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《华中农业大学》 2004年
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神农霉素Ⅱ号组分高产菌株育种与发酵工艺研究

裴朝玉  
【摘要】:神农霉素产生菌是吸水链霉菌应城变种(Streptomyces hygroscopicus var.yingchengensis Yan et Ruan.n.var)5102菌株的一个突变株。神农霉素是一种抗植物真菌病害的新农用抗生素。 本文对神农霉素Ⅱ号组分进行了化学定量方法的研究。结果表明用HPLC法分析时,标准品的浓度在21.2μg/ml—846.0μg/ml范围内分析结果有较好的线性关系。其相关系数、变异系数、回收率分别为0.99947、0.108%、97.60-100.23%。 运用六种诱变育种方法对神农霉素产生菌进行诱变处理,筛选高产菌株。通过HPLC法测定效价,最后得到一株活性是原始菌株4.0倍的诱变株H—191-1-1,效价为212.4μg/ml(原始菌株Z009,效价为53.7μg/ml)。通过对各种育种方法的比较得到:紫外线、微波、N~+离子注入对神农霉素产生菌诱变效果相对较好。 对高产菌株D-81-7进行了摇瓶发酵培养基筛选和最佳发酵条件的研究。对培养基配方进行了单因子实验,筛选出最佳的碳源和氮源。对培养基各组成成分进行了正交实验,找到最佳配比。还对pH、温度、无机盐、摇瓶装量等发酵工艺条件分别进行了探索。得出最佳培养基配方为:玉米淀粉6%鱼粉1.8% 黄豆饼粉0.8%KH_2PO_4 0.1% NaCl 0.15%CaCO_3 0.4%。消前pH7.3-7.5,温度28-30℃,摇瓶装量30ml/150ml,发酵效价最高。通过发酵罐发酵实验得到:在我所做实验条件下发酵效价与生物量没有明显的相关性;发酵效价与发酵时间、氨基氮、还原糖、总氮、总糖有显著的相关性。优化发酵培养基的发酵效价是原发酵培养基的120.1%。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:TQ450

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