收藏本站
《华中农业大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

水稻Tos17突变体库的创建和应用

马振  
【摘要】: 利用突变体来克隆基因是功能基因组研究的重要策略,目前很多研究机构都在用各种方法创建突变体库,并且从突变体中分离到了很多重要的基因。本研究利用水稻中的一个反转录转座子Tos17创建水稻突变体库。Tos17是一个“复制-粘贴”型的转座子,在组培的情况下被激活产生新的拷贝插入到基因组中,而分化成植株后Tos17的转座活性消失,新的拷贝能稳定遗传。为了证明利用Tos17创建突变体来分离克隆基因的方法的有效性,本研究对T1代家系进行了正向遗传学的筛选,目的是寻找与Tos17插入位点共分离的家系,为基因分离和克隆奠定基础。此外通过接头PCR的方法分离Tos17侧翼序列,不仅能更加深入的了解Tos17在水稻基因组中的分布,而且根据侧翼序列提供的基因信息,可以广泛的开展反向遗传学的研究。主要研究结果如下: 1.共计产生独立的Tos17突变体15,543株。通过对Tos17拷贝数的Southern检测,发现中花11中Tos17原始拷贝数为4,经过三个月的组培时间,平均每株含有新Tos17插入拷贝1.4个,整个突变体库中约含有插入位点21760个。 2.利用接头PCR的方法和TAIL-PCR的方法分离到能精确定位到水稻染色体上的Tos17侧翼序列601条,其中非重复的侧翼序列为524条。 3.从侧翼序列的分析的结果来看,Tos17偏向于插入较大的染色体,插入数目和染色体的长度存在显著的正相关(r=0.717,P0.01)。而在基因组区间内,我们发现Tos17显著偏爱于插入基因区(SR=10.85),而显著不偏爱于插入基因间隔区(-8.88)和转座因子相关区(-3.68)。在基因区域内,Tos17偏爱插入基因区(SR=4.55)而不偏向插入ATG上游1kb区(SR=-4.62)和翻译终止密码子下游500bp(SR=-3.25)这两个区。在基因编码区内,Tos17显著偏爱插入基因的外显子区域(SR=2.48)。 4.2008年夏季对Tos17插入突变体T1代1,881个家系进行了筛选,结果显示整个田间有突变表型的频率为5.69%,主要突变表型有矮化、不育、白化、黄化、晚抽穗等。对10个家系中的12个插入位点进行了PCR验证,发现有10个Tos17插入位点是可以确认是正确的。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S511

手机知网App
【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 彭强;与水稻CDF1蛋白互作的蛋白筛选和分析[D];华中农业大学;2012年
【参考文献】
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 林拥军;农杆菌介导的水稻转基因研究[D];华中农业大学;2001年
2 张健;水稻T-DNA插入突变体侧翼序列的分离与分析及控制杂合单株低育性基因Osfbox的功能研究[D];华中农业大学;2008年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 方小平,许泽永,张宗义,晏立英,陈坤荣,罗莉霞,陈金香,R.G.Birch,R.G.Dietzgen;GUS基因和NPTII基因在转基因花生后代的遗传研究[J];花生科技;1999年S1期
2 李逸平;李万几;刘芳;;(栽培大麦×纤毛鹅观草)×栽培大麦回交B_1的同工酶研究[J];四川农业大学学报;1992年04期
3 金维正,段瑞君,张帆,陈双燕,吴运荣,吴平;利用Ac/Ds转座子系统在水稻中获得无选择标记转基因植株的方法[J];生物工程学报;2003年06期
4 杨琳,王金发;植物基因工程中的转座子标签[J];生物技术;2000年01期
5 陈双臣;张孝峰;刘星;曹福中;云兴福;邹志荣;;植物转座子及其在番茄功能基因组的应用[J];生物技术;2005年06期
6 苏红;印莉萍;;插入突变在水稻功能基因组学中的研究进展[J];生物技术通报;2009年05期
7 徐明;路铁刚;;植物诱变技术的研究进展[J];生物技术进展;2011年02期
8 王瑞云;黄春国;田蒙;安鑫鑫;贾婵;李亚鹏;华栋;;水稻生殖器官发育阶段的研究进展[J];山西农业大学学报(自然科学版);2011年05期
9 刘峰;刘贯山;张芊;王卫锋;丁昌敏;吕婧;路铁刚;王元英;;烟草激活标签突变体库的创制和突变表型的初步鉴定[J];生物技术通报;2012年10期
10 李成忠;陶俊;孙燕;孔芬;耿庆萍;杜蓓;;喷钙对芍药花茎品质及叶片光合特性的影响[J];生态学杂志;2012年11期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 张乐萍;王学奎;杨业华;贾秀伟;黄秋波;;转座活化标签诱发的棉花突变体的筛选[A];中国棉花学会2007年年会论文汇编[C];2007年
2 John Mundy;;Gene Discovery and Functional Analyses in the Model Plant Arabidopsis[A];第四届拟南芥学术研讨会论文集[C];2005年
3 杨永智;;增强子捕获技术及其在马铃薯功能基因组学研究中的应用[A];马铃薯产业与农村区域发展[C];2013年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孙国清;不同抗虫棉品种杀虫蛋白表达研究及影响抗虫性分析[D];新疆农业大学;2010年
2 万凌琳;水稻β-1,3葡聚糖苷酶基因Osg1的功能研究[D];武汉大学;2010年
3 王创;水稻磷吸收调控若干关键基因的功能研究[D];浙江大学;2010年
4 李际红;叶籽银杏EFRO发育过程中DNA甲基化修饰机理及系统学意义[D];山东农业大学;2011年
5 郝金凤;无载体无选择标记转基因耐贮藏甜瓜的培育[D];内蒙古大学;2010年
6 赵鑫;优质蓝莓转LEA基因及耐寒性分析研究[D];东北林业大学;2011年
7 饶玉春;水稻早衰控制基因的克隆及其功能研究&水稻出糙率的QTL定位研究[D];中国农业科学院;2011年
8 胡昌泉;水稻胚乳发育相关基因的筛选及功能分析[D];福建农林大学;2011年
9 李莉;水稻花药发育控制基因OsADF的功能分析[D];中南大学;2011年
10 张玉;农杆菌介导菊苣遗传转化体系的建立及富硫氨基酸基因的导入和表达定位[D];四川农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨勇;青藏高原一年生野生大麦的农艺性状及品质性状分析[D];华中农业大学;2010年
2 庄志扬;农杆菌介导玉米幼胚遗传转化研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 李清贤;一个水稻花药特异表达基因的克隆及初步分析[D];福建师范大学;2010年
4 程志远;二穗短柄草的遗传转化及诱导型Ac/Ds转座系统在短柄草中的初步应用[D];山东农业大学;2011年
5 丁月芹;五种鼠基因组中4.5S RNA基因拷贝数的鉴定与分析[D];曲阜师范大学;2011年
6 朱春香;逆转座子激活对白念珠菌适应性形成的调控作用及其机制研究[D];第二军医大学;2011年
7 刘慧娟;水稻淡黄叶基因(pg13)的克隆与功能分析[D];杭州师范大学;2011年
8 盛德鹏;蛋白激发子基因peaT1和拒食蛋白基因xnAFP2转化水稻的研究[D];中国农业科学院;2011年
9 刘法谋;根际氧水平对不同类型水稻形态与生理特性的影响[D];中国农业科学院;2011年
10 王军伟;烟草突变体库创建及筛选体系建立[D];中国农业科学院;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 张军杰;崔红军;黄玉碧;;玉米叶片酵母双杂交cDNA文库的构建及评价[J];西北农业学报;2008年05期
2 曹英萍;石金磊;李钟;明凤;;水稻OsFAD2、OsFAD6的克隆及其家族成员对非生物胁迫的响应[J];遗传;2010年08期
3 肖冬来;邓慧颖;谢荔岩;吴祖建;谢联辉;;灰飞虱酵母双杂交cDNA文库的构建及分析[J];植物保护;2011年01期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 袁斌;OsMPK6双向调控水稻抗病反应[D];华中农业大学;2007年
2 张健;水稻T-DNA插入突变体侧翼序列的分离与分析及控制杂合单株低育性基因Osfbox的功能研究[D];华中农业大学;2008年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李述田,田颖川,何朝族;T-DNA标签在转基因水稻基因组中的整合特点[J];生物化学与生物物理进展;2004年10期
2 赵艳,于彦春,黄大年;植物中转基因的整合机制[J];中国生物工程杂志;2003年02期
3 刘永胜,孙敬三,周开达;水稻亚种间杂种小穗败育的细胞学基础[J];实验生物学报;1997年03期
4 朱晓红,曹显祖,朱庆森;水稻籼粳亚种间杂种配子体败育及其与小穗不孕关系的研究(英文)[J];作物学报;1998年04期
5 张桂权,卢永根;栽培稻杂种不育性的遗传研究 Ⅱ.F_1花粉不育性的基因模式[J];遗传学报;1993年03期
6 张桂权,卢永根,刘桂富,杨进昌,张华;栽培稻杂种不育性的遗传研究——Ⅲ.不同类型品种F_1花粉不育性的等位基因分化[J];遗传学报;1993年06期
7 庄楚雄,张桂权,梅曼彤,卢永根;栽培稻F_1花粉不育基因座S-α的分子定位[J];遗传学报;1999年03期
8 庄楚雄,梅曼彤,张桂权,卢永根;用RAPD标记对栽培稻F_1花粉不育基因座S-b定位[J];遗传学报;2002年08期
9 张桂权;卢永根;;栽培稻(Dryza sativa)杂种不育性的遗传研究 Ⅰ.等基因F_1不育系杂种不育性的双列分析[J];中国水稻科学;1989年03期
10 卢诚;潘熙淦;;水稻品种02428和8504的广亲和性遗传[J];中国水稻科学;1992年03期
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026