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《华中农业大学》 2004年
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1.中国株CN54HIV-1Pol P66/P51在大肠杆菌中的表达与纯化  2.鼠IL-12和IL-23作为基因佐剂与HIV-1 DNA疫苗共免疫研究

瞿小旺  
【摘要】:由人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)感染所引起的艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome,AIDS)对人类健康构成了严重的威胁,研究一种快速有效的适合国内HIV病毒感染的检测手段,尤为重要。 HIV-1 pol基因主要编码P66,P51。HIV-1逆转录酶(RT)分子由2个亚基组成(5.1×10~4kd和6.6×10~4kd),RT是由pol基因编码以一种多蛋白的形式表达,通常在感染细胞中微量存在。在病毒中,HIV-1 RT以两相关多肽p66和p51亚单位二聚体出现,分子比例为1∶1。P51亚单位是p66亚单位C端裂解而来。p66亚单位由两催化活性结构域,聚合酶,RNase H区域组成。在异源二聚体HIV-1 RT中p51仅仅包括聚合酶结构域,不具有催化活性。 由于HIV的高度变异性,HIV pol基因表达产物诱导的广泛交叉的细胞免疫反应对于研制预防和治疗性HIV疫苗都具有十分重要的意义,pol基因成为越来越多的HIV疫苗的重要组分,定量检测Pol抗原特异的细胞和体液免疫反应对于评价HIV多价疫苗免疫原性十分重要。此外,Pol特异性的抗体是确认HIV感染的重要指标。因此,制备高纯度的Pol抗原对于HIV多价疫苗的发展和HIV感染的都是十分必要的。本研究成功地利用大肠杆菌表达系统对HIV中国株CN54 Pol P66和P51基因进行了非融合表达,以CN54 HIV全基因组克隆为模板扩增pol基因p66和p51,再构建到原核带T7启动子的高效表达载体pTHioHisA中,IPTG诱导表达,利用离子交换与凝胶过滤层析对重组抗原蛋白进行纯化,并对其免疫学性质进行了研究。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R346

【共引文献】
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