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《华中农业大学》 2003年
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重组苏云金芽胞杆菌WG-001环境安全性分析

舒正玉  
【摘要】: 本论文主要研究河北省保定市大田种植的棉花叶面喷洒遗传改良苏云金芽胞杆菌WG-001制剂后,工程菌WG-001在环境中的定殖、存活、扩散、对土著微生物的影响、杀虫晶体蛋白基因crylAa和crylAc在环境中的水平转移。结果如下: 1.工程菌WG-001在环境中的扩散 棉花叶面喷洒工程菌WG-001制剂时,置于棉田周围地面、用于收集飘落物的平板检测结果表明,工程菌WG-001顺风方向的最大传播距离为15m,逆风方向的最大传播距离为5m。喷药后,从棉田周围采集的叶样和表层土样中未检测到工程菌WG-001。 2.工程菌WG-001在环境中的定殖 棉田试验中,仅能从叶样中检测出工程菌WG-001,而且喷洒35天后。叶面就检测不出该工程菌。在盆栽试验中,工程菌171/304-gfp进入到土壤中后,其群落在开始7天内,由1480 cfu/g干土样迅速下降到450 cfu/g干土样,然后基本稳定在500 cfu/g干土样的水平。 3.工程菌WG-001对土著微生物的影响 从7月2日到10月14日整个试验期间,土著细菌总菌落数和土著真菌总菌落数没有明显变化。土著细菌总菌落数在4.0×10~6cfu/g土样上下波动,土著真菌总菌落数在1.2×10~5 cfu/g土样和2.7×10~5 cfu/g土样之间波动。但是土著细菌菌群1(0~24小时长出的细菌菌落)在整个试期间一直下降,而土著真菌菌群1(0~48小时长出的真菌菌落)却一直上升,变化幅度未超过一个数量级。 4.工程菌WG-001携带的crylAa和crylAc基因的水平转移 在对细菌263个菌落、真菌138个菌落和41份棉花叶片样品的检测中,仅检测出3个细菌菌落携带有crylAa和crylAc基因。经进一步验证,这3个细菌菌落均为工程菌WG-001菌落。 5.工程菌WG-001对鱼和哺乳动物的急性毒性试验 工程菌WG-001对昆明小鼠灌胃毒性试验结果表明,最大致死剂量超过15000mg/kg;对大耳白兔的皮肤接触毒性试验(2000mg/kg)和眼刺激毒性试验结果均表明无任何毒副作用。对鱼的急性毒性实验表明,水体中高浓度(0.5‰)的工程菌WG-001对锦鲤的呼吸系统有一定的副作用,同对照相比:试验鱼的鳃片颜色变暗,呼吸频率降低,每毫升血液中的红细胞数升高。 上述试验结果表明,在正常使用情况下,棉田叶面喷洒苏云金芽胞杆菌工程菌WG-001后,没有发现棉田生态系统发生明显变化。
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