论文集2009(上册)[C];2009年
4 张海龙;田兆丰;董志;张晏如;张飞云;;多花黑麦草斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
5 闫云君;蔡勇;杨江科;;基于易错POR技术的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)脂肪酶YZO2的定向进化[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(一)[C];2007年
6 李玫;廖宝文;;红树林湿地烷烃降解菌的分离筛选[A];第十三届中国科协年会第16分会场-沿海生态建设与城乡人居环境学术研讨会论文集[C];2011年
7 郭奕斌;陈路明;孟亚仙;王晶晶;杜传书;潘敬新;;一个广东四川家庭的IDS基因新突变[A];第六届全国优生科学大会论文汇编[C];2006年
8 于占东;赵双宜;何启伟;王翠花;牟晋华;刘春香;;抗芜菁花叶病毒转基因大白菜的研究[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
9 龚束芳;杨涛;车代弟;;偃麦草根茎非质体蛋白质修饰冰晶能力的观察[A];2007年中国园艺学会观赏园艺专业委员会年会论文集[C];2007年
10 王英;滕齐辉;曹慧;胡锋;崔中利;;淹水和旱作水稻土中细菌群落多样性的空间分布[A];第四次全国土壤生物和生物化学学术研讨会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐荣燕;嗜热真菌糖苷酶的基因克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
2 殷慧群;猪诱导性多潜能干细胞的建立[D];安徽农业大学;2010年
3 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
4 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
5 郭新军;拟黑多刺蚁肌细胞增强因子2与肌钙蛋白Ⅰ亚基基因的克隆及其在发育中的表达研究[D];陕西师范大学;2010年
6 生书晶;何首乌芪合酶基因(FmSTS)的克隆、鉴定及转化拟南芥研究[D];华南理工大学;2010年
7 梁东;苹果山梨醇代谢相关基因的分子特性研究[D];西北农林科技大学;2010年
8 朱彦涛;甘蓝型油菜Polima CMS和陕2A CMS的形态和生化特征及其胞质遗传物质的比较研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 温武军;鲤抗菌肽基因的克隆及其功能研究[D];山东师范大学;2011年
10 王秀娟;嗜热真菌纤维二糖水解酶(CBHⅠ、CBHⅡ)和内切葡聚糖酶(EGⅠ)的分子改造[D];山东农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王树云;斑点叉尾鮰病毒ORF6和ORF10基因的原核表达及其功能的初步研究[D];华中农业大学;2010年
2 汪艳杰;水稻polycomb基因家族甲基化状态初步检测[D];华中农业大学;2010年
3 王伟;恶臭假单胞菌表面展示细菌漆酶及对染料的脱色性能[D];华中农业大学;2010年
4 黄辉;哈维弧菌表面抗原的克隆和真核表达[D];华中农业大学;2010年
5 段龙川;产毒素多杀性巴氏杆菌重组沙门氏菌基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2010年
6 龚瑞;粘附素ClfA和Cna对金黄色葡萄球菌乳腺炎的免疫保护研究[D];华中农业大学;2010年
7 刘源;猪胸膜肺炎放线杆菌双组分调控系统ΔnarQ/narP突变株构建及功能研究[D];华中农业大学;2010年
8 李善文;蟾蜍灵对大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响[D];南京医科大学;2009年
9 许腊梅;黄连素对大鼠非酒精性脂肪性肝病的防治作用[D];南京医科大学;2010年
10 辛宁;PDX-1真核表达载体构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达[D];郑州大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张兆山,李淑琴;编码大肠杆菌不耐热肠毒素和耐热肠毒素基因的融合[J];军事医学科学院院刊;1993年01期
2 王秀丽,韩淑华,黄瑾;哮喘病人抑制性T淋巴细胞作用的研究[J];免疫学杂志;2002年01期
3 黄江菊,洪苏玲,杨玉成;变应性鼻炎病人IL-4、IL-5和GM-CSF的水平观察[J];免疫学杂志;2002年02期
4 谢华,何韶衡,郑坚;蛋白酶抑制剂对肥大细胞类胰蛋白酶分泌的影响[J];免疫学杂志;2002年04期
5 汪江,陈添弥;人产肠毒素大肠杆菌ST、LT-B肠毒素基因融合的研究[J];生物工程学报;1995年02期
6 吕沅岡,喻峰;细胞培养中支原体污染的检测[J];细胞生物学杂志;1992年02期
7 许崇波,卫广森,王卓,于凤芹,冯书章,王文成,马成国,李尚波,张万林;大肠杆菌肠毒素ST_1-LT_B融合基因的高效表达[J];畜牧兽医学报;1999年03期
8 彭镜,尹飞,毛定安;川芎嗪对培养大鼠星形胶质细胞在糖氧剥离损伤中的保护作用[J];中风与神经疾病杂志;2004年05期
9 丁乂,俞莉章,李鸣,刘漓波,钟华;人肾颗粒细胞癌细胞系(GRC-1)的建立及其生物学特性[J];中华泌尿外科杂志;1995年01期
10 钟华,顾方六,俞莉章,丁义,刘漓波,杨定成;白细胞介素6在肾癌和膀胱癌细胞系中的表达[J];中华泌尿外科杂志;1996年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈国胜;仔猪早期断奶后腹泻的防治措施[J];信阳农业高等专科学校学报;2000年03期
2 张国平;谈谈仔猪早期断奶应注意事项[J];中国农村小康科技;2001年Z2期
3 蔡玖宗;仔猪早期断奶的技术要求(上)[J];四川畜牧兽医;1999年08期
4 蔡玖宗;仔猪早期断奶的技术要求(中)[J];四川畜牧兽医;1999年09期
5 王世勋;仔猪早期断奶技术[J];福建畜牧兽医;2000年01期
6 丁玉春,朱丹;仔猪断奶腹泻的防治[J];四川畜牧兽医;2000年01期
7 张国平;谈谈仔猪早期断奶应注意事项[J];中国农村科技;2001年03期
8 刘净;仔猪早期断奶的商榷[J];湖北农业科学;1984年03期
9 王福祥;;仔猪早期断奶效果好[J];现代畜牧兽医;1984年01期
10 张建生,顾建平,孙士铨,钱志祥,苏仲伦,李齐贤,姜子华;仔猪早期断奶的后效作用研究[J];中国畜牧杂志;1993年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 吴永福;姜中其;;某规模化猪场仔猪断奶腹泻大肠杆菌毒力基因与耐药性的检测及其关系的研究[A];浙江省生理科学会2008年学术年会论文汇编[C];2008年
2 姜中其;由昭红;方维焕;王娜;孙建华;宋坤;;肠毒素型大肠杆菌K88和F18菌毛对产蛋鸡特异性抗体消长规律的研究[A];浙江省生理科学会2006年学术年会论文汇编[C];2006年
3 李桉;丑武江;张文辉;;乳猪教槽料对断奶仔猪生产性能的影响[A];2010植物提取物与营养及应用技术交流研讨会论文集[C];2010年
4 李文满;刘海军;刘可越;解永贵;戴飞;;运用现代养猪新技术净化传染病[A];第四届重庆饲料工业暨养殖行业发展战略研讨会论文集[C];2008年
5 黄华山;;营养调控对早期断奶仔猪腹泻的影响[A];2009山东饲料科学技术交流大会论文集[C];2009年
6 丁桂荣;邱联波;王晓武;李康樗;张亚美;徐胜龙;周咏春;张杰;谭娟;谢学军;王晋;李予蓉;郭国祯;;紧密连接蛋白ZO-1参与电磁脉冲诱导的大鼠血脑屏障通透性增加[A];第十一次中国生物物理学术大会暨第九届全国会员代表大会摘要集[C];2009年
7 黄成金;黄丽娜;黄献;韦俊锋;;保育舍应用热风炉保温的效果分析[A];中国畜牧兽医学会养猪学分会第五次全国会员代表大会暨养猪业创新发展论坛论文集[C];2010年
8 孙娅丽;杨国宇;王艳玲;李宏基;韩立强;郭豫杰;;仔猪Galectins基因在断乳前后胃肠道组织的表达差异[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
9 刘艳芬;许丽;;谷氨酰胺对早期断奶仔猪的作用[A];猪营养与饲料研究进展——第四届全国猪营养学术研讨会论文集[C];2003年
10 唐诗;;北京市国营农场管理局的养猪生产回顾[A];养猪三十年记——纪念中国改革开放养猪30年文集(1978-2007)[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 太原市小店区小店街办畜牧兽医站 任臭小;仔猪断奶腹泻的防治[N];山西科技报;2009年
2 曹宏伟;仔猪早期断奶好[N];江苏科技报;2003年
3 张士刚 兰农;仔猪早期断奶综合症的防治[N];湖北科技报;2003年
4 蔡新文;仔猪早期断奶莫大意[N];河北农民报;2008年
5 迁安市委外宣局 李建军 刘虹;科学养猪效益高[N];河北科技报;2011年
6 李志强;仔猪早期断奶讲科学[N];山东科技报;2002年
7 盛善雯;仔猪早期断奶补料好[N];湖北科技报;2001年
8 本报记者 徐占升;农业专家传授种养技巧[N];福建日报;2011年
9 清苑职教中心畜禽门诊 黄晓想 李艳伦;早断奶仔猪须精心喂养[N];河北科技报;2003年
10 北京华都种猪繁育有限责任公司 李官兵;降低仔猪断奶前死亡率的方法[N];中国畜牧水产报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘忠臣;不同来源脂肪对仔猪的营养效应及对E.coli攻毒的保护作用研究[D];四川农业大学;2011年
2 纪鹏;人类ZO-1蛋白第二个PDZ结构域的溶液结构与功能[D];中国科学技术大学;2010年
3 鲍欢;缺氧对血脑屏障的影响及其分子机制[D];苏州大学;2006年
4 曾娟;肠易激综合征肠粘膜屏障功能的研究[D];山东大学;2008年
5 董亚珞;肿瘤坏死因子α促进大肠杆菌穿过肠上皮细胞屏障的机制研究[D];中国医科大学;2008年
6 王昕;环境污染物PFOS引起血脑屏障通透性增高的机制研究[D];中国医科大学;2006年
7 王丽杰;血小板活化因子受体拮抗剂对内毒素血症幼年大鼠肠屏障功能保护作用的研究[D];中国医科大学;2006年
8 许玲芬;血小板活化因子致肠黏膜机械屏障损伤的机制及肠三叶因子的保护作用[D];中国医科大学;2008年
9 郭磊;过表达Vmp1通过调控ZO-1抑制肝细胞癌侵袭转移[D];中南大学;2009年
10 杨家军;早期断奶仔猪肠上皮细胞氧化与损伤及二氢杨梅素对其调控作用[D];中国农业科学院;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高红梅;ETEC对断奶腹泻仔猪胃肠道紧密连接蛋白ZO-1的影响[D];华中农业大学;2010年
2 邓荣;FF3在断奶腹泻仔猪肠道中的分布表达及对肠黏膜上皮细胞的作用[D];华中农业大学;2012年
3 郭志有;多不饱和脂肪酸配比调控荣昌仔猪免疫应激的研究[D];西南大学;2011年
4 张恒;中药“复方黄连散”防治仔猪大肠杆菌性腹泻机理的研究[D];中国农业科学院;2010年
5 杨明娟;儿童血液肿瘤与ZO-1基因关系的研究[D];河北医科大学;2010年
6 申发燕;ZO-1不同功能片段在胃癌中表达意义的研究[D];福建医科大学;2010年
7 许璇;肾康丸对糖尿病大鼠肾脏保护作用及对CD2AP、ZO-1表达的影响[D];南方医科大学;2011年
8 索成;植物乳杆菌ZJ316对断奶仔猪的益生作用[D];浙江工商大学;2012年
9 张利娟;不同碳水化合物及水平对断奶仔猪生产性能及理化指标的影响[D];东北农业大学;2010年
10 杜瑜;非霍奇金淋巴瘤中ZO-1基因启动子区甲基化状态的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026