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《华中农业大学》 2011年
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共轭亚油酸对TLR4信号通路相关基因表达的影响

周先  
【摘要】:共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid, CLA)是一种天然的功能性脂肪酸,具有减少体脂、提高动物生产性能、改善胴体性状等特殊生理功能,尤其可提高动物机体的免疫力,因而受到广泛的关注。Toll样受体是连接机体固有免疫与获得性免疫的纽带,在抗感染和免疫调节方面发挥重要作用,而有关CLA对TLR4及其相关信号转导的调节报道较少。本试验分别在动物与细胞水平上进行了研究,旨在通过研究CLA对TLR4信号通路相关基因表达的影响,进一步阐明CLA免疫调控机制。 (一)动物试验60只SPF级22-23g雄性昆明小鼠,随机分为试验组和对照组,分别饲喂添加1%CLA和1%大豆油的小鼠饲料。试验期30d后通过给小鼠腹腔注射细菌内毒素(lipopolysaccharide, LPS) (4mg/kg)建立免疫应激模型,分别于0h、1.5h、3h、6h、12h采集小鼠脾脏,采用RT-PCR分析其TLR4 (Toll-Like Receptor 4)、MyD88(myeloid differentiation factor 88)、TRIF(TIR-domain-containing adapter-inducing interferon-β)、NFKB-p65 (nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells)的表达水平。试验结果表明:注射LPS后上述各基因表达量升高,均在6h达到峰值。试验组脾脏TLR4、MyD88、TRIF的mRNA表达量低于对照组,在6h时达到显著效果(P0.05),但NFκB-P65的显著效果(P0.05)出现在3h时。 (二)细胞试验设置空白对照组(DMSO)、低剂量组(50μmol/L CLA-DMSO)、高剂量组(100μmol/L CLA-DMSO)的DMEM细胞培养液培养RAW264.7小鼠巨噬细胞,培养24h后加入LPS(100ng/mL)诱发产生免疫反应,分别于0h、2h、4h、8h后收集细胞,采用RT-PCR分析其TLR4、MyD88、TRIF、NFκB-P65的表达水平。试验结果表明:加入LPS后上述各基因的表达量均升高,在4h达到峰值。试验组上述四基因的表达量均低于空白对照组,浓度为100μmol/L的高剂量组显著低于空白对照组(P0.05)。 结论:CLA可有效抑制LPS诱发的TLR4信号通路中TLR4、MyD88、TRIF、NFκB-p65的表达,提示CLA对机体免疫的调控可能与此通路有关。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S816

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【参考文献】
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