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《华中农业大学》 2017年
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SERS传感器构建及其用于黄曲霉毒素B_1检测

李琴  
【摘要】:黄曲霉毒素B_1(Aflatixon B_1,AFB_1)是目前人类发现的对农产品、食品、饲料等农副产品安全危害最大的一种真菌毒素,其污染范围广,可在花生、玉米、坚果等100多种农副产品中发现。AFB_1毒性极强,易引发急性中毒,同时也具有极强的致畸致癌效果,严重危害人类和动物健康。因此开发针对AFB_1的检测技术,避免受污染农产品和食品进入市场,为食品安全提供技术保障十分必要。表面增强拉曼散射具有灵敏度高、抗水干扰、可提供指纹图谱等优点,在食品安全检测领域得到了越来越广泛的应用。本研究以AFB_1的适配体为基础,利用Au@Ag NRs和Au NPs为SERS信号探针,与磁分离技术和核酸外切酶Ⅲ的循环放大功能分别结合,设计构建了两种检测黄曲霉素B_1的SERS传感器。本研究的主要内容与创新点如下:1.设计并构建了基于适配体识别的磁分离辅助的用于快速检测AFB_1的SERS传感器。利用链霉亲和素和生物素相互作用,在羧基化磁珠上修饰了生物素标记的AFB_1适配体DNA,作为检测探针;合成信号分子(4-MBA)内嵌式金银核壳纳米棒,并修饰巯基化互补DNA,组装成SERS探针。通过DNA碱基互补,将金银核壳纳米棒和磁珠组装构建为AFB_1检测传感器。待测物AFB_1与DNA的竞争反应,使磁珠和金银核壳纳米棒分离,SERS信号减弱。通过SERS强度的变化达到快速检测AFB_1的目的。该传感器的线性范围为1 pg/mL~1000 pg/mL,检出限为0.4 pg/mL。2.设计制备了超灵敏检测AFB_1的SERS传感器。将修饰有信号分子(4-NTP)和信号DNA的纳米金作为SERS探针,修饰有发卡DNA的镀金载玻片作为捕获基底。待测物AFB_1引发核酸外切酶Ⅲ剪切发卡DNA,暴露出大量的捕获位点,使SERS探针的捕获量增加,导致信号放大,建立了一种超灵敏检测AFB_1的SERS检测方法。通过检测基底上的DNA短链捕获的SERS探针拉曼信号的变化,确定AFB_1浓度。该传感器的线性范围为1×10-6 ng/mL~1 ng/mL,检出限为6×10~(-7) ng/mL。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:O657.37;TS207.4

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【参考文献】
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