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《华中农业大学》 2005年
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枯草芽孢杆菌B411的绿色荧光蛋白标记及其水体净化作用的研究

刘芳  
【摘要】:本课题主要包括两个方面的研究:(1)枯草芽孢杆菌B411的绿色荧光蚩白标记。以质粒pAD123为模板扩增出绿色荧光蛋白基因(gfp)编码序列,连接到枯草芽孢杆菌整合载体pAXc,构建重组质粒pAXc-gfp。pAXc-gfp线性化后转化B411菌株,获得重组子B412,以B412为指示菌投放入水体,利用其荧光标记跟踪检测了B412在水体中的消长,结果表明B412在无抗生素压力下能稳定表达GFP蛋白,菌体在水体中能存活较长时间(16 d),试验期间菌数变化介于5.5×10~3cfu/ml~8.9×10~4 cfu/ml之间。(2)枯草芽孢杆菌B411水体净化作用的研究。人工模拟了水体老化的过程,分析了有机质种类、有机质浓度、溶氧、温度、酸碱度、底泥及净水微生物与水体老化的关系。研究了自然环境下投菌对水体老化的影响。结果表明,水体老化是有机质、溶氧、温度等各因素综合作用的结果。有机质种类与水体老化的关系:含蛋白质丰富的水体,老化速度最快,含糖类丰富的水体,老化速度最慢。有机质浓度与水体老化的关系:在低溶氧下(≦0.10 mg/L),有机质浓度低于0.1‰时,水体不老化,有机质浓度超过一定值(≧0.2‰)时水体老化,且水体老化并不与有机质浓度一一相关,老化顺序依次为0.2‰、0.4‰、0.6‰、0.8‰和1.0‰;高溶氧下(≧1.34 mg/L),有机质浓度低于0.4‰时水体不老化,高于或等于0.4‰是水体老化有不同程度发生,老化顺序与有机质含量一一相关,依次为1.0‰、0.8‰、0.6‰和0.4‰。温度与水体老化的关系:温度(15℃、20℃)较低能延缓或避免水体老化,较高温度(25℃、30℃)时水体老化速度较快,第4天时水体开始变黑,20℃和15℃培养的水体在同一时间下几乎无变化。pH与水体老化的关系:pH 7.5时水体老化速度最快,第3天开始老化,偏碱(pH9.0)或偏酸(pH6.0)能延缓水体老化,第4天时才开始老化,pH 6.0的水体较pH 9.0的水体老化程度轻。底泥与水体老化的关系:底泥能促进水体老化,底泥不灭菌的水体中,6天内COD去除率达60.1%,高出不加底泥的水体18.6%。投菌量与水体老化的关系:投菌量为10~4 cfu/ml和10~5 cfu/ml时COD去除效果最好,去除率分别为90.1%和91.3%,明显高于其它处理及对照。不同溶氧水平下投菌与水体老化的关系:高溶氧下投菌能促进水体净化,COD去除率75.9%,低溶氧下投菌会加速水体老化,在投菌后3、4天内水体迅速变黑,COD去除率为45.7%,与低溶氧下对照COD去除率42.1%相差不大,且低于高溶氧水平下对照COD去除率55.1%。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:X172

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