收藏本站
《华中农业大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

苏云金芽胞杆菌YBT1520杀虫晶体突变株的蛋白质组学分析

李红  
【摘要】: 苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)是目前世界上使用最广泛的生物杀虫剂之一,为革兰氏阳性细菌,目前已分离到83个亚种,71个血清型。其高效杀虫活性源于杀虫晶体蛋白,该蛋白在稳定期大量表达、积累并装配成晶体。晶体代谢调控机制是目前研究苏云金芽胞杆菌研究的热点之一,因为到目前芽胞形成机制的研究已有了突破性的进展,但是目前关于晶体代谢调控的机制仍然没有一个合理并清晰的解释。本文从高毒菌株YBT1520出发,采用不同的诱变方法得到其晶体的突变株,然后采用2-DE的方法,通过质谱鉴定出蛋白差异的点。希望得到与晶体代谢调控相关的功能基因。 1.利用宽氮离子束、紫外线+氯化锂复合诱变、微波+紫外线复合诱变、NTG+氯化锂复合诱变等诱变方法处理苏云金芽胞杆菌YBT1520,筛选得到了三种类型的突变株:晶体变大、晶体变小、无晶体的突变株。 2.进行了稳定性传代实验,晶体变小和无晶体的突变株20代传代稳定;抽取YBT1520及突变株的质粒,发现晶体变小的突变株与野生株相比少了pBMB12这个质粒,而无晶体突变株的质粒图谱与野生株有较大的差异;测定了它们的生长曲线,晶体变小的突变株的生长趋势基本和野生株一致,但是无晶体突变株在进入稳定期后生长波动范围较大;测定了野生株和突变株的杀虫活性,结果显示晶体变小的突变株的杀虫活性与野生株相似,而无晶体突变株基本没有杀虫活性。根据突变株的信息以及实验目的,确定以晶体变小的突变株为双向电泳的材料。 3.YBT1520晶体的大量表达始于对数期末期,并在稳定期积累装配形成晶体,据此选取14h、18h、22h三个时间点进行2-DE实验,PDQuest软件分析胶图,用质谱鉴定出了可信的表达差异较大的点13个,其中表达量上调的点有8个,下调的点有5个。结果包括:与代谢相关的酶类、伴侣蛋白、转录调节蛋白、翻译调节蛋白和未知功能的蛋白等5类。
【学位授予单位】:

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 胡森;郑孝辉;王加兰;张倩;刘文兴;王喜军;乔祖建;刘林涛;高红霞;王君伟;步志高;;马耳它布氏杆菌bp26基因缺失株的构建及鉴定[J];中国预防兽医学报;2009年08期
2 魏娜;钱国良;李晓霞;张志峰;刘凤权;胡白石;;瓜类细菌性果斑病菌tvrR基因的克隆及其对致病性的影响[J];南京农业大学学报;2010年06期
3 李晓清;于宏伟;郭润芳;贾英民;;溶菌酶产生菌诱变选育的研究[J];河北农业大学学报;2011年04期
4 汪夕彬,鱼宏斌;对小麦阿勃、矮丰3号辐射诱变效应(M_1~M_4)的初步研究[J];核技术;1979年03期
5 ;食品上的应用[J];生物技术通报;1989年05期
6 马双武,张莉;携带西瓜白化致死基因突变株的发现[J];中国西瓜甜瓜;1999年04期
7 姜向涛;林德佩;;西瓜全雌基因gy的发现(英文)[J];园艺学报;2007年01期
8 刘秀敏;吴菁;张维;陆伟;平淑珍;林敏;陈明;;极端耐辐射奇异球菌Deinococcus sp.BR501切除修复系统突变株的构建及功能的鉴定[J];核农学报;2007年04期
9 李宗平;李进平;王昌军;史宏志;杨军;;白花白肋烟与烟碱转化的关系研究[J];中国烟草学报;2007年06期
10 陈庆园;陆宁;商胜华;李继新;王晓莉;;烤烟品种K326突变株抗烟草普通花叶病(TMV)的研究初报[J];中国烟草学报;2010年01期
11 葛含静;杜双奎;林德慧;向进乐;李志西;;葡糖醋杆菌高静水压诱变株AFLP体系的建立[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2011年02期
12 张筱玉,俞学琴,朱卫民;红霉素链霉菌突变株的生化互补和红霉素生物合成途径的研究[J];遗传学报;1985年01期
13 ;食品上的应用[J];生物技术通报;1985年04期
14 徐福洲;史爱华;陈小玲;杨兵;王金洛;;胸膜肺炎放线杆菌apxIC基因插入失活突变株构建及免疫原性分析[J];微生物学报;2007年05期
15 董洪燕;张小荣;潘志明;彭大新;刘秀梵;;转座子随机插入鉴定肠炎沙门氏菌生物膜形成相关基因[J];微生物学报;2008年07期
16 赵川;林庆胜;杨柳;胡美英;;毒死蜱降解菌枝孢霉菌的紫外诱变和筛选[J];华南农业大学学报;2010年04期
17 陈红娜;王长军;潘秀珍;唐家琪;;猪链球菌2型srtF基因敲除突变株的构建及其毒力[J];微生物学通报;2010年12期
18 贝为成,何启盖,方六荣,肖少波,刘丽娜,洪文洲,刘正飞,陈焕春;猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素apxII基因无药物抗性标记突变株HBC~-/ GFP~+的构建及其生物学特性研究[J];生物工程学报;2004年05期
19 贝为成,何启盖,陈焕春,徐晓娟,洪文洲,肖少波,宋云峰,刘建杰;猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxⅡ~-/Amp~r突变株的构建[J];畜牧兽医学报;2004年02期
20 张国锋;莫永胜;;耐除草剂突变株[J];中国农学通报;1989年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王艳尊;高媛媛;施巧琴;吴松刚;黄建忠;;酿酒酵母YS2-△adh2-△ald6突变株的构建及hxt1基因的过表达[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会论文摘要汇编[C];2009年
2 田从魁;崔承彬;李长伟;;金灰青霉H4的链霉素抗性突变株新产抗肿瘤产物研究[A];中国化学会第八届天然有机化学学术研讨会论文集[C];2010年
3 田从魁;崔承彬;李长伟;;产紫青霉G59的链霉素抗性突变株新产抗真菌产物研究[A];中国化学会第八届天然有机化学学术研讨会论文集[C];2010年
4 古力孜拉;史博;热依汗古丽;吾甫尔·米吉提;;莱茵衣藻(Chlammydomonas reinhardtii)野生型和不同突变株对NaCl抗性检测分析[A];中国第六届海峡两岸菌物学学术研讨会论文集[C];2004年
5 王长军;董瑞萍;潘秀珍;王晶;唐家琪;;突变株的构建及其生物学特性研究[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
6 何秀萍;刘增然;刘春秀;张博润;;酵母菌细胞自溶突变株的研究[A];首届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2002年
7 贝为成;何启盖;方六荣;金梅林;周锐;陈焕春;;猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素apxII基因无药物抗性标记突变株HBC~-/GFP~+的构建及其生物学特性研究[A];湖北省生物工程学会2004年年会学术报告及论文摘要汇编[C];2004年
8 刘建军;赵祥颖;李丕武;田延军;张家祥;刘丽萍;韩延磊;;产L-亮氨酸黄色短杆菌蛋氨酸和异亮氨酸双重缺陷型突变株SFL8-3的选育[A];山东微生物学会第六次会员代表大会暨2004年学术年会论文集(上)[C];2004年
9 张辉;肖少波;方六荣;赵骞;薛念波;陈焕春;;伪狂犬病毒UL14基因缺失影响病毒的增殖和细胞间扩散[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)[C];2006年
10 张金辉;窦颖;佘薇薇;赵耀;刘平;赵晓东;;人类偏肺病毒F蛋白糖基化位点对其体内外复制能力的影响[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编(上册)[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 知陶;罂粟突变株新发现:强力镇痛不成瘾[N];医药经济报;2004年
2 丹正;功能性大米基尔米实现产业化生产[N];粮油市场报;2005年
3 岳梅;海正药业诱变育种使阿卡波糖产量增加[N];中国医药报;2005年
4 记者 张月亭;TG生产菌空间育种效果显著[N];中国食品质量报;2003年
5 新欣;乙肝表面蛋白有望“预告”肝癌发生率[N];医药经济报;2004年
6 ;核苷类三剑客比试乙肝用药市场[N];医药经济报;2005年
7 刘士敬;怎样治疗“小三阳”[N];健康报;2005年
8 庄愉 编译;卡介苗 日见失效 防结核 谁能担纲[N];医药经济报;2002年
9 胡建和 陈永耀 王自良 谢庆阁;新型猪瘟疫苗的研究和应用前景[N];中国畜牧报;2005年
10 中国农业大学农业部饲料工业中心 陆文清 北京中农博特生物工程有限公司 钟佳新;微生物生产菌种的退化、纯化和复壮[N];中国畜牧报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 夏静;猪链球菌2型fbps基因突变株的构建及其生物学特性的研究[D];华中农业大学;2011年
2 杨雪欣;木质纤维的降解及L-乳酸发酵技术的研究[D];东北林业大学;2012年
3 郭东春;多杀性巴氏杆菌兔体内差异表达基因及其突变株构建的研究[D];中国农业科学院;2012年
4 魏巍;苜蓿中华根瘤菌耐盐分子机制的研究[D];中国农业大学;2005年
5 李红权;固氮斯氏假单胞菌四碳二羧酸转运基因的功能鉴定及表达调控研究[D];中国农业科学院;2005年
6 马一君;幽门螺杆菌iceA基因相关的致病机制[D];郑州大学;2010年
7 向淑利;neuB1基因失活空肠弯曲菌突变株的构建及其临床意义[D];重庆医科大学;2004年
8 曾爱中;乙肝病毒基因型与应答反应关系及逆转录酶和全基因组变异位点分析[D];重庆医科大学;2008年
9 李林;苏云金芽胞杆菌高频转化系统的建立及其性能[D];华中农业大学;1999年
10 郭巍;山羊痘病毒基因缺失转移载体及基因缺失突变毒株的构建[D];东北农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李红;苏云金芽胞杆菌YBT1520杀虫晶体突变株的蛋白质组学分析[D];华中农业大学;2010年
2 程本亮;青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)致病力分化的研究[D];福建农林大学;2010年
3 胡琳琳;胸膜肺炎放线杆菌双组份调控系统QseB/QseC突变株构建功能研究[D];华中农业大学;2011年
4 陈葙南;多抗逆性婴儿双歧杆菌优良菌株的选育及其微胶囊化研究[D];东北林业大学;2010年
5 克热木江·阿布都热合曼;一株产谷胱甘肽啤酒酵母菌株的选育研究[D];兰州大学;2012年
6 张春;L-苏氨酸生产菌的选育及其发酵条件的优化[D];吉林农业大学;2011年
7 孙丹丹;CIAV M突变株致病性试验及其在DF-1上生长适应性的研究[D];河北农业大学;2011年
8 徐霞美;小克银汉γ-亚麻酸高产突变株的快速筛选及发酵条件优化[D];西北大学;2006年
9 阮同琦;产木聚糖酶菌株的选育及酶学性质的研究[D];山东轻工业学院;2008年
10 张丽勍;VI型分泌系统在植物青枯菌致病和蛋白分泌中的作用研究[D];中国农业科学院;2010年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978