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《华中农业大学》 2010年
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澳大利亚扇子花Scaevola nitida R.Br的组织培养研究

梁梅荣  
【摘要】: 澳大利亚扇子花Scaevola nitida R.Br是草海桐科草海桐属的优良花木,国内外尚未见关于其组织培养方面的报道。本文以叶片、叶柄、茎段、茎节为外植体,通过直接再生和间接再生两种途径,系统的研究了其离体培养中所涉及的多种重要的影响因素,建立了S. nitida组培再生技术体系。主要结果如下: (1)叶片外植体表面消毒,先用75%的酒精消毒30 s,然后分别用不同浓度的NaClO和HgCl2消毒不同时间,结果表明以0.1%HgCl2消毒10 min效果最佳。 (2)不同浓度的6-BA和NAA对出芽率、平均出芽数、平均芽高的影响均达到极显著水平,两者的交互作用没有显著影响,MS+1.5mg/L 6-BA为诱导叶片直接再生不定芽的较合适培养基。 (3)研究了pH、6-BA浓度、2,4-D浓度和外植体类型对愈伤组织诱导的影响。结果表明,当pH值为6.4,培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.5 mg/L 2,4-D,外植体为叶柄时,诱导愈伤组织的效果最好,诱导率可达92.22%,且愈伤组织为黄绿色,疏松颗粒状。 (4)不同6-BA和NAA浓度组合对愈伤分化影响的研究表明,MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA为诱导愈伤分化的最佳培养基,愈伤分化率可达64.45%,平均诱导数可达到1.26个。 (5)6-BA浓度、NAA浓度以及两者交互作用都对腋芽增殖存在显著影响,MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA为腋芽增殖的最佳培养基,有效不定芽产生较多,平均芽长达到1.41 cm。 (6)蔗糖含量和有机物质含量对壮苗培养均存在极显著影响,最佳壮苗培养基为MS+3%蔗糖+15 ml/L的100×有机养分母液。 (7)NAA对生根影响的实验结果表明,当培养基为1/2 MS+3%蔗糖+0.1 mg/L6-BA+0.3 mg/L NAA,并以珍珠岩代替琼脂时,生根率可达92.22%,平均生根数6.02条,平均根长3.88 cm,且根较粗壮。 (8)蔗糖含量、大量元素含量、NAA浓度、IBA浓度对组培苗生根影响的正交试验结果表明,蔗糖含量、大量元素含量、NAA浓度对平均生根数和平均根长存在显著影响,当培养基为1/4 MS+3.5%蔗糖+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L IBA和1/4MS+3%蔗糖+0.2 mg/L NAA+1.5 mg/L IBA时,生根率分别可达到92.22%和91.11%,平均生根数分别为3.01条和2.83条,平均根长分别为2.62 cm和2.10 cm,并且毛细根都较多。 对于工厂化育苗来说,以叶片为外植体,通过直接再生途径,到最后获得健壮的移栽苗一共需要130 d,是获得大量无菌苗和栽培苗的最佳途径。
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