收藏本站
《华中农业大学》 2013年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

枯草芽胞杆菌TR21诱导香蕉产生的抗病生理生化特性

彭灿  
【摘要】:枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis) TR21在大田通过叶腋喷施方式能够有效防控香蕉枯萎病(Banana Fusarium Wilt)。为了深入研究枯草芽胞杆菌TR21喷叶防治香蕉枯萎病的作用机理,本论文对菌株在叶片的定殖以及定殖后引起的抗性生理变化和诱导的抗病相关基因表达展开了深入的研究。首先利用GFP标记技术研究了TR21在巴西蕉叶部的定殖规律;其次测定了TR21接种感抗香蕉品种(巴西蕉Musa spp. AAA cv. Brazil与农科1号Musa spp. AAA cv. Nongke No.1)后引起的过氧化氢积累规律;然后测定了两种基因型的感病品种(巴西蕉和广粉1号蕉Musa spp. ABB cv. Guangfen No.1)经TR21和尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种(Fusarium oxysporum f. sp. cubense, Race4)菌株FOC009处理后根系中酚类化合物和木质素含量的动态变化过程;最后利用实时荧光定量PCR技术分析了巴西蕉CAT、POD、PAL、PAE、PR-1、PR-3六种抗病相关基因在单独接种TR21、单独接种FOC009和挑战接种时的表达情况。结果如下: 1.采用原生质体转化法将质粒pHT315-gfp成功导入枯草芽胞杆菌TR21菌株,获得的工程菌株TR21-gfp能稳定表达绿色荧光蛋白。利用荧光显微镜观察TR21-gfp菌株在巴西蕉叶部的定殖过程,发现TR21喷叶片3h即在表皮细胞间隙大量汇聚,5h通过表皮的细胞间隙进入皮层细胞,7h进入到叶肉细胞。接种6d后,表皮上已经很少能够观察到细菌,但是在叶柄的细胞中检测到细菌的存在。表明TR21能在香蕉叶片和叶柄定殖。 2.利用DAB组织染色与H202含量定量测定方法,从定性和定量角度检测了TR21根系接种巴西蕉与农科1号蕉所引起的叶片H202动态变化。结果表明,以壳聚糖处理为阳性对照,TR21接种感病品种巴西蕉和抗病品种农科1号根系都能引起叶片活性氧迸发,处理后12h H2O2含量达到峰值,而壳聚糖处理的峰值在8h,且H202含量随TR21处理浓度的升高而升高,在TR21处理浓度为108cfu.mL-1,抗病品种农科1号叶片H202含量显著高于巴西蕉。 3.以香蕉枯萎病菌4号生理小种FOC009菌株处理的根系为阳性对照,以清水处理为阴性对照,比较不同处理的广粉1号和巴西蕉根系可溶性酚酸、细胞壁结合酚酸和木质素累积和差异。结果显示:处理后0h、12h、24h、36h、48h、60h和72h,不同处理根系可溶性酚酸、细胞壁结合酚酸和木质素含量随时间延长逐渐增加,从48h开始,病原菌处理和生防菌处理的可溶性酚酸、细胞壁结合酚酸和木质素含量显著高于清水处理;72h时,除广粉根系可溶性酚酸外,病原菌处理的可溶性酚酸、细胞壁结合酚酸和木质素含量显著高于TR21处理。结果表明TR21叶腋接种能够诱导感病品种香蕉根系酚类物质和木质素累积,与病原菌接种诱导的抗性反应表现类似,但低于病原菌诱导的水平。 4、采用双标准曲线法,以香蕉Actin基因作为内参,利用实时荧光定量PCR技术研究了喷叶接种菌株TR21、根系接种病原菌FOC009以及先喷叶接种TR213d后再根系挑战接种病原菌FOC009对巴西蕉根系6种抗病相关基因表达的影响。结果表明,相对清水对照,TR21处理能快速诱导CAT和POD基因的上调,在处理后的12h就与对照有显著差异,但是不能诱导PAE基因的表达。TR21单独接种48h后也能引起PAL、PR-1和PR-3基因的表达上调。挑战组和病原菌FOC009处理组都能诱导六种基因的表达上调,但挑战组诱导的基因上调都显著高于病原菌单独处理,这意味着内生菌能诱导香蕉进入敏感状态,这种状态一旦受到病原菌的挑战便能以更快更强的模式进行应答。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:S476.1;S436.68

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 游春平;刘任;肖爱萍;张廷会;钟奕雄;;香蕉苗经生防菌处理后体内抗病性相关酶的变化[J];安徽农业科学;2008年09期
2 黄小红;邓开野;;香蕉皮多酚物质提取工艺研究[J];安徽农业科学;2010年22期
3 陈静,潘健存,赵鹏,王士长;香蕉茎叶青贮营养成分及单宁含量变化的实验研究[J];饲料工业;2005年13期
4 许林兵;;世界香蕉产业状况与发展趋势[J];广东农业科学;2006年10期
5 刘文清;周建坤;李洪波;杨贺年;吕顺;庄华才;;抗枯萎病香蕉新品种引种评价[J];广东农业科学;2010年03期
6 郑晓燕;章程辉;李积华;唐永富;曹玉坡;;超声分散结合高压蒸煮处理制备香蕉皮膳食纤维的工艺研究[J];广东农业科学;2010年05期
7 洪少朋;周灿芳;万忠;吴雪珍;黄秉智;罗军;;2009年广东香蕉产业发展现状分析[J];广东农业科学;2010年05期
8 魏岳荣,黄秉智,杨护,许林兵,邱继水;香蕉镰刀菌枯萎病研究进展[J];果树学报;2005年02期
9 杜志勇;樊小林;;改性石灰氮防治香蕉枯萎病及其恢复香蕉生产的效果[J];果树学报;2008年03期
10 彭埃天;宋晓兵;凌金锋;刘景梅;;香蕉枯萎病菌4号生理小种分子检测与枯萎病生物防治研究进展[J];果树学报;2009年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 ;Research on Risks and Forecasting Countermeasures of Hainan Banana Industry[J];Asian Agricultural Research;2011年04期
2 刘凤英;靳溪;汤树生;陈倩;张婷;赵文霞;张朝明;张燊;肖希龙;;喹烯酮诱导HepG2细胞DNA复制相关基因表达水平的变化[J];癌变·畸变·突变;2011年05期
3 董合忠,李维江,刘锐,张玉娜;植物诱导抗病性及其在棉花病害防治中的利用[J];山东农业科学;2002年02期
4 孙海彦;孙建波;彭明;;香蕉枯萎病生物防治研究进展[J];安徽农学通报;2008年15期
5 游春平;肖爱萍;甄俊杰;傅志岸;;香蕉枯萎病拮抗细菌对4种土传植物病原真菌的抑制作用[J];安徽农业科学;2006年17期
6 陈海英;廖富蘋;林健荣;罗天宽;;拮抗细菌在植物病害防治中的应用及展望[J];安徽农业科学;2008年20期
7 刘佳佳;马竹凤;闫淑珍;;植物内生细菌对利福平的抗性及紫外诱变研究[J];安徽农业科学;2010年18期
8 王清红;李培征;;香蕉枯萎病生物防治研究进展[J];安徽农业科学;2010年20期
9 刘燕群;曾小红;方佳;;海南香蕉产业风险及预警对策研究[J];安徽农业科学;2011年18期
10 沈丹;单莹;那艳斌;张艳秋;张天静;赵丹;;矿质元素对烟草病程相关蛋白及抗性生理指标的影响[J];现代农业科技;2011年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 高剑;肖苏生;曾涛;曾会才;;农杆菌介导的香蕉枯萎病菌4号生理小种高效遗传转化体系的建立及影响因子的优化[A];2009年海南省微生物学检测及质量保证研讨会论文集[C];2009年
2 唐改娟;曾涛;林妃;曾会才;彭明;郭刚;;香蕉枯萎病菌1号小种致病相关基因敲除突变体△Focr1-328的生物学特性研究[A];2011年海南省微生物学会学术年会论文汇编[C];2011年
3 魏岳荣;黄秉智;杨护;邱继水;许林兵;张明涛;;香蕉感染枯萎病菌4号小种后的生理变化[A];2008园艺学进展(第八辑)——中国园艺学会第八届青年学术讨论会暨现代园艺论坛论文集[C];2008年
4 李玉红;程智慧;陈鹏;杜慧芳;;BTH对黄瓜叶片胞间隙27kD霜霉病病程相关蛋白的系统诱导[A];2008园艺学进展(第八辑)——中国园艺学会第八届青年学术讨论会暨现代园艺论坛论文集[C];2008年
5 &张炳欣;楼兵干;竺莉红;陈晓斌;苗东华;;植物表面和根围的有益微生物的分子生态学及它们在植病生防上的应用[A];新世纪(首届)全国绿色环保农药技术论坛暨产品展示会论文集[C];2002年
6 张志红;赵兰凤;韦翔华;聂盛仙;张丽娟;缑武龙;席荣宾;李华兴;;生物肥料在盆栽香蕉上的应用效果研究[A];第四次全国土壤生物和生物化学学术研讨会论文集[C];2007年
7 陈森;;广东省香蕉枯萎病防控存在的问题和对策[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
8 董合忠;陈穗云;李维江;;青霉菌灭活菌丝体诱导棉苗产生PR-蛋白[A];中国棉花学会2005年年会暨青年棉花学术研讨会论文汇编[C];2005年
9 张汉荣;刘长全;;我国香蕉科技研究的几点思考与建议[A];热带作物产业带建设规划研讨会——热带果树产业发展论文集[C];2006年
10 李松伟;黄俊生;羊玉花;杨歆璇;贾慧升;杨腊英;方晓东;李传东;;香蕉枯萎病菌pacC基因的克隆及序列分析[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 顾春波;草莓枯萎病菌对多菌灵及戊唑醇的抗性研究[D];山东农业大学;2010年
2 鄢小宁;利用黄瓜幼苗内生真菌种子处理防治南方根结线虫的研究[D];浙江大学;2010年
3 Muharam Ali;抗条锈病小麦N95175抗性基因的遗传图谱与克隆[D];西北农林科技大学;2010年
4 夏勇开;中国香蕉生产技术的经济研究[D];海南大学;2011年
5 黄永红;韭菜对香蕉枯萎病的防控效果及其作用机理的研究[D];湖南农业大学;2011年
6 陈华民;拟南芥中EIN3EIL1通过抑制SA信号途径负调控植物的先天免疫反应[D];上海交通大学;2008年
7 曹云;SQR 9微生物有机肥防治黄瓜土传枯萎病的效应与机制研究[D];南京农业大学;2011年
8 贾振华;植物黄酮类化合物槲皮素与转录因子AtMYB44诱导和调控植物防卫反应的研究[D];南京农业大学;2010年
9 易小林;干旱、高温及其双重胁迫对紫御谷(Pennisetum glaucum'Purple Majesty')生理特性的影响及外源SA缓解效应[D];西南大学;2011年
10 牛吉山;小麦—族毛麦6VS/6AL易位系叶片cDNA文库构建及6VS/6AL易位系中抗白粉病相关基因的克隆[D];南京农业大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘学明;枯草芽胞杆菌TR21的发酵和海洋细菌DM09的抗真菌活性物质研究[D];华中农业大学;2010年
2 李红美;抗香蕉枯萎病4号小种的枯草芽胞杆菌R31的发酵条件优化[D];华中农业大学;2010年
3 汪航;“柏拉玛地”玉米大斑病无病斑型抗性基因HtNB的定位[D];华中农业大学;2010年
4 李一星;番茄抗病毒相关基因的克隆与比较分析[D];浙江理工大学;2010年
5 薛雯雯;CGA-N46基因在枯草杆菌中的多顺反子表达及表达条件优化[D];河南工业大学;2010年
6 孙溶溶;花椰菜菌核病抗性种质资源筛选及诱导抗性生理基础研究[D];浙江大学;2011年
7 张晓燕;过氧化氢预处理对拟南芥耐逆性的影响及拟南芥耐盐突变体的筛选[D];山东师范大学;2011年
8 劳世辉;香蕉(Musa spp.)种质资源的核型分析和变异的鉴定、筛选[D];西南大学;2011年
9 罗杨;膜醭毕赤酵母对柑橘采后青绿霉病害的生物防治及机理研究[D];西南大学;2011年
10 宋美仙;抗萝卜细菌性软腐病的银杏内生细菌的初步研究[D];福建农林大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜莉莉;陈彦闯;辛明秀;;枯草芽孢杆菌在防治植物病害上的应用及研究进展[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年07期
2 王芳;过建春;夏勇开;;海南香蕉产业组织化模式初探[J];安徽农业科学;2008年24期
3 林兴祖;陈腾;;海南香蕉镰刀菌枯萎病综合防治措施[J];现代农业科技;2007年03期
4 赵丽华;;香蕉主要病虫害防治措施[J];现代农业科技;2008年15期
5 李勇;丁雷;李言;侯宁;常玉梅;梁利群;雷清泉;;低温对鲤鱼的5个基因在不同组织中表达量的影响[J];动物学报;2008年03期
6 李素群;吴自立;牛菊兰;冯建山;;红豆草中单宁的分光光度法测定[J];草业学报;1993年02期
7 徐华;贺军民;黄辰;佘小平;;UV-B辐射对蚕豆叶片气孔运动的间接效应与NO和H_2O_2有关(英文)[J];西北植物学报;2006年01期
8 林时迟,张绍升,周乐峰,黄月英,胡方平;福建省香蕉枯萎病鉴定[J];福建农业大学学报;2000年04期
9 王茂明;杨秀娟;陈福如;阮宏椿;;我国香蕉镰刀菌枯萎病的发生与防治[J];福建农业科技;2005年06期
10 杨秀娟;陈福如;阮宏椿;;香蕉枯萎病菌拮抗菌株的筛选[J];福建农业学报;2006年02期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 丁兆建;习平根;李敏慧;汤历;陆小军;郑常格;姜子德;;亲和的生防微生物组合对香蕉枯萎病的盆栽防效测定[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
2 兀旭辉;许文耀;林成辉;;香蕉枯萎病菌粗毒素特性的初步研究[A];中国植物病理学会2004年学术年会论文集[C];2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 胡莉莉;香蕉抗枯萎病生理生化基础的研究[D];华南热带农业大学;2006年
2 马红娟;香蕉枯萎病拮抗细菌的筛选及其利用研究[D];福建农林大学;2009年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 常维山,张春阳,牛钟相,朱立贤,谢幼梅;产蛋白酶枯草芽胞杆菌益生菌种的筛选与应用[J];中国畜牧杂志;2003年03期
2 刘芳,梁运祥;绿色荧光蛋白基因对枯草芽胞杆菌的标记[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2005年05期
3 游银伟;尤升波;岳寿松;;产角蛋白酶芽胞菌YYW-1的鉴定及产酶性质分析[J];农业生物技术学报;2007年03期
4 熊伟,梁运祥,戴经元,李学雄;枯草芽胞杆菌对斑节对虾饲养池水净化作用的初步研究[J];华中农业大学学报;2003年03期
5 罗燕娜;杜娟;李俊华;闫豫君;赵思峰;;滴灌条件下枯草芽胞杆菌S37和S44对棉花黄萎病的防治效果[J];植物保护;2011年02期
6 安永义,王新谋,刘春燕,吴中红,江逆;活菌直接混入鸡粪对鸡粪中氨和硫化氢产生的影响[J];当代畜牧;1996年03期
7 孙常灿;何晓丽;杨容;蒋晶;陈章宝;;大豆胰蛋白酶抑制剂微生物发酵灭活研究[J];畜禽业;2007年06期
8 徐晖;魏培莲;;枯草芽胞杆菌微生态制剂的研制[J];氨基酸和生物资源;2008年02期
9 姚小飞;范萌;曹晓玲;李祥;;益生枯草芽胞杆菌B15的性能检测及培养条件研究[J];中国微生态学杂志;2009年07期
10 马宏宇;李菁菁;祁高富;喻子牛;赵秀云;;蛋白酶产生菌的化学诱变及酶学性质[J];华中农业大学学报;2010年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 胡小加;江木兰;张学江;;枯草芽胞杆菌在油菜根茎叶的定殖动态和生防作用研究[A];廿一世纪微生物学发展前沿与应用新技术研讨会论文摘要集[C];2003年
2 晋婷婷;唐玮;陈向东;;枯草芽胞杆菌BG2036胞外释放DNA现象与其缺陷性原噬菌体PBSX的相关性研究[A];基因开启未来:新时代的遗传学与科技进步——湖北省遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2009年
3 韩冬梅;班慧芳;余子全;喻子牛;孙明;;新型抑菌蛋白APn5抑制胡萝卜软腐欧文氏菌[A];中国微生物学会《第二届全国农业微生物研究及产业化研讨会》和《第十一届全国杀虫微生物学术研讨会》暨《湖北省暨武汉市微生物学会和内蒙古微生物学会2008年会》论文摘要[C];2008年
4 晋婷婷;赵明明;王轶;唐玮;陈向东;;枯草芽胞杆菌BG2036胞外释放DNA现象与其缺陷性原噬菌体PBSX的相关性研究[A];2010年第四届全国微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2010年
5 黄庆阳;佟伟霜;常缨;;香鳞毛蕨提取液抑菌作用的研究[A];第八届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2009年
6 曹云鹤;乔家运;;枯草芽孢杆菌MA139β-甘露糖酶基因在毕赤酵母中的表达研究[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
7 龚建森;陆俊贤;吕晓娟;单艳菊;刘学贤;;枯草芽胞杆菌制剂对肉鸡生长性能与屠宰性能的影响[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
8 姚璐晔;堵国成;陈坚;;一株PVA降解酶产生菌的产酶条件的初步优化[A];第三届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(上)[C];2006年
9 王倩;翟海瑞;张利鹃;马丽卫;杨劲松;;香蕉贮藏保鲜技术的研究进展[A];管产学研助推食品安全重庆高峰论坛——2011年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨全国食品科学与工程博士生学术论坛论文集[C];2011年
10 李信申;阮小蕾;李华平;;香蕉不同抗性品种对枯萎病侵染的蛋白组学分析[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报通讯员 李根杰;香蕉熟了 村民笑了[N];南宁日报;2010年
2 范南虹刘湘洪;五六年内可解决香蕉品种老化[N];海南日报;2007年
3 钟祺;卖好蕉有得赚 种好蕉有钱奖[N];东莞日报;2008年
4 中化化肥高级顾问、中国农业大学教授 陈伦寿;香蕉的生育特点和施肥要点[N];农资导报;2007年
5 张国山;后微波炉时代:技术为王 [N];中华工商时报;2003年
6 记者 赖有生;新品香蕉“病地”茁壮成长[N];中山日报;2006年
7 祥云 体雄;香蕉产业成了乐东“摇钱树”[N];中国经济导报;2008年
8 陈贵善;香蕉风害的预防及风害后的管理[N];海南农垦报;2006年
9 伍雪平陈少燕;麻涌香蕉或以“珠三角国蕉”注册商标[N];东莞日报;2008年
10 曹一平;香焦滴灌施肥的好处[N];农资导报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈雄;枯草芽胞杆菌高产聚-γ-谷氨酸及其应用研究[D];华中农业大学;2005年
2 江昊;聚γ谷氨酸在枯草芽胞杆菌和大肠杆菌中的生物合成[D];华中农业大学;2007年
3 王启军;枯草芽胞杆菌B6-1产脂肽和聚-γ-谷氨酸及抗几种植物病原菌的研究[D];华中农业大学;2008年
4 李梅婷;香蕉枯萎病菌毒素在香蕉抗病品种选育和抗病性鉴定中的应用[D];福建农林大学;2010年
5 林凌;产纤维素酶菌株的筛选和枯草芽胞杆菌内切葡聚糖酶催化活性的改造[D];华中农业大学;2009年
6 朱莉;苏云金芽胞杆菌γ-氨基丁酸代谢旁路相关基因簇的结构与功能研究[D];中国农业科学院;2007年
7 刘超;苏云金芽胞杆菌菌株YBT-1520全基因组序列的初步分析[D];华中农业大学;2007年
8 王静毅;SSR分子标记开发和在香蕉种质资源遗传分析中的应用[D];海南大学;2010年
9 张妙霞;野生香蕉(Musa spp., AB group)抗寒相关基因的克隆与表达分析[D];福建农林大学;2010年
10 武秋立;重组枯草芽孢杆菌生产核黄素发酵优化及代谢组学研究[D];天津大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 彭灿;枯草芽胞杆菌TR21诱导香蕉产生的抗病生理生化特性[D];华中农业大学;2013年
2 王倩;枯草芽胞杆菌TR21的剂型应用技术研究和活性物质分离纯化[D];华中农业大学;2012年
3 刘学明;枯草芽胞杆菌TR21的发酵和海洋细菌DM09的抗真菌活性物质研究[D];华中农业大学;2010年
4 周林;枯草芽胞杆菌TR21对香蕉枯萎病生防机制研究[D];华中农业大学;2011年
5 田化平;海洋枯草芽胞杆菌DM03抗病原真菌物质的研究[D];华中农业大学;2009年
6 吴莉莉;cry2Ab基因载体的构建及其在枯草芽胞杆菌中的表达[D];福建农林大学;2012年
7 王水明;进出境皮毛加工工艺pH和温度对杀灭病原微生物影响的调查[D];南京农业大学;2004年
8 吴园园;枯草芽胞杆菌NCD-2生物膜形成和芽胞形成相关基因的克隆及功能分析[D];河北大学;2013年
9 戴芳;堆肥改良剂—生物表面活性剂的开发与应用研究[D];湖南大学;2005年
10 李荣;枯草芽胞杆菌R31对香蕉枯萎病生防机制研究[D];华中农业大学;2012年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026