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《华中农业大学》 2016年
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基于成分敲出/敲入模式辨识藜蒿叶抗白色念珠菌药效物质及抑菌功效强化措施研究

贤欢  
【摘要】:藜蒿是盛产于我国南方地区的一种特殊蔬菜资源,有研究表明其具有抗氧化、抗菌、降血压等多种功效。本课题以藜蒿叶为研究对象,对藜蒿叶水提物的抗白色念珠菌(Candida albicans)功效展开研究,优化藜蒿叶水提物的大孔树脂纯化工艺,除去多糖、蛋白质等杂质,并基于成分敲出/敲入模式辨识藜蒿叶水提物中的抗Calbicans药效成分。本课题还探究了醇沉处理及中药配伍对藜蒿叶水提物抗Calbicans功效的影响,旨在寻求有效的抗菌增效措施以强化藜蒿叶水提物对C.albicans的抑制作用,拓展其作为一种天然、安全面高效的C.albicans抗菌剂的应用前景,提高藜蒿资源的综合利用价值。主要的研究内容与结果如下:1.通过静态和动态的吸附-解吸试验,筛选出了最适于纯化藜蒿叶水提物的大孔树脂类型HPD600,并确定了最佳的纯化工艺参数:上样量为0.11 g藜蒿叶水提物/g树脂,上样浓度40 g·L-1,流速2 BV.h-1;70%乙醇溶液作为解吸溶剂,流速2.5 BV·h-1。2.以大孔树脂HPD600纯化洗脱所得不同组分为研究对象,基于成分敲出/敲入模式锁定了抗C.albicans有效组分fraction C,且抑菌实验结果显示其含量与抗Calbicans功效呈剂量依赖效应;对fraction C成分的初步解析显示fraction C中总萜含量为59.61±2.89%,质谱解析其主要成分为丹参二萜醌类和萘啶酸类化合物。3.以微量液基稀释法测定不同浓度乙醇纯化处理后的藜蒿叶水提物对C.albicans的抑制作用,包括对其菌体生长量、生物膜形成、芽管生成作用等方面的影响,实验结果表明:乙醇纯化处理可显著降低藜蒿叶水提物对Calbicans的最小抑菌浓度MIC80,90%乙醇纯化处理使MIC80由200 g·L-1降低至8 g·L-1,同时增强了其对Cfalbicans芽管生成和生物膜形成的抑制效果。4.以棋盘微量稀释法研究中药配伍对藜蒿叶水提物抗Calbicans活性的影响,结果表明:选取的18种植物药材中,薰衣草、黄芩和莪术对藜蒿叶水提物表现出了抑菌增效作用,相互作用指数小于0.5,藜蒿叶水提物的最小MIC80可达0.60 g.L-1。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:TQ465

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【参考文献】
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