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《华中农业大学》 2011年
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茶用菊耐热体细胞无性系变异体的研究

杨曦  
【摘要】:茶用菊花不仅具有特殊的饮用价值,还具有名贵的药用价值,深受人们的喜爱。茶用菊花不耐高温,喜温暖及冷凉气候,生长适温为18-21℃。在武汉地区,夏季高温常达38℃以上,这种高温环境能够直接或间接地影响茶用菊花的生理生化代谢,从而抑制茶用菊花的生长和发育,其引种、栽培和推广受到严重的阻碍。随着茶用菊花的功效不断被验证,市场对其数量与质量的要求日益提高。茶用菊花的传统繁殖方法已不能满足人们生产和生活的需要。本实验以杭白菊、亳菊、贡菊、神农香菊四种茶用菊花为材料,探讨了它们的高温半致死温度与耐热性。同时,为了获得茶用菊花耐热新品种,本实验采用高温胁迫与渗透胁迫相结合的方法进行了茶用菊花耐热体细胞无性系变异体的离体筛选。主要结果与结论如下: 1.茶用菊的高温半致死温度与耐热性 经过一系列梯度高温胁迫处理后,对4种茶用菊花露地苗和组培苗的叶片电导率进行了测定和分析,处理温度和细胞伤害率之间呈现典型的“S”曲线,通过显著性验证。通过Logistic方程拐点确定高温半致死温度LT50,4种茶用菊花露地苗的高温半致死温度为:神农香菊51.83℃、杭白菊57.39℃、贡菊55.67℃、亳菊57.00℃;4种茶用菊花组培苗的高温半致死温度为:神农香菊44.37℃、杭白菊47.83℃、贡菊46.09℃、亳菊47.57℃。4种茶用菊花露地苗和组培苗的抗热性强弱顺序一致,抗热性顺序为:杭白菊亳菊贡菊神农香菊。 2.茶用菊耐热体细胞无性系变异体的离体筛选 胁迫温度为36℃时,达到半致死的时间为15d,当外源SA浓度为1 mg/L时,四种茶用菊花的褐化率最低,分别为37.33%、48.00%、57.33%、66.67%。胁迫温度为38℃时,达到半致死的时间为9d,当外源SA浓度为1 mg/L时,四种茶用菊花的褐化率最低,分别为32%、45.33%、65.33%、70.67%。比较36℃、38℃及40℃热胁迫处理,40℃的选择压力太大,38℃热处理达到半致死的时间比36℃较短,既节约了时间,也避免了由于胁迫压低培养时间长而出现的生理生化适应。因此为了离体筛选操作和控制的便利,为了提高筛选的效率,为了获得真正的耐热变异体,选出的茶用菊耐热变异体更适合在高温地区栽培和生长,以38℃为适宜胁迫温度,以9d为适宜胁迫时间,以浓度为1mg/L的外源水杨酸为适宜选择压。38℃高温胁迫与浓度为1mg/L的外源水杨酸渗透胁迫结合处理9d后材料的褐化率可以作为离体筛选的指标。 以四种茶用菊花无菌苗叶片为外植体,在诱导分化培养基中添加浓度为1mg/L的SA,25℃恒温培养2d,然后放在38℃下热胁迫处理9d,再将材料转移到不含SA的诱导分化培养基中培养三周,培养温度设置为25℃。杭白菊和神农香菊未获得变异植株,亳菊获得变异植株入选系B1、B2、B3,贡菊获得变异植株入选系G1、G2。 3.耐热体细胞无性系变异体的初步鉴定 在室温和高温条件下,变异植株的游离脯氨酸的含量、SOD活性和MDA的含量与普通植株有显著的差异,变异植株的游离脯氨酸的含量、SOD活性通植株高,且MDA的含量与普通植株相比有所下降。根据变异植株和普通植株的游离脯氨酸含量、SOD活性和MDA含量的变化趋势和规律,说明茶用菊变异植株具有更好的耐热能力。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S567.239

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