收藏本站
《华中农业大学》 2017年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

改造狂犬病毒探索小鼠下丘脑摄食相关核团的神经环路

曹云兹  
【摘要】:探究动物的摄食行为,不论是对畜牧业生产效益的提升,还是对人类代谢相关疾病的研究都有重大的科研价值。以往的研究表明,中枢神经系统在动物摄食行为产生的过程中发挥了重要的调控作用,而下丘脑是中枢神经系统中调节动物代谢的关键部位。本课题的目的旨在通过改造狂犬病毒,将其作为神经环路示踪工具,对下丘脑中摄食相关核团的神经环路进行探究。本实验主要分为三个部分:第一,利用缺失病毒毒力基因G蛋白、带有荧光蛋白的狂犬病毒,针对下丘脑区域的五个摄食相关核团——下丘脑室旁核、下丘脑背内侧核、下丘脑腹内侧核、弓状核、下丘脑外侧区,在全脑范围内示踪对其有轴突投射的神经元。实验结果显示,主要有额眶部皮层、外侧隔核、视前内侧区、视前内侧核、终纹床核、杏仁核、腹侧被盖区、蓝斑、臂旁核、水管周灰质等核团将其轴突投射到了下丘脑这五个核团;第二,构建Env A/TVA病毒示踪体系,实现狂犬病毒“定位、跨突触可受调控”的感染模式,最终该示踪体系构建成功并在鼠脑上得到验证;第三,为了构建含有水泡性口炎病毒和狂犬病毒嵌合G蛋白的B7B-VSV SAD G细胞系,从而实现狂犬病毒对注射区域神经元的胞体集中且高效的感染模式。我们利用CRISPR/Cas9技术手段,改造B7GG细胞——将该细胞系基因组中的G蛋白变为嵌合G蛋白,并将蓝色荧光蛋白替换掉绿色荧光蛋白,最终利用潮霉素压力筛选和流式细胞仪对细胞系进行了纯化,后期可通过进一步扩大培养完成细胞系的建立。对动物摄食行为有调控作用的神经系统错综复杂,利用灵活高效的嗜神经性病毒作为示踪工具来揭示脑功能性神经环路的结构和联系一直以来是神经科学领域研究的热点,也是解决机体代谢异常相关疾病的有效途径之一。对于本实验中揭示出的与下丘脑有投射关系的神经位点有望对之后摄食环路的探究起到一定的启示作用;同时,本实验中构建的狂犬病毒示踪工具的应用为之后神经环路的探究和新型示踪工具的开发奠定了一定的实验基础。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S852.65

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 王凌,王百忍,鞠躬;与免疫应答相关的中枢神经系统结构[J];神经解剖学杂志;2000年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 谢小玲,彭旭,袁鹰,伍大华,罗建清;抽动秽语综合征患者C_3的变化及其临床意义[J];临床神经病学杂志;2004年03期
2 任健,欧可群,陈文玉,王蕾,马玉琼;免疫增强状态下大鼠淋巴结中ACTH免疫阳性细胞数量变化与免疫功能的相关关系[J];四川解剖学杂志;2002年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴学海,刘红煜;培养条件对狂犬病毒宿主细胞质量的影响[J];生物技术;2000年01期
2 刘晔;张守峰;张菲;赵敬慧;扈荣良;;我国首次从吉林省境内蝙蝠体内分离获得狂犬病毒[J];中国兽医学报;2012年12期
3 梁名奕;狂犬病毒在慢性感染细胞培养中对宿主细胞的影响[J];微生物学免疫学译刊;1980年03期
4 任永礼;狂犬病研究进展[J];广东卫生防疫资料;1986年04期
5 Maria Tollis;B.Dietzschold;C.B.Volia;H.Koprowski;张德礼;;猴接种狂犬病毒核糖核蛋白诱生抗狂犬病保护性免疫[J];北京实验动物科学;1992年01期
6 张世珍,梁米芳,董关木,郑海法,侯云德;人源抗狂犬病毒单克隆抗体Fab段基因的获得和表达[J];病毒学报;2001年01期
7 黄薇,徐葛林,胡巧玲,李萍,王继鳞,严家新,吴杰,祝玉桃,阮力,朱家鸿;双表达狂犬病毒基因的非复制型痘苗病毒改建及免疫效果[J];中国病毒学;2004年04期
8 熊成龙;邵中军;魏纪东;居丽雯;周联娣;姜庆五;;河南省8株狂犬病毒磷蛋白基质蛋白基因分析[J];中国人兽共患病学报;2008年09期
9 贺福合;;浅谈狂犬病毒的分子生物学研究进展[J];中国畜禽种业;2008年19期
10 刘闻一;郑钧丰;覃敏;黄勇;王意银;鲍晓伟;李乙江;范泉水;张富强;邱薇;江禹;涂长春;李作生;;中国蝙蝠携带狂犬病毒研究进展[J];现代生物医学进展;2009年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘闻一;郑钧丰;覃敏;黄勇;王意银;鲍晓伟;李乙江;范泉水;张富强;邱薇;江禹;涂长春;李作生;;中国蝙蝠携带狂犬病毒研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集(上册)[C];2009年
2 郑钧丰;刘亮;王意银;鲍晓伟;李乙江;岳铃;王志慧;黄微;范泉水;张富强;邱薇;江禹;涂长春;李作生;;蝙蝠携带狂犬病毒研究现状[A];动物检疫学分会2010年学术年会论文集[C];2010年
3 洪英;朱志雄;;浅谈狂犬病[A];福建省科协第四届学术年会卫星会议“动物疫病防治与人类健康”学术年会论文集[C];2004年
4 夏咸柱;;加强动物狂犬病防控研究,从源头上防控人类狂犬病[A];全国兽医外科学第13次学术研讨会、小动物医学第1次学术研讨会暨奶牛疾病第3次学术讨论会论文集[C];2006年
5 张永振;;中国狂犬病毒的遗传多样性及其进化[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
6 张海林;唐青;陶晓燕;王晓光;张云智;杨卫红;米竹青;王静林;章域震;冯云;郑维斌;鲁国勇;李胜国;;云南省保山市人间狂犬病的调查及病毒分子生物学特征分析[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
7 李积林;;加强犬只管理,有效防止狂犬病发生[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(下册)[C];2009年
8 姚文荣;张永振;熊成龙;;浙江省一例狂犬病患者的核酸检测分析[A];全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2006年
9 张永振;;中国狂犬病毒的特征及其流行特点[A];中华医学会热带病与寄生虫学分会机会性感染学术研讨会论文汇编[C];2007年
10 张春斐;林荷芹;张红枫;;34例狂犬病的临床特点与防护对策[A];全国传染病护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 艾琳工作室策划;笑笑得了狂犬病[N];中国教育资讯报;2002年
2 郑灵巧;狂犬病防控要找出我们的差距[N];健康报;2007年
3 记者 李学华;南非发明廉价狂犬病治疗药物[N];科技日报;2009年
4 祖述宪 安徽医科大学流行病学教授 采访 本报记者 李鹏;狂犬病的防疫误区[N];北京科技报;2010年
5 编译 王金元;美国少女成为首位狂犬病治愈者[N];北京科技报;2005年
6 防犬病;狂犬病及其防治[N];广西日报;2000年
7 世界卫生组织供稿 海萃译;狂犬病威胁少年儿童[N];健康报;2001年
8 ;被宠物咬伤必须接种狂犬病疫[N];辽宁日报;2004年
9 关春苓;远离狂犬病 重点在预防[N];消费日报;2003年
10 本报记者 王蔚佳 通讯员 黄显斌;科学防治:狂犬病不可怕[N];中国消费者报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨洋;野毒株狂犬病毒逃避树突状细胞识别的机制[D];华中农业大学;2014年
2 姚宏武;狂犬病与埃博拉病毒病的传播动态及其病原的系统发育地理学研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2016年
3 于礼;人源抗病毒基因工程抗体功能表位研究[D];中国疾病预防控制中心;2012年
4 韩小虎;狂犬病毒单克隆抗体的研制及应用研究[D];吉林大学;2007年
5 柯雪梅;蝙蝠携带狂犬病毒检测方法的建立及在中国南方的调查研究[D];南方医科大学;2009年
6 殷相平;动物狂犬病基因工程亚单位疫苗研究[D];甘肃农业大学;2011年
7 熊成龙;中国狂犬病毒的遗传学特征[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年
8 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
9 高明华;狂犬病毒G,N基因的表达、单克隆抗体制备与胶体金免疫层析检测试纸的研制[D];吉林大学;2007年
10 张冉;狂犬病毒先导RNA及其宿主互作蛋白的功能研究[D];华中农业大学;2017年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 曹云兹;改造狂犬病毒探索小鼠下丘脑摄食相关核团的神经环路[D];华中农业大学;2017年
2 刘钰蓉;VSV-SAD嵌合糖蛋白狂犬假病毒及其可调控辅助腺相关病毒体系的构建[D];华中农业大学;2015年
3 于桂梅;表达狂犬病毒G蛋白的重组新城疫病毒接种牛羊的免疫原性研究[D];中国农业科学院;2015年
4 刘传刚;狂犬病病毒基因工程疫苗制备及基因治疗载体的改造[D];华中农业大学;2016年
5 许永青;狂犬病毒糖蛋白DNA疫苗的研究[D];吉林大学;2017年
6 于金宁;中国狂犬病毒时空动力学及其与狂犬病疫情的关系[D];山东大学;2010年
7 唐婕;狂犬病毒的电镜检测及其糖蛋白基因的克隆与序列分析[D];湖南农业大学;2007年
8 王铁成;狂犬病毒胶体金检测试纸的制备与初步应用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2009年
9 薛琳;狂犬病毒荧光抗体的制备及初步应用[D];吉林大学;2007年
10 罗世民;狂犬病弱毒疫苗Flury-lep株生物学特性检测与分析[D];湖南农业大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026