收藏本站
《华中农业大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

秦巴山区虎杖中产白藜芦醇(苷)内生真菌的分离鉴定

彭浩  
【摘要】: 植物内生真菌(plant endophytic fungi)是指在其部分或全部生活史中存活于健康植物组织内部、不引发宿主植物表现出明显感染症状的一类真菌。自Strobel等于1993年首次从短叶紫杉(Taxus brevifolia)树皮中分离出一株内生真菌(Taxomyces andreanae)能产生紫杉醇(taxol)后,利用微生物发酵被认为是解决植化药物短缺的潜在途径。虎杖(Polygonurn cuspidatum)是秦巴山区一种广泛分布的中药材,其活性成分白藜芦醇(苷)具有抗癌、抑菌消炎、保肝利胆、抗氧化和降血脂等多方面的药理活性。本研究以虎杖为材料,分离得到了一些内生真菌,通过对菌株的分类鉴定和代谢产物的初步分析表明,部分内生真菌能发酵产生白藜芦醇苷(醇),具体研究结果如下。 1虎杖内生真菌的分离、纯化及初步分类鉴定 采用组织分离法,将新鲜虎杖根清洗干净,并对其表面进行消毒后,剪切成0.5mm×0.5mm的小块,接入PDA平板中,于28℃培养3~7 d,分离、纯化得到116株内生真菌。形态分类结果初步表明,它们分别属于从梗孢目、壳霉目、黑盘孢目、毛霉目和无孢目5目,及曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、无孢类(Agonomycetaceae)、镰孢霉属(Fusarium)、毛霉属(Mucor)、拟盘多毛孢属(Pestalotia)、枝孢霉属(Cladosporium)、链隔孢属(Alternaria)及木霉属(Trichoderma)9属。 2产白藜芦醇(苷)虎杖内生真菌的筛选 将上述116菌株(还是部分代表菌株),分别接种于改良马铃薯液体培养基中,28℃,160r/min,培养7d后,按1:2(v/v或w/v)的比例,以乙酸乙酯分别对菌丝和发酵液萃取15min,合并萃取液,40℃真空旋转蒸发至干后,以甲醇溶解、定容至25 mL,并以HPLC测定提取液中白藜芦醇(苷)的含量。获得两株可产白藜芦醇(苷)的内生真菌,分别为M-56和L-18。其中,M-56只产白藜芦醇苷,产量为1.029 mg/L;L-18既产白藜芦醇苷又产白藜芦醇,含量分别为4.672和4.812 mg/L。 3产白藜芦醇(苷)虎杖内生真菌的鉴定 根据菌落形态及显微形态的观察结果,将M-56和L-18菌株初步鉴定为链格孢属(Alternaria)和青霉属(Penicillium)真菌。在此基础上,对两菌株的ITS片段进行扩增,得到长度均为564 bp的DNA片段。经测序并在NCBI数据库中进行ITS序列同源性比对,结果显示,M-56和L-18菌株的ITS序列分别和NCBI中收录的链格孢属及青霉属其它种的ITS序列同源性均为99%。结合形态学特征将M-56和L-18菌株鉴定为半知菌亚门丝孢目链格孢属(Alternaria)真菌和丛梗孢目丛梗孢科青霉属(Penicillium)真菌。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S182;S567.239

知网文化
【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 徐瑞超;虎杖内生真菌与有效成分的相关性研究[D];成都中医药大学;2012年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 傅红;王金龙;;虎杖中白藜芦醇的含量TLCS法测定[J];中医药临床杂志;2006年05期
2 郭晓静;王俊鹏;宋晓平;周乐;豆传娜;;南方红豆杉产紫杉醇内生真菌的分离鉴定[J];西北植物学报;2007年09期
3 杨润涛;周四元;章翔;滕增辉;张邦乐;刘新友;杨茜;张丽娟;梅其炳;;液相色谱-串联质谱法同时测定血浆中白藜芦醇苷及其代谢产物[J];分析化学;2007年09期
4 刘兆平,霍军生;白藜芦醇的生物学作用[J];国外医学(卫生学分册);2002年03期
5 杨晶;朱圣陶;;葡萄酒中重要生物活性物质的研究进展[J];国外医学(卫生学分册);2008年04期
6 胡跃;白藜芦醇抗肿瘤作用研究新进展[J];国外医学(肿瘤学分册);2002年03期
7 毛永芬,窦夏睿;虎杖的性能特点及临床应用[J];河北中医;2003年08期
8 潘华君;帅晓艳;王传金;魏运洋;;白藜芦醇的全合成[J];合成化学;2008年02期
9 马云桐;万德光;严铸云;滕建北;;虎杖内生真菌与有效成分的相关性研究[J];华西药学杂志;2009年05期
10 舒友琴,陈敏;白藜芦醇和白藜芦醇苷研究进展[J];郑州牧业工程高等专科学校学报;2003年04期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 向海艳;虎杖中白藜芦醇的分离纯化研究[D];中南大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 黄瑞虎;新疆罗布泊地区胀果甘草内生菌的初步研究[D];新疆师范大学;2009年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 樊柏林;刘春霞;杨文祥;田辉;孙凡中;马弋;向继洲;;复方竹节参胶囊的毒理学试验[J];癌变.畸变.突变;2008年06期
2 胡燕平;王欣;宋捷;张旻;王秀文;李波;;五味子水煎剂的遗传毒性研究[J];癌变.畸变.突变;2009年04期
3 张旻;刘晓萌;宋捷;胡燕萍;王秀;李波;;五味子水浸提液对SD大鼠胚胎和胎仔的发育毒性研究[J];癌变·畸变·突变;2010年03期
4 王兰;张永东;梁涛;罗雁;郭红云;张晓文;;独一味胶囊对大鼠动脉管壁增殖细胞核抗原表达的影响[J];癌变·畸变·突变;2011年04期
5 陈殿绪;谢宏峰;卢俊玲;许曼琳;樊堂群;张建建;迟玉成;;花生根瘤内生细菌对花生黑斑病和褐斑病拮抗作用的初步研究[J];山东农业科学;2011年07期
6 王珍;董梁;李家春;萧伟;谢彩香;黄林芳;王振中;;茯苓产地适宜性分析研究[J];山东农业科学;2011年12期
7 于晓亮;王建华;;木瓜属植物果实中有效成分含量测定[J];山东农业科学;2012年02期
8 张相美;薛正莲;江荣珍;;一株林肯链霉菌变种生理特性的研究[J];安徽工程科技学院学报(自然科学版);2009年01期
9 程子洋;王成永;;酒制木瓜炮制工艺研究[J];中医药临床杂志;2008年02期
10 彭耀;;中药饮片包装存在的问题及建议[J];中医药临床杂志;2009年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨星星;曾建国;熊兴耀;;葡萄属植物中芪类化合物的研究进展[A];园艺学文集5[C];2010年
2 吴良庆;叶振风;衡伟;刘刚;史苏湘;朱立武;;梨炭疽病病原菌鉴定及其药剂毒力试验[A];梨科研与生产进展(五)[C];2011年
3 陈文华;黄国栋;赵凤达;;姜黄水醇提取液对冰乙酸损伤性溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜保护作用及机制研究[A];江西省中西医结合学会第九次活血化瘀学术研讨会活血化瘀临床应用新进展培训班论文集[C];2011年
4 莘仲明;许学锋;陈浩;;二级反渗透工艺制取医药纯化水[A];第二届中国膜科学与技术报告会论文集[C];2005年
5 白雁;王星;龚海燕;张威;;近红外漫反射光谱法定量分析连翘药材[A];第十五届全国光散射学术会议论文摘要集[C];2009年
6 王星;左春芳;雷敬卫;白雁;;近红外光谱法在连翘产区鉴别中的应用研究[A];第十六届全国光散射学术会议论文摘要集[C];2011年
7 马维思;徐江;乔海莉;陈君;李向明;;化橘红GAP基地土壤绿僵菌的分离鉴定[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
8 乔海莉;徐荣;陈君;王霞;马维思;刘同宁;;肉苁蓉花序挥发物的化学成分分析[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
9 罗茂玉;;67份中成药说明书调查与用药安全[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
10 王东晓;朱曼;王欣荣;郭代红;;基于药品说明书解析β-内酰胺类抗生素皮肤过敏试验[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李振东;东祁连山高寒草地优势植物内生细菌多样性研究[D];甘肃农业大学;2010年
2 帅学宏;山豆根多糖提取工艺及免疫学活性研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 李会涛;《水产饲料生产良好操作规范》(GMP)技术管理体系构建与生产示范研究[D];中国海洋大学;2010年
4 姜登钊;中药百部归经的研究及其在海洋中药研发中的应用[D];中国海洋大学;2010年
5 张延妮;珠子参化学成分及其活性成分的筛选研究[D];陕西师范大学;2010年
6 生书晶;何首乌芪合酶基因(FmSTS)的克隆、鉴定及转化拟南芥研究[D];华南理工大学;2010年
7 孟庆霞;透射光谱成像技术在中药鉴定及快速无损检测中的应用研究[D];暨南大学;2010年
8 郑君;基于文献的中药毒性认识变化规律研究[D];山东中医药大学;2010年
9 付英杰;阿胶低肽及其制剂的研究[D];山东中医药大学;2010年
10 杨波;植物类中药寒热药性与化学成分相关性的文献研究[D];山东中医药大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 兰楠;利用天南星科凝集素构建内生工程真菌及其抗虫防病效果研究[D];华中农业大学;2010年
2 廖春雨;固氮内生菌HMLR8和HMLR13对水稻的促生效应的研究[D];华中农业大学;2010年
3 张献芳;利用半夏凝集素构建内生工程菌及其抗同翅目害虫效果研究[D];华中农业大学;2010年
4 徐文平;四川绿茶苦涩味偏重成因分析及降低苦涩味技术研究[D];安徽农业大学;2010年
5 张燕;不对称Simmons-Smith反应合成S-(+)-2,2-甲基环丙烷甲酸甲酯[D];郑州大学;2010年
6 罗传军;含氮氧有机物为中性载体的PVC膜离子选择性电极的研究[D];郑州大学;2010年
7 马伟峰;2-甲氧基雌二醇口服制剂的研究[D];郑州大学;2010年
8 胡殿丽;木蝴蝶总黄酮提取工艺和脂肪酸成分研究[D];郑州大学;2010年
9 孔怡;泰山云芝TN-1生物学特性及驯化栽培研究[D];山东农业大学;2009年
10 叶晶晶;桑树中产1-脱氧野尻霉素微生物的研究[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 曾庆桂;颜日明;朱笃;温增春;;羊蹄内生真菌的分离鉴定及其多样性分析[J];安徽农业科学;2008年09期
2 杨培君,李会宁,赵桦;虎杖的组织培养与快速繁殖[J];西北植物学报;2003年12期
3 舒仕瑜;白藜芦醇苷生物活性及药理作用[J];儿科药学;2002年01期
4 王红霞;李雅丽;;一株产甘草酸内生真菌的分离及代谢产物分析[J];湖北农业科学;2011年14期
5 文涛;曾杨;喻晓;程仕明;李卓玺;杨文钰;;真菌诱导子对虎杖愈伤组织中白藜芦醇合成的影响[J];核农学报;2008年04期
6 杜敏华;杨建伟;杨柯金;;虎杖茎尖离体再生体系的建立和优化[J];核农学报;2008年05期
7 孔晓华;周玲芝;;中药虎杖的研究进展[J];中医药导报;2009年05期
8 张浩,陈炜,晁若冰,杨亮先,庄燕黎,李小华;黄连细胞二步法悬浮培养生产黄连生物碱类成分的探索[J];华西医科大学学报;1997年01期
9 林芸竹;龚涛;张志荣;;复方虎杖降脂胶囊中虎杖的鉴别和虎杖苷的含量测定[J];华西药学杂志;2005年06期
10 马云桐;万德光;严铸云;滕建北;;虎杖内生真菌与有效成分的相关性研究[J];华西药学杂志;2009年05期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 曹庸;虎杖颗粒愈伤组织悬浮培养体系建立与白藜芦醇的生物合成、调控及生物转化研究[D];湖南农业大学;2005年
2 于树宏;虎杖组织培养物中白藜芦醇和虎杖苷的代谢调控、生物转化及其提取液抗肿瘤活性筛选研究[D];河北医科大学;2006年
3 马云桐;虎杖的资源、品质与药效的相关性研究[D];成都中医药大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 刘晓琴;虎杖悬浮培养体系的建立及次生代谢调控的初步研究[D];中国科学院研究生院(大连化学物理研究所);2006年
2 唐永红;B-39菌株产白藜芦醇的条件及其与虎杖悬浮细胞共培养的研究[D];吉首大学;2007年
3 曾杨;黑曲霉诱导子和水杨酸对虎杖愈伤组织中白藜芦醇含量的影响[D];四川农业大学;2008年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 周斌;用超声波提取中药材[J];安徽科技;2005年04期
2 傅红;王金龙;;虎杖中白藜芦醇的含量TLCS法测定[J];中医药临床杂志;2006年05期
3 朱立贤,金征宇;虎杖中白藜芦醇提取分离工艺的研究[J];安徽农业科学;2005年01期
4 潘晓辉,罗文谦;安康产虎杖化学成分研究[J];安康师专学报;2003年01期
5 徐云(昌鸟);于力文;;霍山石斛种子的萌发和试管苗的培养[J];安徽农学院学报;1984年01期
6 杜彬,孟宪军;葡萄中功能性物质白黎芦醇的研究进展[J];北方果树;2004年S1期
7 王建国,周忠,刘海峰,王建新;甘草的活性成分及其在化妆品中的应用[J];日用化学工业;2004年04期
8 朱祥瑞;费建明;杨逸文;杨堃;;桑椹和桑枝中白藜芦醇的提取及含量测定[J];蚕业科学;2007年01期
9 项勇,崔京霞,吕安国;东北红豆杉内生真菌的分离和筛选[J];东北林业大学学报;2002年02期
10 孙剑秋;郭良栋;臧威;迟德富;;药用植物内生真菌及活性物质多样性研究进展[J];西北植物学报;2006年07期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 郭力;虎杖提取物(中药Ⅱ类新药)治疗心血管疾病缓释胶囊的研制[D];成都中医药大学;2002年
2 刘小杰;康氏木霉纤维素酶的发酵及其对稻草降解利用的初探[D];浙江大学;2003年
3 向海艳;虎杖中白藜芦醇的分离纯化研究[D];中南大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 俸灵林;虎杖的化学成分及其质量研究[D];沈阳药科大学;2003年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 胡桂馨,王代军,刘荣堂;干旱胁迫下内生真菌对高羊茅保护酶活性的影响[J];草原与草坪;2001年01期
2 R.E.Joost ,余丽清;苇状羊茅和黑麦草内生真菌的利与害[J];草原与草坪;1998年03期
3 纪丽莲;一株芦竹内生真菌对黄瓜灰霉病菌的抑制作用研究[J];江苏农业科学;2004年06期
4 ;《菌物研究》2008年总目次[J];菌物研究;2008年04期
5 项勇,崔京霞,吕安国;东北红豆杉内生真菌的分离和筛选[J];东北林业大学学报;2002年02期
6 顾爱国,兰琪,宗兆锋,吴文君;苦皮藤内生真菌2B菌株的鉴定[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2004年08期
7 聂立影,陈磊,任安芝,高玉葆;黑麦草(Lolium perenne L.)内生真菌的检测、分离及鉴定[J];微生物学通报;2005年01期
8 乔卿梅;程茂高;王长林;;药用植物内生菌在天然药物开发中的应用[J];郑州牧业工程高等专科学校学报;2008年01期
9 任安芝,高玉葆,王巍,王金龙;干旱胁迫下内生真菌感染对黑麦草光合色素和光合产物的影响[J];生态学报;2005年02期
10 李海燕;王磊;赵之伟;;小桐子内生真菌及其抗真菌活性研究(英文)[J];天然产物研究与开发;2006年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张云霞;贝垚姗;罗晶晶;向梅梅;;巴戟天内生真菌多样性初步研究[A];2010年中国菌物学会学术年会论文摘要集[C];2010年
2 康冀川;苏昊;何劲;靳瑞;雷帮星;文庭池;;药用植物内生真菌的研究[A];2010年中国菌物学会学术年会论文摘要集[C];2010年
3 何旻远;钟文鑫;;台湾中草药内生真菌的生物多样性与活性[A];海峡两岸第十届菌物学暨第三届食药用菌学术研讨会论文摘要集[C];2011年
4 张猛;;小麦和玉米内生真菌的分离与鉴定[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
5 李春杰;李飞;缑小媛;张兴旭;陈娜;;醉马草内生真菌共生体的研究[A];中国草学会青年工作委员会学术研讨会论文集[C];2007年
6 葛瀚麟;邹建华;陈晓光;戴均贵;;番荔枝内生真菌中抗肿瘤活性成分的研究[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
7 李春杰;高嘉卉;南志标;;内生真菌对禾草病原真菌的抑菌作用[A];中国植物病理学会2004年学术年会论文集[C];2004年
8 苗文莉;禹乐乐;李文杰;唐保宏;;几种麦田杂草内生真菌的多样性研究[A];2010年中国菌物学会学术年会论文摘要集[C];2010年
9 王梅霞;陈双林;;银杏内生真菌Colletotrichum sp.营养条件的初步研究[A];中国菌物学会第三届会员代表大会暨全国第六届菌物学学术讨论会论文集[C];2003年
10 葛瀚麟;邹建华;陈晓光;戴均贵;;番荔枝内生真菌中抗肿瘤活性成分的研究[A];2009年中国药学大会暨第九届中国药师周论文集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前8条
1 陈美兰 黄璐琦;道地药材形成的途径之一[N];中国中医药报;2007年
2 董志昕 蔡蕴琦;禾本科植物体内发现抗病虫“有益菌”[N];江苏农业科技报;2009年
3 杨红亚 王兴红 彭谦;微生物在中药研究中的应用日趋深入[N];中国医药报;2006年
4 本报记者  白毅;协力创新促药兴[N];中国医药报;2006年
5 本报记者 熊燕;微生物里的大千世界[N];云南日报;2004年
6 丁世民 赵庆柱 郭亭;草坪虫害的可持续控制(上)[N];中国花卉报;2004年
7 本报记者 杨霂霏 通讯员 段晓晖 熊瑞芳;“我的技术只献给祖国”[N];中国组织人事报;2011年
8 李坤;红豆杉濒危:抗癌药找到替代品[N];北京科技报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 袁志林;疣粒野生稻(Oryza granulata)内生真菌资源挖掘、系统发育分析和功能初探[D];浙江大学;2010年
2 张清华;油菜内生真菌的多样性及生防潜力评估[D];华中农业大学;2014年
3 何璐;苦参内生真菌抑菌物质纯化鉴定及作用机制研究[D];沈阳农业大学;2011年
4 张兴旭;醉马草—内生真菌共生体对胁迫的响应及其次生代谢产物活性的研究[D];兰州大学;2012年
5 张弘弛;两种药用植物内生真菌次生代谢产物及其生物活性的研究[D];陕西科技大学;2012年
6 徐庆妍;两株红树植物内生真菌代谢物及抗菌、抗肿瘤活性研究[D];厦门大学;2004年
7 杨胜祥;苦楝内生真菌和动物放线菌次生代谢产物及其生物活性的研究[D];西北农林科技大学;2011年
8 吴令上;南方红豆杉内生真菌多样性、次生代谢产物及其与宿主的相关性研究[D];第二军医大学;2012年
9 陈娜;内生真菌提高醉马草低温萌发能力的分子机制[D];兰州大学;2011年
10 李燕;提高盾叶薯蓣内生真菌Dzf12中螺二萘类化合物palmarumycins C_(12)和C_(13)产量的策略[D];四川农业大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李飞凤;禾本科植物内生真菌的生物多样性和人工接种的研究[D];南京农业大学;2004年
2 陈志敏;火棘内生真菌的分离及其抑菌活性研究[D];西北农林科技大学;2010年
3 闫慧娇;两株黄槿内生真菌次生代谢产物研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
4 黄湘海;黑核桃内生真菌HJ_1发酵产物化感作用的研究[D];西北农林科技大学;2010年
5 胡桂馨;干旱胁迫下内生真菌对高羊茅的生理特性影响的研究[D];甘肃农业大学;2000年
6 兰琪;苦皮藤内生真菌中杀虫杀菌活性物质的初步研究[D];西北农林科技大学;2002年
7 缪莉;红树植物内生真菌抗菌抗肿瘤活性物质的初步研究[D];厦门大学;2002年
8 张炜玲;两株苦楝内生真菌混合发酵菌丝体的化学成分及生物活性研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 易大为;银杏树内生真菌代谢产物中活性成分的研究[D];沈阳药科大学;2003年
10 霍娟;杜仲内生真菌资源和活性菌株生物学的初步研究[D];南京师范大学;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026