收藏本站
《华中农业大学》 2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

红曲霉(Monascus spp)莫呐可啉K(Monacol in K)高产菌株的诱变选育及其发酵条件研究

胡晓清  
【摘要】: 从红曲样品中分离筛选得到一株Monacolin K产率较高(高效液相色谱法,HPLC)而桔霉素产率为0.11ng/g(酶联免疫吸附法,ELISA)的红曲霉菌株,编号为M12。以之为出发菌株,通过诱变筛选,获得一株Monacolin K产率有明显提高而桔霉素产率仅为0.13ng/g(ELISA)的突变株,编号为M12-69。对该突变株的液态和固态发酵条件进行初步优化研究。具体包括以下五个方面的内容: 第一,从红曲样品分离纯化获得红曲霉菌株25株,以这些菌株和从中科院购得4株红曲霉菌株,共29株作为菌种,制备得29个(固态)红曲样品。 第二,以上述29个红曲样品为实验材料,对红曲中桔霉素的(单向)薄层层析(STLC)条件进行了研究。结果显示,以甲苯:乙酸乙酯:甲酸(6:3:1)为展开剂,桔霉素的分离效果较好。按照该方法,对上述29个红曲样品中的桔霉素进行了分析测定,筛选得到6个桔霉素含量低于0.2μg/g的红曲样品及其相应菌株。 以上述6个低桔霉素含量的红曲样品为材料,对Monacolin K的双向薄层层析(DTLC)条件进行了研究。结果显示,以正己烷:乙酸乙酯:无水乙醚:甲酸(20:1:5:0.5)为第一展开剂,正己烷:氯仿:无水乙醚(30:1:5)为第二展开剂,Monacolin K的分离效果较好。以该方法对6个样品中的Monacolin K进行了分析测定,得到1个Monacolin K含量最高为225μg/g(DTLC)的红曲样品及其相应菌株。 为了更准确地判断该红曲样品桔霉素和Monacolin K含量,采用ELISA对桔霉素进行了分析测定,结果显示,该样品中桔霉素含量仅为0.11ng/g。同时,采用HPLC对Monacolin K进行了分析测定,Monacolin K含量为213μg/g。将该样品对应的菌株编号为M12。 通过上述研究,获得1株固态发酵产物Monacolin K产率为213μg/g(HPLC),桔霉素含量为0.11ng/g(ELISA)的红曲霉菌株M12。 第三,以M12为诱变出发菌株,采用紫外线、~(60)Co—γ射线、硫酸二乙酯 为诱变剂对其进行处理。突变株的桔霉素产率采用STLC分析,MonacolinK 采用DTLC分析,最后获得一株桔霉素产率低且MonacofinK产率有明显提高的突 变株M12一69。以M12一69为菌种制备(固态)红曲,其MonacolinK产率达2143协 9/9(HPLC),较出发菌株M12提高906.10%,而桔霉素产率仅为0.13 ng/g (ELISA),和M12相比,变化不大。 第四,根据Hawkswo曲和Pitt关于红曲霉的分类方法,对M12及M 12一69的培 养物进行了形态观察及分类鉴定。观察发现,M12一69与M12相比有较大的形态差别, 但二者均为丛毛红曲菌(物nascusPl’lo拟5 Sato)。 第五,对红曲霉突变菌株M12一69产MonacofinK的液态和固态发酵条件进行了 初步优化研究。 首先,研究了碳源、氮源、起始pH值、培养温度及时间等因素对M12一69液态发 酵的影响。结果显示,当培养基配方为:4%葡萄糖,0.4%谷氨酸钠,0.3%蛋白膝, 0.3%硝酸按,0.5%磷酸二氢钾,豆芽汁配制,起始pH值为5;培养条件为:25℃, 15or/min,摇床培养12天时,MonacolinK产率达275“g/而(D几C),桔霉素产率 为0.18n留ml(ELIsA)。在上述培养基和培养条件下,以14L模拟发酵罐进行扩大培 养,接种量为10%(v/v),通气量为6L/min,转速为200r/min,25℃,培养7天时, MonacolinK产率达280协9/1111(DTLC),此时桔霉素产率为o.20ng‘ml(ELISA)。 然后,研究了大米吸水量、培养温度及时间等因素对M12一69固态发酵的影响。 当固态发酵条件为:大米1009,鼓皮19,灭菌,趁热打散冷却后,添加20ml液体培 养基,摇匀,接种,25oC,培养18天时,MonaeolinK产率达2400;9/9(DTLC), 桔霉素产率仅为。.13n留g(ELISA),与国内外报道的MonacolinK高产菌株相比,以 M12一69制备的固态红曲中MonacolinK含量与报道的最高水平持平:
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:Q933

手机知网App
【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 邵彦春;红曲霉产色素相关基因的克隆及功能研究[D];华中农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 丁月娣;红曲霉产桔霉素相关基因的初步研究[D];华中农业大学;2006年
2 汪全伟;振荡培养法生产红曲椰纤果的研究[D];华南热带农业大学;2007年
3 张良;高产Monacolin K红曲菌的诱变选育及其固态发酵条件的优化[D];南昌大学;2010年
4 吴学倩;高产MonacolinK功能红曲的原生质体诱变与融合选育及其发酵条件的优化[D];武汉工业学院;2012年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 苏学惠;新型降血脂药物——羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂[J];国外医药(抗生素分册);1994年04期
2 洪智勇,毛宁;红曲霉降胆固醇有效成分的研究[J];海峡药学;2002年01期
3 丁婷林;刘治林;;洛伐他汀胶囊含量测定方法比较[J];黑龙江医药;2000年04期
4 莫湘涛,张梅芬,陈福星;水溶性红曲色素研究[J];湖南师范大学自然科学学报;1998年02期
5 王雅芬,傅月华;红曲霉的有效生理活性物质及应用[J];杭州科技;2000年05期
6 郭东川;吴诚华;李钟庆;;红曲色素的两种新结构[J];真菌学报;1993年01期
7 刘永华,徐文生,万绍琥,夏云梯;国内外红曲研究的现状与进展[J];酿酒科技;1997年04期
8 宫慧梅,赵树欣,邹海晏;用双向薄层层析检测红曲中的桔霉素[J];酿酒科技;2002年02期
9 许赣荣;浅谈红曲霉桔霉素[J];酿酒科技;1999年03期
10 常华,王元太;红曲霉的生理活性物质及其应用前景的分析[J];山西食品工业;2001年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈冠敏;林蔚;林春芳;黄宗锈;郑丽红;黄佳宁;陈秀锦;;红曲黄色素亚慢性毒性研究[J];癌变.畸变.突变;2009年04期
2 赵春海;;提高红曲霉色素产量的研究[J];安徽农业科学;2007年04期
3 张红梅;靳赛;伍家发;牛明福;龚明贵;;红曲霉固态发酵控制条件对色素及桔霉素生产的影响[J];安徽农业科学;2008年17期
4 姚菁华;王珏;肖雷;;红曲霉中降脂活性物质的研究进展[J];安徽农业科学;2008年24期
5 李燕;杨美华;欧阳臻;;桔青霉素分析方法研究进展[J];安徽农业科学;2010年12期
6 吕凌;王辉;李珠婧;王贺;柏俊;;洛汀烟酸缓释片中洛伐他汀溶出度的测定[J];安徽医药;2007年09期
7 班昭;王昌禄;陈勉华;王玉荣;郑传宝;刘春静;杨华;李风娟;;红曲霉发酵液中桔霉素快速检测方法的优化[J];氨基酸和生物资源;2010年02期
8 文镜,刘迪,金宗濂;洛伐他汀检测方法研究进展[J];北京联合大学学报(自然科学版);2003年03期
9 刘壮;张志红;何晓囡;刘雪松;陆丽君;;洛伐他丁的电化学行为研究[J];北京石油化工学院学报;2010年04期
10 李浩然,冯雅丽,伍军;降脂红曲研究进展[J];北京农学院学报;2001年03期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 孙志明;赵小俊;史建君;徐步进;;辐照灭菌对红曲粉品质的影响[A];四川成都辐射研究与辐射工艺研讨会论文集[C];2005年
2 黄燕;邹自杰;;红曲椰果发酵条件的初步研究[A];2005热带亚热带微生物资源的遗传多样性与基因发掘利用研讨会论文集[C];2005年
3 丘振宇;王亚琴;许喜林;;红曲霉的特点及药用研究[A];2006年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2006年
4 盖栋梁;邹晓;刘爱英;赵杰宏;;紫红曲菌的诱变育种研究[A];中国菌物学会第二届青年菌物学术讨论会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐茂田;有机化合物新型催化波—平行催化氢波研究[D];西北大学;2004年
2 陈运中;红曲活性成分的结构与功能评价[D];华中农业大学;2004年
3 许赣荣;红曲桔霉素的检测及发酵控制技术[D];江南大学;2005年
4 连喜军;红曲色素光稳定性的研究[D];天津科技大学;2005年
5 黄宏南;福建红曲的活性物质及其医疗保健效应[D];福建农林大学;2006年
6 刘龙涛;降脂红曲微粉抗动脉粥样硬化的临床研究及对载脂蛋白E基因敲除小鼠As模型干预研究[D];山东中医药大学;2006年
7 付桂明;橙色红曲菌pksCT gene的敲除和长同源臂置换型打靶载体的构建[D];南昌大学;2007年
8 张国刚;水莲皂苷抗动脉粥样研究[D];中南大学;2006年
9 邵彦春;红曲霉产色素相关基因的克隆及功能研究[D];华中农业大学;2007年
10 魏培莲;土曲霉固态发酵产洛伐他汀的关键技术和新工艺探索[D];浙江大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黄寅;胆固醇氧化酶高产菌株的选育及酶学性质初步研究[D];安徽工程大学;2010年
2 刘辉;红曲霉发酵提高γ-氨基丁酸含量的研究[D];安徽工程大学;2010年
3 李永丽;高产Monacolin K功能红曲的诱变筛选及应用[D];武汉工业学院;2010年
4 王剑平;云南红曲中主要活性成分的研究[D];昆明理工大学;2010年
5 吴晶晶;红曲霉(Monascus .spp)产生川芎嗪的发酵工艺条件研究[D];浙江大学;2011年
6 陈路清;降胆固醇双歧杆菌的体外筛选[D];浙江大学;2010年
7 常振国;瑞香狼毒根际疣孢青霉菌YL-52的液体发酵培养及代谢产物研究[D];西北农林科技大学;2010年
8 于瑞莉;罗氏乳杆菌JC-1无细胞上清培养液降胆固醇能力的研究[D];江南大学;2011年
9 李志强;一株红曲霉的三类聚酮体代谢产物研究[D];西华大学;2011年
10 李颖;复合菌种发酵生产低胆固醇鹅肉香肠的研究[D];黑龙江八一农垦大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 危勤涛;张庆庆;刘辉;黄鹏;;红曲霉液态发酵产洛伐他汀条件的研究[J];安徽工程科技学院学报(自然科学版);2008年04期
2 连喜军,王昌禄,顾晓波,李滢;植物油、青霉素对红曲霉深层发酵红曲红色素色价的影响[J];氨基酸和生物资源;2003年02期
3 梁剑光;朱玲;穆陆;徐正军;;氨基酸对于Monascus ruber生物合成Monacolin K影响的研究[J];氨基酸和生物资源;2006年04期
4 于桂香;于咏梅;张中华;俞守能;刘建萍;;响应面法优化超声提取柚皮总黄酮工艺的研究[J];北方园艺;2011年08期
5 沈平,伍军,李浩然,冯雅丽;红曲固态发酵生产洛伐他汀的实验条件优化[J];北京农学院学报;2005年03期
6 宓鹤鸣,邢旺兴,程荣珍,贺祥,吴玉田;随机扩增多态性DNA技术在中药红曲基原菌系统分类中的应用[J];第二军医大学学报;2000年10期
7 刘爱英,孙伟,梁宗琦,谭艾娟,邹晓;不同米质发酵生产红曲对莫纳可林K含量的影响[J];贵州农业科学;2003年05期
8 刘爱英;孙嘉龙;邹晓;梁宗琦;;提高红曲霉发酵产品Monacolin K含量的研究[J];贵州农业科学;2007年06期
9 高蓝;;Monascus ruber 5031洛伐他汀合成酶基因的PCR分析[J];广东药学院学报;2006年01期
10 李桂杭;李浩明;;HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量[J];广东药学院学报;2008年03期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 许赣荣;红曲桔霉素的检测及发酵控制技术[D];江南大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 路秀玲;红曲霉固态发酵生产生理活性物质Monacolin K的研究[D];天津轻工业学院;2000年
2 洪智勇;红曲霉产降胆固醇物质——洛伐他汀的研究[D];福建师范大学;2002年
3 陈云;红曲霉固态发酵及形态解析[D];天津科技大学;2003年
4 林文;洛伐他汀高产融合子的筛选及其发酵条件的优化[D];中国农业大学;2003年
5 贾波;红曲霉深层发酵生产Monacolin K 的研究[D];浙江工业大学;2003年
6 孙佰申;红曲霉发酵及某些生理活性物质的研究[D];浙江工业大学;2004年
7 付海平;产Monacolin K红曲霉的筛选及其发酵条件的研究[D];湖南农业大学;2004年
8 汤卫华;红曲霉发酵及其生长趋向性的初步研究[D];天津科技大学;2004年
9 戴德慧;高产降脂活性物质的红曲霉选育及应用[D];西北大学;2004年
10 张继东;木醋杆菌发酵产细菌纤维素的研究[D];南京理工大学;2004年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 杨欢欢;胡中泽;;红曲菌的复合诱变及其固态发酵条件的优化[J];食品科学;2012年11期
2 余敏华;龙映均;刘四新;李从发;;振荡条件对发酵生产颗粒状细菌纤维素的影响[J];中国酿造;2012年06期
3 李利;陈莎;陈福生;高梦祥;;红曲菌次生代谢产物生物合成途径及相关基因的研究进展[J];微生物学通报;2013年02期
中国硕士学位论文全文数据库 前7条
1 赵秀芹;福建色素红曲去桔霉素毒素的菌种改造[D];福建师范大学;2011年
2 庄木坤;赤霉素高产菌株改造与发酵研究[D];华中农业大学;2007年
3 徐驰;农杆菌介导的红曲菌M-7转化库中部分突变子的特性研究[D];华中农业大学;2008年
4 张俊娜;果汁培养基生产细菌纤维素研究[D];西北农林科技大学;2012年
5 袁国兴;红曲米中蛋白酶、酯化酶的活性研究[D];山东轻工业学院;2012年
6 蔡琪敏;红色红曲霉T-DNA插入突变库的构建及GABA代谢相关基因的克隆[D];浙江师范大学;2012年
7 杨欢欢;高产Monacolin K红曲菌株的复合诱变及固态发酵法研究[D];武汉工业学院;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王春娜;HPLC法检测功能红曲中的洛伐他汀[J];北京农学院学报;2000年02期
2 张文芳;蒋光正;李薇;刘若男;;红曲霉色素的提取[J];东北农学院学报;1990年01期
3 苏学惠;新型降血脂药物——羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂[J];国外医药(抗生素分册);1994年04期
4 高嘉安,郭东,陈淑杰,王德辉;红曲霉菌生理活性物质MonacolinK的检测[J];吉林农业大学学报;1996年04期
5 高嘉安,郭东,王德辉,陈淑杰;产MonacolinK红曲霉菌的筛选及发酵条件的研究[J];吉林农业大学学报;1997年03期
6 郭东川;吴诚华;李钟庆;;红曲色素的两种新结构[J];真菌学报;1993年01期
7 丁前胜,郭永红;红曲珍珠保健酒的研制[J];酿酒科技;1994年06期
8 许赣荣,傅金泉;红曲产品在欧洲的合法地位、菌种分类及有害物质桔霉素——当今欧洲红曲生产及应用透视[J];酿酒科技;1998年06期
9 许赣荣;浅谈红曲霉桔霉素[J];酿酒科技;1999年03期
10 马美荣,王正祥,诸葛健;红曲有效生理活性物质的研究现状与进展[J];酿酒科技;1999年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赖卫华 ,许杨 ,熊勇华 ,龚春来 ,黄秋阳;红曲霉培养过程中桔霉素积累规律的初步研究[J];食品工业科技;2003年07期
2 邹宇,侯红漫;红曲霉抑菌活性物质与桔霉素的研究进展[J];食品研究与开发;2005年01期
3 班昭;王昌禄;陈勉华;王玉荣;郑传宝;刘春静;杨华;李风娟;;红曲霉发酵液中桔霉素快速检测方法的优化[J];氨基酸和生物资源;2010年02期
4 黄祖新,林应椿,郑广乐,林辉煌;HPLC法测定福建红曲中的桔霉素[J];福建师范大学学报(自然科学版);2003年04期
5 黄谚谚,毛宁,陈松生;红曲霉发酵产物抗疲劳作用的研究[J];食品科学;1998年09期
6 丁月娣;邵彦春;许一平;陈福生;;红曲霉T-DNA插入转化库中桔霉素突变子的筛选[J];微生物学通报;2006年04期
7 洪智勇,毛宁;红曲霉降胆固醇有效成分的研究[J];中国调味品;2002年06期
8 王雅芬,袁康培;低产桔霉素红曲霉菌种的选育研究[J];食品科学;2003年08期
9 汤斌,张庆庆;红曲霉液体培养对产脂肪酶条件的研究[J];安徽机电学院学报;1997年04期
10 王昌禄;张晓伟;陈勉华;周庆礼;王莹;蒿露;傅志良;班昭;;红光对红曲霉生长及次级代谢产物的影响[J];天然产物研究与开发;2009年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨成龙;杨晓君;陆东和;;几种维生素对红曲霉S液态培养的影响[A];海峡两岸第十届菌物学暨第三届食药用菌学术研讨会论文摘要集[C];2011年
2 毛宁;洪智勇;;红曲霉降胆固醇有效成分的应用及研究[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
3 杨晓君;杨成龙;何志刚;陆东和;;碳源与氮源影响红曲霉S产色素的研究[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
4 王琪;王佳丽;韩建荣;赵景龙;;汾酒大曲中红曲霉的分离鉴定和特性研究[A];中国菌物学会第五届会员代表大会暨2011年学术年会论文摘要集[C];2011年
5 丘振宇;王亚琴;许喜林;;红曲霉的特点及药用研究[A];2006年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2006年
6 徐冬云;江仲文;;红曲霉谷氨酸脱羧酶的性质研究[A];2007年学术年会论文集[C];2007年
7 郑允权;翁娜;石贤爱;孟春;郭养浩;;红曲色素固体发酵工艺的研究[A];第三届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(上)[C];2006年
8 邹晓;孙嘉龙;赵杰宏;刘爱英;胡海燕;;茭白黑粉菌对紫红曲霉部分代谢产物的影响[A];第八届海峡两岸菌物学学术研讨会论文集[C];2007年
9 杨恩超;杨涛;李国友;刘光烨;;红曲霉不同小麦固态发酵酶系和活性产物形成比较研究[A];“环境与健康”学术研讨会论文摘要集[C];2007年
10 谢宝贵;唐航鹰;江玉姬;;红曲色素高产菌株的筛选[A];中国菌物学会第三届会员代表大会暨全国第六届菌物学学术讨论会论文集[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者何德功;关节炎与基因有关[N];人民日报;2003年
2 辛欣;PAD14基因与关节炎有关[N];医药经济报;2003年
3 中国发酵工业协会特种功能发酵制品专业委员会 孙玲;特种功能生物制品发展势头正旺[N];中国食品报;2008年
4 ;红曲色素及其在肉制品中的应用[N];中国畜牧兽医报;2007年
5 本报记者 余知都;天然食品添加剂 让食品好看又安全[N];中国消费者报;2003年
6 孙冲;双沟集团“科技兴企”[N];新华日报;2000年
7 张清;降脂保肝护肝专家研讨会举行[N];科技日报;2007年
8 王强;红曲色素在肉制品中应用状况分析[N];中国食品质量报;2007年
9 姚朝磊 徐兴波;巨野县科技创新渗透经济领域[N];菏泽日报;2006年
10 李聂;浙江酒业新技术填补国际空白[N];华夏酒报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 周礼红;红曲霉遗传转化系统及桔霉素、Monacolin K生物合成相关PKS基因的克隆与功能鉴定[D];江南大学;2005年
2 陈运中;红曲活性成分的结构与功能评价[D];华中农业大学;2004年
3 连喜军;红曲色素光稳定性的研究[D];天津科技大学;2005年
4 刘红椿;桔霉素三聚体Tricitrinol B的抗肿瘤活性及机制研究[D];中国海洋大学;2009年
5 许赣荣;红曲桔霉素的检测及发酵控制技术[D];江南大学;2005年
6 魏培莲;土曲霉固态发酵产洛伐他汀的关键技术和新工艺探索[D];浙江大学;2007年
7 付桂明;橙色红曲菌pksCT gene的敲除和长同源臂置换型打靶载体的构建[D];南昌大学;2007年
8 杜林;五株真菌次级代谢产物的结构和生物活性研究[D];中国海洋大学;2009年
9 邵彦春;红曲霉产色素相关基因的克隆及功能研究[D];华中农业大学;2007年
10 黄志兵;1、红曲菌两种新的荧光代谢产物的研究 2、脱氧雪腐镰刀菌烯醇胶体金免疫层析试纸条的研制[D];南昌大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 胡晓清;红曲霉(Monascus spp)莫呐可啉K(Monacol in K)高产菌株的诱变选育及其发酵条件研究[D];华中农业大学;2003年
2 付海平;产Monacolin K红曲霉的筛选及其发酵条件的研究[D];湖南农业大学;2004年
3 魏培莲;降脂红曲霉的研究[D];浙江工业大学;2001年
4 贾波;红曲霉深层发酵生产Monacolin K 的研究[D];浙江工业大学;2003年
5 汤卫华;红曲霉发酵及其生长趋向性的初步研究[D];天津科技大学;2004年
6 赵秀芹;福建色素红曲去桔霉素毒素的菌种改造[D];福建师范大学;2011年
7 路秀玲;红曲霉固态发酵生产生理活性物质Monacolin K的研究[D];天津轻工业学院;2000年
8 许建生;含Monacolin K的黄酒的研制[D];南京农业大学;2004年
9 靳赛;红曲米中桔霉素的测定及红曲发酵工艺研究[D];河南农业大学;2005年
10 贾万利;灵芝与红曲霉的高密度发酵及开发应用研究[D];山西大学;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026