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《华中农业大学》 2010年
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盾壳霉产生抗真菌物质的调控及其分子机理研究

韩永超  
【摘要】:盾壳霉(Coniothyrium minitans)是核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的重寄生真菌,在世界范围内广泛分布,在菌核病的生物防治中有着非常重要的作用。本论文主要针对碳源,氮源和环境pH对盾壳霉产生抗真菌物质(AFS)的调控及其分子机理进行了研究。 研究发现盾壳霉菌株Chy-1在改良的查比培养基(MCD)中培养时能稳定产生AFS;而在马铃薯葡萄糖液体培养基(PDB)中培养时却不能产生AFS。为了进一步研究盾壳霉在MCD和PDB培养液中生长时产生AFS的差异,研究了营养和环境pH值对盾壳霉产生AFS的影响。结果显示:盾壳霉培养物滤液对核盘菌菌丝生长的抑制率与环境pH值相关,较适宜盾壳霉产生AFS的碳源或氮源,其培养液的环境pH值都较低。当盾壳霉在环境pH值缓冲为3的培养液中生长时,培养滤液对核盘菌菌丝生长的抑制率远远高于当环境pH值缓冲为6的培养液。 为了研究环境pH值调控盾壳霉产生抗真菌物质的分子机理,本文用简并引物和RACE技术从盾壳霉菌株Chy-1中克隆到了pH感应转录调控因子基因(cmpacC)和碳代谢抑制因子基因(cmcreA)。cmpacC的全长序列(GenBank Ace. No. FJ176399)含有一个开放阅读框和两个内含子。根据cmpacC的碱基序列推测cmpacC编码一个长度为596个氨基酸残基的蛋白质(GenBank Ace. No. ACN43303),其含有三个保守的锌指结构域。同时本文也用基因组步移的方法克隆到了长度为2740bp的cmpacC 5'端侧翼序列及长度为2730bp的cmpacC 3'端侧翼序列。其中,5’端侧翼序列含有5个PacC结合位点(5'-GCCAAG-3')和三个CreA结合位点(5'-SYGGRG-3')。确定了cmpacC转录时的加A位点。荧光定量RT-PCR的分析结果显示:当盾壳霉在不同环境pH条件下生长时,cmpacC、几丁质酶基因(cmchl)(?)口p-1,3-葡聚糖酶基因(cmgl)的表达量都随着环境pH值的上升而升高。当盾壳霉在以单糖为碳源的培养基中生长时,cmcreA基因的表达量低,而当碳源为微生物不易利用的多糖时,cmcreA的相对表达量高。利用农杆菌介导同源重组的方法对盾壳霉中cmpalF基因进行了敲除。结果显示:当cmpalF基因缺失后,cmpacC的表达量降低,在环境pH高于6的环境中生长速度显著低于野生型菌株。在缓冲环境pH值为6时,培养滤液对核盘菌菌丝生长的抑制率显著高于野生型菌株。 用数字化表达谱技术分析了盾壳霉菌株Chy-1在环境pH值为3和6条件下RNA转录水平的表达差异基因。共得到了1286个差异表达的基因,以盾壳霉RNA样品Cm3的基因表达量为参照时,RNA样品Cm6中有596个基因上调表达,690个基因下调表达。 上述结果为解释盾壳霉与核盘菌之间的互作以及进一步揭示盾壳霉产生AFS的分子机制奠定了基础。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S476

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1 郑在武;菌核病在武穴油菜苗期发生严重[J];湖北植保;2005年01期
2 李国庆;王道本;;拮抗细菌的筛选及其对油菜菌核病的防治效果[J];华中农业大学学报;1991年01期
3 李国庆,王道本,张顺和,但汉鸿;菌核寄生菌盾壳霉的研究 Ⅰ.生物学特性及在湖北省的自然分布[J];华中农业大学学报;1995年02期
4 石志琦,周明国,叶钟音,史建荣,陈怀谷,王裕中;油菜菌核病菌对多菌灵的抗药性监测[J];江苏农业学报;2000年04期
5 周而勋,王克荣,陆家云;栗疫病菌不同毒力菌株胞外酶活性和草酸产量的比较[J];真菌学报;1996年03期
6 李子钦,曹丽霞,白全江,张庆平,徐利敏;内蒙古向日葵主要病害及其防治对策[J];内蒙古农业科技;2004年S1期
7 李金秀,陈文瑞,秦芸;油菜土壤中与核盘菌菌核存活有关的真菌[J];四川农业大学学报;1997年01期
8 黄剑华,陆瑞菊,张玉华,孙月芳,周润梅;应用离体培养技术鉴定不结球白菜耐热性及诱导耐热变异体[J];上海农业学报;1995年04期
9 高俊明,王双双,刘慧平,韩巨才;菌核重寄生菌盾壳霉生物学特性研究[J];山西农业大学学报(自然科学版);2002年01期
10 师俊玲,李寅,钱华丽,堵国成,陈坚;盾壳霉CCTCC M203020的生长特性及其应用潜力[J];应用与环境生物学报;2004年06期
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1 缪华军;盾壳霉抗杀菌剂农利灵突变菌株的获得、特性及其应用研究[D];华中农业大学;2004年
2 杨蕊;生防菌盾壳霉产生抗真菌物质及其特性和防病潜力研究[D];华中农业大学;2006年
【共引文献】
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1 疏义国;;扑海因与多菌灵混用对油菜菌核病菌的室内毒力和增效作用[J];安徽农业科学;2006年17期
2 刘开义;陈方新;;扑海因·多菌灵复配对油菜菌核病菌的毒力测定[J];安徽农业科学;2007年03期
3 任璐;刘慧平;韩巨才;邢鲲;;植物内生细菌yc8对油菜菌核病菌抑菌作用的初步研究[J];安徽农业科学;2007年11期
4 韩立荣;孙平平;张宁;冯俊涛;张兴;;油菜菌核病生防放线菌的分离与筛选[J];安徽农业科学;2011年05期
5 吴彦玲;朱少宇;吴娟;;大豆菌核病的发生与防治[J];现代农业科技;2009年24期
6 杨勇;;大豆菌核病的发生及防治[J];现代农业科技;2010年07期
7 莫渟;郭亚军;韩小明;蒋卫民;于家明;刘岳宝;于文忠;;不同药剂防治油菜菌核病药效试验[J];现代农业科技;2010年12期
8 江道会;王秀书;孙红磊;杨来红;马玉华;吴卫刚;;不同药剂防治怀地黄斑枯病药效试验[J];现代农业科技;2011年06期
9 齐永霞;陈方新;高智谋;;油菜菌核病菌对扑海因和菌核净敏感基线的建立及交互抗药性分析[J];安徽农业大学学报;2010年01期
10 胡俊,刘正坪,杨海清,周洪友,修建华;向日葵菌核病生防细菌的初步筛选[J];北京农学院学报;2005年02期
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1 张勇;孙明娜;王梅;段劲生;高同春;;油菜菌核病菌对多菌灵抗性菌系生物学特性、交互抗性、遗传稳定性研究[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 王中康;殷幼平;彭国雄;夏玉先;;杀虫真菌功能基因克隆和菌株改良研究进展[A];《中国虫生真菌研究与应用》(第五卷)[C];2003年
3 李国庆;姜道宏;;重寄生菌盾壳霉及其防治核盘菌菌核病的研究进展[A];湖北省植物病理学会2002年学术年会论文集[C];2002年
4 韦善君;李国庆;姜道宏;王道本;;核盘菌菌核刺激其重寄生菌盾壳霉分生孢子萌发的研究[A];生命科学与微生物专辑[C];2004年
5 任莉;胡燕梅;李国庆;;核盘菌重寄生菌盾壳霉降解草酸毒素的研究[A];第三届湖北湖南植保农药学术研讨会论文集[C];2004年
6 李红霞;周明国;陆悦健;;用PCR方法检测油菜菌核病菌对多菌灵的抗药性[A];第十九届全国植保信息交流暨农药械交易会论文集[C];2003年
7 胡美姣;李敏;高兆银;杨凤珍;;香蕉炭疽病菌不同菌株的比较[A];热带作物产业带建设规划研讨会——热带果树产业发展论文集[C];2006年
8 王浩然;田云龙;蒋细良;郭萍;朱昌雄;;木霉菌分子生物学研究进展[A];农业生物灾害预防与控制研究[C];2005年
9 孙祥良;王华弟;;油菜菌核病的发生传播途径与防治技术探讨[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
10 王华弟;孙祥良;朱黎明;;油菜菌核病发生与流行预测的研究[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
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3 于欣君;扣囊复膜酵母菌酸性蛋白酶基因在解脂耶罗维亚酵母菌中表达和重组酸性蛋白酶的应用[D];中国海洋大学;2011年
4 皇甫海燕;甘蓝型油菜PGIP2的原核表达、蛋白功能及其遗传转化的研究[D];湖南农业大学;2011年
5 郑凯;斜卧青霉基因表达谱的差异分析研究[D];山东大学;2009年
6 刘梅;利用生防木霉基因提高水稻抗病性研究[D];浙江大学;2003年
7 王滨;白僵菌持续控制马尾松毛虫的生物多样性和生态学基础[D];浙江大学;2003年
8 方卫国;昆虫病原真菌降解寄主体壁酶基因的克隆及球孢白僵菌高毒力重组菌株的获得[D];西南农业大学;2003年
9 李红霞;四种植物病原真菌对多菌灵的抗药性分子遗传机制及其检测技术的研究[D];南京农业大学;2003年
10 姜道宏;核盘菌Ep-1PN菌株毒力衰退及生防潜能的研究[D];华中农业大学;1999年
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1 杨丹;湖北省油菜菌核病病菌多样性研究[D];华中农业大学;2010年
2 丁颜敏;两种耕作制度下油菜菌核病的发生规律及生防菌盾壳霉应用研究[D];华中农业大学;2010年
3 卢叶青;核盘菌菌核围微生物的分离以及拮抗性分析[D];华中农业大学;2010年
4 张学雷;大豆菌核病菌遗传多样性及品种抗性[D];华中农业大学;2010年
5 王萍萍;盾壳霉产孢相关基因的克隆及腺苷脱氨酶(CMADA)基因的初步研究[D];华中农业大学;2010年
6 李兆防;拮抗毛壳和木霉混用防治土传病害的初步研究[D];山东农业大学;2009年
7 王海波;取代苯并咪唑乙酮肟醚的合成及其抑菌活性[D];山东农业大学;2010年
8 刘娜;芥子油苷在拟南芥对核盘菌抗性中的作用研究[D];浙江大学;2011年
9 马亚男;Rhizoctonia spp.菌核分化不同阶段活性氧代谢及相关酶变化[D];山东农业大学;2011年
10 曹娜;向日葵锈病初步研究[D];吉林农业大学;2011年
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1 杨秋;唐岱;苏腾伟;孙晓佳;颜隽;;基质及生长调节剂对切花小菊扦插生根的影响[J];安徽农业科学;2007年02期
2 王玉成,杨传平,姜静;木本植物组织总RNA提取的要点与原理[J];东北林业大学学报;2002年02期
3 何文林;紫叶小檗硬枝扦插技术[J];河北林业科技;2001年03期
4 顾永华;杨军;何云;汪立三;;秤锤树扦插繁殖技术[J];林业科技开发;2007年01期
5 王福森,许成启,温宝阳,周丽君,李晶,高凤山,魏建华,苏贵林,宋玉文;银中杨扦插生根机理及无性繁殖技术研究[J];林业科技通讯;2001年07期
6 陈洁敏,赵九洲,王奎玲,孙太娟,陈东环;NAA和SA对竹节蓼、黄刺玫扦插生根的影响[J];莱阳农学院学报;1999年02期
7 梁海荣;温阳;杨立中;;四倍体刺槐嫩枝插穗生根的解剖学观察[J];内蒙古林业科技;2006年04期
8 赵晓敏;霍常富;沈海龙;;影响林木插条生根的内部及环境因子研究综述[J];世界林业研究;2007年05期
9 李文涛;王俊东;杨利峰;王宏伟;韩少杰;;实时荧光定量PCR技术及其应用[J];生物技术通讯;2006年01期
10 刘德良,张琴;珍稀濒危植物榉树扦插繁殖研究[J];西北林学院学报;2001年01期
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1 刘怀华;玉米异交不亲和基因Ga1-S的遗传定位及其过程的转录组和蛋白质组分析[D];山东农业大学;2011年
2 王方昆;马耳他型布氏杆菌弱毒疫苗株M5-90致弱分子机制的研究[D];中国农业科学院;2011年
3 胥猛;杨树不定根发育的基因表达调控研究[D];南京林业大学;2008年
4 冯健;日本落叶松×长白落叶松无性系间生根差异的分子机制[D];中国林业科学研究院;2008年
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1 张雪;灰毡毛忍冬的扦插繁殖技术及生根机理研究[D];西南大学;2009年
2 徐佩贤;东方杉嫩枝扦插繁殖技术及其生根机理研究[D];南京林业大学;2009年
3 张颖;秤锤树扦插繁殖技术及生根机理的研究[D];南京林业大学;2009年
4 于海耀;杂交鹅掌楸嫩枝扦插繁殖技术与生根机理研究[D];南京林业大学;2010年
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1 林相璀,牛赡光,董茂忠;生防细菌和甲霜灵对辣椒疫病联合防治作用评价[J];山东农业科学;2003年02期
2 王传全;贵池市油菜菌核病1992~1996年流行因素分析[J];安徽农业大学学报;1997年03期
3 周红姿,李宝聚,刘开启;抗药性木霉菌研究进展[J];北方园艺;2003年06期
4 杨谦,张翼鹏;核盘菌子囊盘形成的影响因子[J];东北林业大学学报;1995年02期
5 杨谦;核盘菌对多菌灵抗药性及其发展[J];东北林业大学学报;1995年05期
6 张丽华,党本元,周奕华,毛勇,张铁汉,曾君祉,王兰岚,陈正华;抗菌核病转基因油菜植株的获得[J];高技术通讯;1999年12期
7 陈荣基,唐东阶,武波,柏学亮,马庆生;抗福美双假单胞菌株的NTG化学诱变及分子探针鉴定[J];广西农业大学学报;1996年01期
8 罗赫荣,谢丙炎,马凤海,朱国仁;辣椒疫霉对甲霜灵和霜脲氰抗药性遗传的研究[J];湖南农业大学学报;1999年01期
9 李国庆;王道本;;拮抗细菌的筛选及其对油菜菌核病的防治效果[J];华中农业大学学报;1991年01期
10 韦善君,陈学章,李国庆,姜道宏,王道本;盾壳霉在油菜花瓣上萌发的影响因子分析[J];华中农业大学学报;1999年06期
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1 任莉;胡燕梅;李国庆;;核盘菌重寄生菌盾壳霉降解草酸毒素的研究[A];第三届湖北湖南植保农药学术研讨会论文集[C];2004年
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1 任海英;江苏省常熟地区蚕豆镰刀菌枯萎病病原及其防治研究[D];南京农业大学;2002年
2 缪华军;盾壳霉抗杀菌剂农利灵突变菌株的获得、特性及其应用研究[D];华中农业大学;2004年
3 胡燕梅;盾壳霉产生的几丁质酶及其作用研究[D];华中农业大学;2004年
4 王英超;核盘菌重寄生菌盾壳霉的固体发酵及分生孢子菌剂制备的研究[D];华中农业大学;2005年
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1 徐素琴;盾壳霉菌的研究[J];东北林业大学学报;1987年S1期
2 韦善君,李国庆,姜道宏,王道本;草酸对重寄生真菌盾壳霉分生孢子萌发和菌丝生长的影响[J];植物病理学报;2004年03期
3 李国庆,王道本,张顺和,但汉鸿;菌核寄生菌盾壳霉的研究 Ⅰ.生物学特性及在湖北省的自然分布[J];华中农业大学学报;1995年02期
4 高俊明,王双双,刘慧平,韩巨才;菌核重寄生菌盾壳霉生物学特性研究[J];山西农业大学学报;2002年01期
5 韦善君,陈学章,李国庆,姜道宏,王道本;盾壳霉在油菜花瓣上萌发的影响因子分析[J];华中农业大学学报;1999年06期
6 姜道宏,李国庆,付艳平,易先宏,王道本;盾壳霉控制油菜菌核病菌再侵染及其叶面存活动态的研究[J];植物病理学报;2000年01期
7 师俊玲,堵国成,陈坚;盾壳霉在油菜菌核病菌生物防治中的应用[J];中国生物工程杂志;2003年04期
8 师俊玲,李寅,钱华丽,堵国成,陈坚;盾壳霉CCTCC M203020的生长特性及其应用潜力[J];应用与环境生物学报;2004年06期
9 闫丽英,刘星,张瑞林,曹福中,赵丽萍;菌核寄生菌盾壳霉扩大培养和孢子保存方法的研究[J];现代农业;2005年06期
10 高俊明,刘慧平,李新凤,高培军,王建明,韩巨才;盾壳霉对核盘菌的重寄生机制研究[J];山西农业大学学报;2002年03期
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2 曾丽梅;李国庆;杨龙;姜道宏;;生防菌盾壳霉草酸脱羧酶基因的克隆及序列分析[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
3 李国庆;姜道宏;;重寄生菌盾壳霉及其防治核盘菌菌核病的研究进展[A];湖北省植物病理学会2002年学术年会论文集[C];2002年
4 杨龙;李国庆;龙亚琴;洪国平;姜道宏;;盾壳霉在土壤中的存活及其温度和土壤含水量对其存活的影响[A];中国植物病理学会2009年学术年会论文集[C];2009年
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8 任莉;胡燕梅;李国庆;;核盘菌重寄生真菌盾壳霉降解草酸毒素的研究[A];中国植物病理学会2004年学术年会论文集[C];2004年
9 魏玮;付艳苹;姜道宏;;盾壳霉丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因CMCLA4的克隆及初步功能研究[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
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2 曾凡云;MAPK途径在盾壳霉产孢及重寄生作用中的功能研究[D];华中农业大学;2012年
3 任莉;重寄生真菌盾壳霉降解草酸毒素及其引起的生防效应研究[D];华中农业大学;2008年
4 宫晓艳;盾壳霉T-DNA插入体库的构建及两个分生孢子形成相关基因的克隆[D];华中农业大学;2008年
5 杨龙;生防菌盾壳霉防治油菜菌核病的生态学基础及其应用研究[D];华中农业大学;2009年
6 高小宁;植物内生细菌菌株Em7对油菜菌核病的防治研究[D];西北农林科技大学;2012年
7 杨丽萍;拮抗菌PY-1菌株的鉴定及对油菜菌核病防治潜能的评估[D];华中农业大学;2007年
8 贾娇;拟南芥转录因子MYB73抗核盘菌的分子机制研究[D];河北农业大学;2012年
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1 谢晓莉;盾壳霉胞外蛋白酶特性、分离纯化及其生防作用评估[D];华中农业大学;2011年
2 尤艳华;盾壳霉双相发酵过程中污染微生物的分析及其控制[D];华中农业大学;2011年
3 唐兴芳;盾壳霉(Coniothyrium Minitans)固态培养研究[D];西北农林科技大学;2011年
4 王萍萍;盾壳霉产孢相关基因的克隆及腺苷脱氨酶(CMADA)基因的初步研究[D];华中农业大学;2010年
5 陈雪;盾壳霉产孢相关基因Cm1107的功能研究[D];华中农业大学;2012年
6 徐伟华;CmbZIP-like和CmAPP基因在盾壳霉发育和产孢过程中的功能分析[D];华中农业大学;2012年
7 缪华军;盾壳霉抗杀菌剂农利灵突变菌株的获得、特性及其应用研究[D];华中农业大学;2004年
8 胡燕梅;盾壳霉产生的几丁质酶及其作用研究[D];华中农业大学;2004年
9 崔慧;CmAvaB基因在盾壳霉发育和产孢过程中的功能分析[D];华中农业大学;2012年
10 程家森;盾壳霉真菌病毒(CmRV)基因组的分子生物学特性研究[D];华中农业大学;2003年
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