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《华中农业大学》 2010年
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刺糖多孢菌对剪切力抗性的初步研究

谢宙  
【摘要】: 通过对刺糖多孢菌(Saccharopolyspora Spinosa)G9菌株进行单孢分离、复壮,获得一株较高产的菌株G9-21,以G9-21为出发菌株进行紫外诱变,获得比G9-21效价(154μg/mL)提高了15.7%的菌株UV67;再对UV67进行链霉素抗性育种筛选,获得具有链霉素抗性菌株S26,其效价(189gg/mL)比UV67效价(155μg/mL)提高了21.9%;以G9-21(Spc+ Str-)和S26(Spc-Str+)两个菌株为两亲本,进行基因组重排育种,经过6轮融合,初筛和复筛,得到比S26效价(189gg/mL)提高了94.7%的菌株R61(368gg/mL);最后以菌株R61为出发菌株,进行杆菌肽抗性育种筛选,得到一株具有杆菌肽抗性、发酵效价提高了7.3%的菌株B13(395 gg/mL)。通过以上多种育种方法,出发菌株发酵效价提高了156.5%。 以G9-21 (Spc+ Str-)和S26 (Spc-Str+)两个菌株为两亲本,进行基因组重排育种,经过8轮连续融合,计算融合率,发现融合到第6轮后,融合率不再发生变化,即刺糖多孢菌有效融合轮数为6轮。 以刺糖多孢菌G9-21 (Spc+ Str-)和阿维链霉菌Z1-106 (Spc- Str+)为两亲本,进行了属间融合的尝试,以期能改善刺糖多孢菌对剪切力敏感的问题。 将直径约为3mm、、大小均匀、千粒重为267g的玻璃珠添加在摇瓶中,以此模拟工业发酵的剪切力,从加入玻璃珠数量、不同时间加入玻璃珠和不同时间取出玻璃珠三个方面对剪切力与刺糖多孢菌产素能力的关系进行了初步探索,在菌体对数生长期时加入剪切力对菌体损伤最大,并导致菌体产素能力降低。
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