收藏本站
《华中农业大学》 2015年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

乳酸杆菌抗感染风险机制研究

刘文舒  
【摘要】:作为水产动物饲用抗生素的重要替代品,益生菌经几十年的的研究和应用,已成功商业化并大面积推广,其中乳酸杆菌的应用最广泛。粘附性能被认为是乳酸杆菌的重要特性,但是目前并没有相关研究对粘附性能差异的乳酸杆菌的益生作用进行系统比较。另外,关于停止添加乳酸杆菌后对宿主免疫力影响的报道也未见报道。本论文比较了不同粘附性能乳酸杆菌对罗非鱼的影响,建立水产动物革兰氏阴性菌浸浴攻毒试验的快速评价方法并应用于停喂强粘附乳酸杆菌后宿主抗感染的变化,发现停喂后宿主出现易感现象并对其发生机制进行了研究,最后从规避风险角度,评价了乳酸杆菌关键益生元件丁酸盐对鲤的益生作用。主要结果如下:一、饲料添加不同剂量(0、105、107、109 cell/g饲料)强粘附短乳杆菌JCM1170和弱粘附嗜酸乳杆菌JCM1132饲喂罗非鱼35 d,在第10、20、35 d对罗非鱼肠道、肾脏和脾脏器官进行压力耐受基因和细胞因子mRNA表达水平和肠道粘附菌群结构分析。投喂结束后进行14 d的致病菌嗜水气单胞菌NJ-1浸浴攻毒试验。结果显示不同处理组罗非鱼的存活率、体增重和饵料系数都没有显著差异。饲料添加强粘附和弱粘附乳酸杆菌都可以改变罗非鱼肠道粘附菌群结构,但是强粘附菌株的影响作用更快和更明显。两株乳酸杆菌在肠道、脾脏和肾脏组织诱导了相同细胞因子表达水平变化模式,只是变化程度上有所区别。肠道HSP70表达水平变化与肠道粘附菌群改变相一致。只有高剂量的JCM1170对嗜水气单胞菌NJ-1的毒性具有显著的保护作用。以上结果表明肠道粘附性能是水产益生菌筛选的重要条件之一。二、罗非鱼饲喂对照组(CK)、果寡糖组(FOS,0.1%)、短乳杆菌JCM1170组(108 cell/g)、短乳杆菌JCM1170与果寡糖组(108 cell/g+0.1%FOS)、植物乳杆菌JCM1149组(108 cell/g)、植物乳杆菌JCM1149与果寡糖组(108 cell/g+0.1%FOS)35 d后进行浸浴攻毒,在24 h取部分鱼的肠道样品,测肠道碱性磷酸酶活(IAP)和肠道粘附嗜水气单胞菌数量,之后每隔12 h统计死亡数量。不同处理罗非鱼感染嗜水气单胞菌后,在短期内(3、4 d),相对保护率(RLP)和IAP之间co-relative检测结果显示两者间相关性显著。长时期浸浴后(21 d)RLP和IAP间线性回归分析显示两者存在着显著的一次和二次线性关系(P0.05)。而且IAP的活性高低与肠道感染后粘附的嗜水气单胞菌数量相一致。这表明IAP这一指标可应用于水产动物革兰氏阴性菌攻毒试验,快速反应宿主对病原菌抵抗力。罗非鱼饲喂基础饲料华中农业大学2015届博士研究生学位论文(CK)、短乳杆菌与果寡糖饲料(108 cell/g+0.1%FOS,1170组)、植物乳杆菌与果寡糖饲料(108 cell/g+0.1%FOS,1149组)两周。在投喂乳酸菌结束时(S0)和改喂基础料3 d(S3)后,分别进行嗜水气单胞菌浸浴攻毒,24 h后取肠道样品,测定IAP活性。结果显示在S0 d,1170和1149组罗非鱼IAP活性低于CK组,但是在S3 d,1149组罗非鱼IAP显著高于CK组,1170组与CK组无差异。表明持续投喂短乳杆菌1170和植物乳杆菌1149能够阻止嗜水气单胞菌NJ-1在肠道的粘附。但是停喂3 d后1170对宿主的保护力减弱,而停喂JCM1149罗非鱼更加容易感染NJ-1。三、罗非鱼饲喂植物乳杆菌JCM1149和短乳杆菌JCM1170添加饲料14 d后,在S0 d(持续投喂)和S3 d(改喂基础料3 d),对罗非鱼肠道粘附的JCM1149和JCM1170菌株进行纯培养计数,结果显示停喂后JCM1170数量降低,但是变化不显著,而JCM1149数量下降两个数量级,变化极显著。对停喂JCM1149后的肠道粘附菌群结构、肠道粘液体外抑菌能力、肠道通透性、肠道代谢组学和免疫应激的研究发现,停喂JCM1149后,罗非鱼肠道微生态发生紊乱,肠道粘液和肠道上皮细胞屏障性能减弱,而且停喂JCM1149后罗非鱼肠道代谢物变化显著。因此,在恢复重建期发生感染时,宿主更加容易被嗜水气单胞菌感染与停喂JCM1149后肠道粘附微生物屏障、肠道上皮细胞和肠道粘液屏障功能失调以及肠道代谢紊乱紧密相关。四、丁酸或丁酸盐是乳酸菌重要的益生元件,评价了幼年鲤鱼未经(对照组)和经氧化豆油预处理14 d后,饲料添加不同缓释型的微囊丁酸钠(MSB0、MSB1.5、MSB3.0)产品56 d对生长、肠道粘膜形态、免疫应答和粘附菌群的影响。在对照组和氧化油脂组,MSB增加了获得体重和降低了饵料系数。在氧化油脂组,未添加MSB的鱼肠道粘膜受损,而添加两种剂型的MSB均对肠道粘膜起到修复作用。在氧化油脂组,饲喂MSB组的肠微绒毛密度显著增加(P0.001),在中肠,微绒毛密度受预处理饲料影响(P0.001),在后肠受不同缓释型丁酸钠影响(P=0.003)。在每个肠道部位,预处理饲料和MSB缓释时间对热休克蛋白HSP70、免疫细胞因子(IL-1β、TNF-α、TGF-β)转录表达水平的交互作用显著,后肠HSP70和前肠IL-1β除外。饲喂MSB对罗非鱼每个肠道部位的粘附菌群变化影响不明显,与对照组比相似系数0.79。以上结果表明乳酸杆菌益生元件-丁酸钠能够作为饲料添加剂可以刺激宿主免疫、维护肠道健康,而且不会干扰肠道菌群结构。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:S941

免费申请
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 Alejandra de Moreno de Le Blanc;Jean Guy Le Blanc;;Effect of probiotic administration on the intestinal microbiota, current knowledge and potential applications[J];World Journal of Gastroenterology;2014年44期
2 廖英杰;刘波;任鸣春;戈贤平;谢骏;崔红红;周群兰;张武肖;陈汝丽;;精氨酸对团头鲂幼鱼生长、血清游离精氨酸和赖氨酸、血液生化及免疫指标的影响[J];中国水产科学;2014年03期
3 刘慧;孙涛;;肠道菌群失调的研究进展[J];医学综述;2014年03期
4 高侃;汪海峰;章文明;刘建新;;益生菌调节肠道上皮屏障功能及作用机制[J];动物营养学报;2013年09期
5 张兆顺;窦宝棠;白应利;赵安彬;;抗生素饲料添加剂在畜牧业生产中过度使用的危害及对策[J];陕西农业科学;2012年03期
6 肖丹;曹海鹏;胡鲲;杨先乐;;淡水养殖动物致病性嗜水气单胞菌ERIC-PCR分型与耐药性[J];中国水产科学;2011年05期
7 张林;丁运敏;艾晓辉;;嗜水气单胞菌佐剂灭活苗免疫中华鳖抵抗嗜水气单胞菌的致死性感染[J];微生物学通报;2010年12期
8 何夙旭;周志刚;姚斌;白东清;;3种DNA提取方法对养殖池塘不同生境菌群PCR-DGGE分析的影响[J];中国农业科技导报;2009年01期
9 思源;;抗生素滥用与水产食品安全[J];海洋世界;2008年12期
10 张灼阳;刘畅;郭晓奎;;益生菌的安全性[J];微生物学报;2008年02期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 王雯雯;鱼类肠道可定植乳酸杆菌分子生态的研究[D];中国农业科学院;2011年
2 孙欣;吸附与包埋技术固定化乳酸菌及其性质研究[D];中国海洋大学;2007年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 于贝贝;韩克阳;王立柱;;肠道微生态及粪菌移植[J];中国肛肠病杂志;2017年05期
2 孔广欢;郑国卫;段滇宁;范卫;邱海滨;;益生菌及制剂在畜禽方面的应用[J];河南畜牧兽医(综合版);2017年05期
3 杨三龙;董月新;;预防性应用抗生素后肠道菌群失调及其危险因素分析[J];中国实用医药;2015年35期
4 张萌萌;宁俊佳;徐善良;王春琳;王丹丽;;感染溶藻弧菌对日本蟳肝胰腺免疫功能的影响[J];水产学报;2015年12期
5 郑克芬;;浅析血站电子档案管理采供血业务的安全性[J];中国卫生标准管理;2015年30期
6 马丹;杨帆;方军;王树玲;李兆申;柏愚;;肠道菌群及防御素在结直肠癌发病中的作用[J];世界华人消化杂志;2015年33期
7 张德锋;林强;刘礼辉;任燕;李宁求;付小哲;石存斌;吴淑勤;;美国红鱼水生气单胞菌的分离、鉴定及其分子特征[J];淡水渔业;2015年06期
8 张琳;贠婷婷;綦文涛;李杰;王永伟;李爱科;;乳化凝胶化法微囊化益生菌抗胁迫作用研究[J];动物营养学报;2015年11期
9 杨星;张美彦;周勇;范玉顶;曾令兵;;不同佐剂对大鲵嗜水气单胞菌灭活疫苗的免疫效果[J];水生态学杂志;2015年05期
10 丁园;魏智清;;甘氨酸和精氨酸对鱼抗缺氧能力的影响[J];黑龙江畜牧兽医;2015年21期
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李品毅;采用CRISPRi原位探索大肠杆菌Nissle 1917毒素-抗毒素功能研究[D];浙江工商大学;2019年
2 宋云皓;内蒙古自治区东部地区玉米秸秆微贮菌剂的开发及利用[D];内蒙古农业大学;2018年
3 冀海龙;新型畜牧微生态制剂的制备与应用[D];大连工业大学;2018年
4 黄路;酿酒酵母在鱼类中的益生效应研究[D];华中农业大学;2015年
5 何伟聪;二种益生菌对军曹鱼幼鱼生长性能、免疫酶和消化酶活性、肠道菌群结构及TLR9基因表达量的影响[D];广东海洋大学;2015年
6 王文君;一株弧菌拮抗菌的鉴定、抑菌特性及应用效果的初步研究[D];中国海洋大学;2015年
7 孙蕾;海洋益生菌对养殖水体的影响[D];大连工业大学;2015年
8 张皓;养殖环境微生物群落的动态变化及与水环境的互作[D];苏州大学;2015年
9 高鹏;海参肠道中益生菌的筛选及鉴定[D];大连工业大学;2014年
10 王兴林;拟无枝酸菌转化阿魏酸生产香草醛的研究[D];江南大学;2013年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 Antonella Scalera;Matteo Nicola Dario Di Minno;Giovanni Tarantino;;What does irritable bowel syndrome share with non-alcoholic fatty liver disease?[J];World Journal of Gastroenterology;2013年33期
2 秦庆福;李洪福;;慢性肝病与肠道菌群的研究进展[J];中国微生态学杂志;2012年05期
3 章文明;汪海峰;刘建新;;乳酸杆菌益生作用机制的研究进展[J];动物营养学报;2012年03期
4 杨林辉;蔡俊;陈东风;;非酒精性脂肪性肝炎患者肠道菌群的变化及意义[J];临床肝胆病杂志;2012年02期
5 张华玲;谭周进;蔡光先;蔡莹;;肠道菌群失调调控技术研究进展[J];中国微生态学杂志;2011年11期
6 洪娜;于成功;;肠道菌群在炎症性肠病发生中的作用[J];胃肠病学;2011年11期
7 杜强;林黑着;牛津;丁贤;黄忠;陈旭;陈义方;;卵形鲳鲹幼鱼的赖氨酸需求量[J];动物营养学报;2011年10期
8 黄益澄;许洪伟;;肠道微生态系统与肝病[J];山东医药;2011年35期
9 汪海峰;章文明;汪以真;刘建新;;乳酸杆菌与肠道黏附相关表面因子及其机制的研究进展[J];动物营养学报;2011年02期
10 Francesca Fava;Silvio Danese;;Intestinal microbiota in inflammatory bowel disease:Friend of foe?[J];World Journal of Gastroenterology;2011年05期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 黄光祥;养殖鱼肠道菌群分子生态的研究[D];华中农业大学;2008年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 佟盼盼;刘莉;杨桂连;王春凤;;乳酸杆菌表面结构和粘附特性的研究进展[J];中国微生态学杂志;2012年10期
2 顾宏兵;罗非鱼烂体病的防治[J];农村养殖技术;2002年01期
3 李庆勇;高文峰;叶林;刘艺;巫树东;黄秋标;;水面种植鱼腥草对罗非鱼抗病能力及其血液生化指标的影响[J];科学养鱼;2019年12期
4 顾宏兵;越冬期须防罗非鱼烂体病[J];农家顾问;2001年12期
5 史秋梅,田在滋,高桂生,薛红玲,张晓军;罗非鱼肠炎病病原体的分离与鉴定[J];河北农业技术师范学院学报;1996年02期
6 牛红华,王福刚,曹保东;越冬罗非鱼常见鱼病与防治[J];中国水产;2002年12期
7 郑端义,张楚妃,高金弟,黄森钦;罗非鱼几种常见疾病的防治[J];科学养鱼;2005年06期
8 汪开毓;陈德芳;赵敏;黄凌远;黄锦炉;;罗非鱼主要疾病介绍与防治技术(四)[J];科学养鱼;2010年09期
9 王文彬;;养殖罗非鱼增收技术要诀[J];渔业致富指南;2019年24期
10 孙昳;崔丽莉;符世伟;高海涛;缪祥军;李晓辉;;产业结构调整时期云南罗非鱼池塘养殖生产经济效益分析[J];科学养鱼;2019年12期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 傅玲琳;励建荣;李学鹏;;水产益生菌的筛选鉴定及其对罗非鱼肠道特定微生物菌群的影响[A];中国工程院第77场工程科技论坛·2008水产科技论坛——渔业现代化与可持续发展论文集[C];2008年
2 范晶晶;单奇;尹怡;刘书贵;李丽春;郑光明;;头孢喹肟在罗非鱼体内的药代动力学[A];2016年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2016年
3 刘涛;孟顺龙;裘丽萍;陈家长;;灭多威对罗非鱼精巢组织半胱天冬氨酸蛋白酶活性的影响[A];2016年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2016年
4 张静怡;包斌;王南平;何兰;Elango Jeevithan;吴文惠;;罗非鱼胶原蛋白抗原性刺激性和植入特性的研究[A];全国第九届海洋生物技术与创新药物学术会议论文摘要集[C];2014年
5 公翠萍;朱文彬;董在杰;;不同体色红罗非鱼生长动态的观察与分析[A];2014年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2014年
6 陈兴婷;王兰梅;董在杰;;红罗非鱼体色相关基因的表达模式分析[A];2015年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2015年
7 周游;陈石;张成林;;冬季罗非鱼循环水暂养系统研究[A];2015年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2015年
8 王婷;温子健;年益莹;王玲;季晓彤;孙黎明;;罗非鱼鱼皮发酵产物的生物活性研究[A];中国食品科学技术学会第十三届年会论文摘要集[C];2016年
9 赵婷婷;刘奕;汪学杰;刘超;胡隐昌;罗建仁;;布氏罗非鱼肌肉营养成分分析和营养分析评价[A];2014年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2014年
10 王振华;宋红桥;吴凡;吴锦婷;;低温暂养环境对罗非鱼血液生化指标与排泄水平的影响[A];2015年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2015年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 薛志成;罗非鱼烂体病的防治[N];湖北科技报;2005年
2 冯维维;罗非鱼皮可治烧伤[N];中国科学报;2017年
3 记者 计思佳;加工企业收购海口区域罗非鱼有补贴[N];海南日报;2020年
4 沙森;罗非鱼有救了[N];中国科学报;2020年
5 刘甜宁 雷长宁;小小罗非鱼“游”向国际大市场[N];中国国门时报;2019年
6 记者 梁振君 特约记者 张振豪 通讯员 李宁;我省上半年出口罗非鱼制品近1.4亿美元[N];海南日报;2019年
7 本报记者 张晴丹;一条“零浪费”的鱼[N];中国科学报;2018年
8 张振豪 李宁;海口椰城上半年出口罗非鱼制品近1.4亿美元[N];中国渔业报;2019年
9 王文彬;尽早做好罗非鱼苗种越冬准备工作[N];中国渔业报;2015年
10 倪世俊;罗非鱼苗种管理技术[N];中国渔业报;2015年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘文舒;乳酸杆菌抗感染风险机制研究[D];华中农业大学;2015年
2 赵永强;罗非鱼片臭氧减菌化处理中自由基的产生及其对产品品质与安全性的影响[D];中国海洋大学;2013年
3 孟顺龙;环境雌激素灭多威对雄罗非鱼下丘脑—垂体—性腺轴和抗氧化防御系统的影响研究[D];南京农业大学;2014年
4 张锦华;猪源乳酸杆菌的筛选及其对仔猪肠道黏膜免疫影响的研究[D];南京农业大学;2011年
5 孙可一;乳酸杆菌的分离鉴定及其对炎症反应的免疫调节作用的研究[D];南京医科大学;2012年
6 陈栋;金雀异黄素对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)生长的影响及其机制研究[D];中国海洋大学;2013年
7 王洋;植物乳杆菌素PlnEF与乳酸对嗜水气单胞菌的协同抑制作用及机理研究[D];中国农业大学;2015年
8 朱大玲;嗜水气单胞菌毒力基因及基因工程疫苗[D];中国科学院研究生院(水生生物研究所);2006年
9 胡风庆;嗜水气单胞菌聚羟基脂肪酸酯(PHA)合成调控的初步研究[D];沈阳药科大学;2005年
10 肖鹏;鱼类疫苗的研究:Ⅰ:海水鱼类病原菌乳化口服疫苗的研究;Ⅱ:迟缓爱德华氏菌和嗜水气单胞菌外膜蛋白疫苗的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈亮;G罗非鱼加工厂生产过程质量管理研究[D];西南石油大学;2018年
2 赵良;高压静电场对罗非鱼片品质的影响及作用机理研究[D];上海海洋大学;2016年
3 何其;基于物性表征的冻罗非鱼片品质特性的研究[D];海南大学;2014年
4 王术娥;罗非鱼营养、挥发性成分及质构特性研究[D];华中农业大学;2010年
5 王斌;中国罗非鱼出口贸易国际竞争力研究[D];江南大学;2011年
6 孙永军;广西罗非鱼产业发展研究[D];南京农业大学;2014年
7 原雪;罗非鱼鱼鳞胶原及其低聚肽的制备及纯化[D];福建师范大学;2015年
8 饶伟民;不同大小罗非鱼对苦草和附着藻的影响及其对浅水富营养湖泊修复的意义[D];暨南大学;2014年
9 蒋丽;罗非鱼皮胶原蛋白及多肽美容护肤作用研究[D];合肥工业大学;2016年
10 陆成伟;环境因子对红罗非鱼生长及性别决定的影响研究[D];福州大学;2014年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026