收藏本站
《华中农业大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

CTC菌株的分类鉴定与S-层基因的表达载体构建

谭珊娜  
【摘要】:本研究内容包括两个方面,一方面运用16S-23S rRNA间隔区序列比较的方法完成了CTC菌株的系统发育学分类,将CTC菌株鉴定为蜡状芽胞杆菌;另一方面分别将木室克隆的编码S-层蛋白的基因ctc1和ctc2单独或聚合连接到穿梭质粒载体pHT304上,可以用于功能分析。 本室分离的CTC菌株,按照现行的表型分类法被巴斯德研究所鉴定为苏云金芽胞杆菌幕虫亚种,血清型为H2。然而,随后的研究中表明,CTC菌株虽然可以形成伴胞晶体,但形成的晶体很不稳定,而且,其晶体蛋白组成与普通的苏云金芽胞杆菌不同,并不是由质粒携带的cry系列的基因编码,而是染色体上编码S-层基因的产物,且伴胞晶体蛋白没有检测到对昆虫的毒性。因此,我们对其真实的属性和表型分类的可靠性产生了怀疑。运用目前国际系统发育分类学上的新热点技术——16S-23S rRNA间隔区序列比较的方法,选择了一定的菌株组合进行测序,从系统发育水平上找到CTC菌株的相对准确分类学地位。通过设计特异引物,PCR扩增出组合中7个候选菌并将PCR产物克隆进载体然后进行测序,一方面比较7株菌间的序列差异,同时通过检索核酸数据库,收集了其它来源的序列进行聚类分析。其结果表明,CTC菌株16S rRNA-23S rRNA间隔区序列与苏云金芽胞杆菌幕虫亚种代表菌T02的序列同源性在参比菌中最低,明显不属于同一类型,与巴斯德研究所运用表型分类法的结果不一致。进一步利用23S rRNA的部分序列或编码S层基因的序列进行聚类分析,CTC菌株以及T02菌株在分类的结果上同来自其它来源的苏云金芽胞杆菌并没有完全归为一处,而是介于苏云金芽胞杆菌和蜡状芽胞杆菌之间。因此,结合目前已经证实该菌株伴胞晶体由S层基因编码,且对昆虫无毒性的特点,我们认为CTC菌株属于蜡状芽胞杆菌,而且其可能处于蜡状芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌之间,与伴胞晶体形成的过渡类型遥相呼应,具有重要的研究价值。 S-层是位于原核细胞外壳最外层的一种表膜亚单位结构,呈晶格状排列,在原核细胞中分布广泛。S-层是由完全相同的亚单位组装成的单分子晶格点阵结构,它的二维晶格亚单位又是由单一的糖蛋白装配而成,在结构上有高度的规则性,代表了一种在进化中最简单的生物膜的发生模型。但是人们在研究中发现S-层在实验室适宜的生长环境中很容易丢失掉,而在自然界有竞争的环境下则不被丢失。就目前人们的研究结果来看,人们对S-层的统一认识中的一点就是它是存在于细胞的表面。而本实验室却发现了CTC菌的S-层与众不同,不仅在其表层有S-层的存在,而且该菌的晶体完全是由S-层蛋白组成。也就是说,该菌中的S-层不仅以表膜亚单位的结构存在于细胞表面而且以晶体的形态存在于细胞内,而在该菌中也已克隆到两个S-层蛋白编码基因,这两个基因与炭疽芽胞杆菌中的两个S-层基因有非常高的同源
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:Q939;Q786

手机知网App
【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 郭刚;苏云金芽胞杆菌S-层蛋白形成内涵体的研究[D];华中农业大学;2008年
2 周;苏云金芽胞杆菌的两类S-层蛋白共存于S-层和伴胞内涵体[D];华中农业大学;2011年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 焦振泉,刘秀梅;细菌分类鉴定的分子生物学方法研究进展[J];国外医学.卫生学分册;1996年06期
2 焦振泉,刘秀梅;16s rRNA序列同源性分析与细菌系统分类鉴定[J];国外医学(卫生学分册);1998年01期
3 李建洪,万秋英,王沫,姜锡权,喻子牛;苏云金芽胞杆菌新菌株的研究[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2000年05期
4 焦振泉,刘秀梅;细菌分类与鉴定的新热点:16S-23SrDNA间区[J];微生物学通报;2001年01期
5 李颐,陈锡时;现代分子方法在细菌分类学方面的应用[J];微生物学杂志;1996年02期
6 孙明,朱晨光,喻子牛;类似S-层蛋白的苏云金芽胞杆菌伴胞晶体蛋白基因的克隆[J];微生物学报;2001年02期
7 朱晨光,孙明,喻子牛;苏云金芽胞杆菌CTC菌株的S-层蛋白可以形成伴胞晶体[J];微生物学报;2002年06期
8 张宏宇,曾晓慧,邓望喜,喻子牛;苏云金芽胞杆菌的遗传多样性 I.遗传标记及其应用[J];遗传;1999年06期
9 李林,喻子牛;苏云金芽孢杆菌无质粒突变株BMB171的转化和表达性能[J];应用与环境生物学报;1999年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李琳,李槿年,余为一;细菌分类鉴定方法的研究概况[J];安徽农业科学;2004年03期
2 姜立春;甘毅;阮期平;;一株产紫红色色素的沙雷氏菌的分离与鉴定[J];安徽农业科学;2008年28期
3 何伟;王中康;陈金华;李强;曹月青;殷幼平;;Bt杀虫基因在桑粒肩天牛幼虫肠道内生优势菌中的转化研究[J];氨基酸和生物资源;2008年03期
4 刘梅;胡思顺;孙焕;毕丁仁;孙明;;苏云金芽胞杆菌无晶体突变株对小鼠和雏鸡的安全性[J];安全与环境学报;2007年05期
5 周春花;欧阳珊;吴小平;黎敏;;基于16S rRNA和ND1基因序列的中国蚌科丽蚌属的系统发育[J];动物学报;2007年06期
6 张翊国;;细菌分类鉴定的核酸技术[J];北京农学院学报;1988年01期
7 吴润;郝保青;农向;严丹红;;奶牛隐性乳房炎的主要病原菌的PCR鉴定[J];中国牛业科学;2006年02期
8 黄晓琴;束怀瑞;刘会香;张丽霞;丁爱云;陈宗懋;;山东省茶树冰核细菌的鉴定[J];茶叶科学;2010年03期
9 刘志强;海荣;俞东征;;炭疽芽胞杆菌中插入序列研究进展[J];地方病通报;2006年01期
10 梁万文;陈明;余晓丽;李莉萍;雷爱莹;陈汉忠;徐增辉;甘西;黄维义;;斑点叉尾鮰肠败血症PCR诊断方法的建立[J];大连水产学院学报;2007年04期
中国重要会议论文全文数据库 前5条
1 谢冰;徐亚同;;环境微生物生态研究方法进展[A];生态安全与生态建设——中国科协2002年学术年会论文集[C];2002年
2 王茂华;胡白石;许志刚;;玉米枯萎病菌及其近缘种的ITS序列比较[A];2003’华东植物病理学术研讨会暨江苏省植物病理学会第十次会员代表大会论文集[C];2003年
3 郭明星;朱堂明;陈晨;赵晖;王振华;陈建军;徐新生;;湖北省水产品中单增李斯特菌基因分型研究[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
4 李金花;王蒂;杨合同;柴兆祥;李国权;;引起马铃薯块茎腐烂的 Pseudomonas marginalis pv.Marginalis 的分离鉴定[A];2006年中国作物学会马铃薯专业委员会年会暨学术研讨会论文集[C];2006年
5 汪川;张朝武;裴晓方;刘衡川;余倩;许欣;;一株从酸奶中分离的德氏乳杆菌保加利亚亚种的鉴定和系统发育分析[A];达能营养中心青年科学工作者论坛优秀论文集2007年第6期[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王冰;降解丝素放线菌的分离鉴定、发酵条件优化及其降解机制研究[D];山东农业大学;2009年
2 黎满香;感染猪的粪肠球菌的分离鉴定及部分特性和诊断方法研究[D];湖南农业大学;2010年
3 刁玉涛;菌群构成与细菌性阴道病的相关性研究[D];山东大学;2011年
4 钟蕾;三角帆蚌细菌性瘟病病原学研究与LasB基因的克隆及表达[D];湖南农业大学;2011年
5 曹云;SQR 9微生物有机肥防治黄瓜土传枯萎病的效应与机制研究[D];南京农业大学;2011年
6 张隽;氯氰菊酯降解菌株的筛选、鉴定、降解机制及应用研究[D];南京农业大学;2011年
7 王勤英;嗜线虫致病杆菌杀虫蛋白的分离纯化及杀虫蛋白基因克隆[D];河北农业大学;2004年
8 郑桂丽;常见致病菌通用芯片检测方法的研究[D];中国海洋大学;2004年
9 朱晨光;苏云金芽胞杆菌抗病杀虫和广谱工程菌的构建[D];华中农业大学;2004年
10 谢晶;植物病原菌拮抗微生物的筛选、鉴定及拮抗机理研究[D];四川大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李正华;东平湖浮游细菌群落多样性分析[D];山东农业大学;2010年
2 高媛媛;猪附红细胞体对仔猪免疫功能的影响及免疫调节剂的筛选[D];山东农业大学;2010年
3 郭艳萍;抑黄曲霉乳酸菌的筛选及菌种鉴定[D];安徽农业大学;2010年
4 李晓鹏;甘南牧区优良乳酸菌的分离筛选及开发应用[D];甘肃农业大学;2010年
5 司鲁俊;玉米细菌性叶斑病病原菌鉴定与分子检测[D];新疆农业大学;2010年
6 滕青杉;放线菌次级代谢产物肉桂酰胺的生物合成及菌种鉴定[D];华东理工大学;2011年
7 姚岚;一株水稻纹枯病拮抗细菌及其抗菌物质的研究[D];浙江大学;2011年
8 陈春;焦化废水中苯酚降解菌的筛选与降解性能的研究[D];太原理工大学;2011年
9 毛杰;惠州西湖沉水植被修复对浮游细菌群落结构的影响[D];暨南大学;2011年
10 高志武;PCR技术应用于啤酒腐败菌的快速检测[D];兰州理工大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄必旺,黄志鹏,关雄;电穿孔法用于大肠杆菌和苏云金杆菌的转化及质粒消除[J];福建农业大学学报;1999年01期
2 丁秋梅,杨和文;优化溶解氧浓度提高苏云金杆菌发酵水平[J];湖北农业科学;1993年12期
3 江平;侯艳宁;陈兴;;大鼠P450侧链裂解酶抗原决定簇多参数预测及合成[J];免疫学杂志;2005年06期
4 陈锦权,黄志鹏;苏云金杆菌(Bt8010)工业发酵过程研究[J];农业工程学报;1998年01期
5 王丽萍;彭德奎;陈守文;喻子牛;孙明;;枯草芽胞杆菌重组木聚糖酶基因高效表达系统的构建[J];农业生物技术学报;2007年01期
6 朱仕房,杨曜中;双水相体系分离苏云金芽孢杆菌伴孢晶体的研究[J];世界农药;2000年05期
7 丁勤学,阙海萍,郭尧君,景书谦,刘少君;成年和老年小鼠脑蛋白质组双向电泳图谱比较[J];生物化学与生物物理进展;2001年05期
8 王莉,孙明,喻子牛;利用S-层蛋白在苏云金芽胞杆菌细胞表面展示多聚组氨酸肽(简报)[J];实验生物学报;2003年06期
9 李林,邵宗泽,喻子牛;电脉冲法转化苏云金芽孢杆菌BMB171的研究[J];微生物学通报;2000年05期
10 孙明,朱晨光,喻子牛;类似S-层蛋白的苏云金芽胞杆菌伴胞晶体蛋白基因的克隆[J];微生物学报;2001年02期
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 朱晨光;苏云金芽胞杆菌抗病杀虫和广谱工程菌的构建[D];华中农业大学;2004年
2 胡申才;具细胞毒活性海洋微生物的分离筛选及次级代谢物的研究[D];华中农业大学;2005年
3 周燚;苏云金芽胞杆菌AHL内酯酶功能及其抗魔芋软腐病研究[D];华中农业大学;2006年
4 冯亮;透明颤菌血红蛋白基因在苏云金芽胞杆菌中的表达及对其发酵特性的影响[D];华中农业大学;2007年
5 张蕾;苏云金芽胞杆菌CTC的S-层蛋白与晶体蛋白共存关系及其应用研究[D];华中农业大学;2007年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 杨晓琳;郭刚;张凤娟;孙士锋;朱朝华;曾会才;;苏云金芽胞杆菌S-层蛋白基因的异源表达及分离纯化[J];基因组学与应用生物学;2013年01期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 张用梅,陈宗胜,库竹,■鹊,王牧牧;与苏芸金杆菌各H——血清型相同但不产生晶体的芽孢杆菌的生化特性、醋酶型和毒力的比较[J];华中农学院学报;1983年04期
2 马克平;试论生物多样性的概念[J];生物多样性;1993年01期
3 张宏宇;李中奎;喻子牛;;转苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因抗虫植物的研究进展与商品化[J];生物技术通报;1997年03期
4 John L.Johnson ,徐孝华;核酸在细菌分类中的应用[J];微生物学通报;1986年06期
5 孙明,喻子牛;苏云金芽孢杆菌中华亚种CT-43菌株伴胞晶体蛋白的特性[J];微生物学报;1996年04期
6 李林,杨超,刘子铎,李阜棣,喻子牛;苏云金芽孢杆菌无晶体突变株的逐级升温筛选及其转化性能[J];微生物学报;2000年01期
7 吴岚,孙明,喻子牛;利用苏云金芽胞杆菌转座子Tn4430构建含cry1 Ac10基因的解离载体[J];微生物学报;2000年03期
8 孙明,朱晨光,喻子牛;类似S-层蛋白的苏云金芽胞杆菌伴胞晶体蛋白基因的克隆[J];微生物学报;2001年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 唐利华;肖扬;边银丙;;中国黑木耳主要栽培菌株ISSR指纹分析及SCAR标记[J];菌物学报;2008年02期
2 李迅;张静蕾;;一株产辅酶Q_(10)的光合细菌菌株的分离及鉴定[J];南京师大学报(自然科学版);2008年03期
3 许晓玲;李卫芬;雷剑;王敏奇;;四环素降解菌的选育、鉴定及其降解特性[J];农业生物技术学报;2011年03期
4 王晓樱,鲍朗,谢勇恩,张万江,陈玮,刘益民,谢益新,罗涛;随机扩增多态性DNA技术对结核分支杆菌菌株鉴别及其耐药相关性分析[J];生命科学研究;2002年02期
5 方立超,黄雪峰,杜珍辉,袁静,魏泓;产生辅酶Q_(10)的光合细菌菌株的分离及鉴定[J];微生物学报;2005年05期
6 叶选怡;;一株高生物量酵母菌株的鉴定[J];丽水学院学报;2009年05期
7 王健鑫;王文波;戴秋萍;刘雪珠;;壳聚糖酶产生菌株的筛选和鉴定[J];湖北农业科学;2010年08期
8 葛淑敏;钱爱东;王铁风;;10株牛源非结核分枝杆菌16S rRNA基因序列分析[J];中国预防兽医学报;2010年11期
9 葛淑敏;钱爱东;王铁风;;3株猪源非结核分支杆菌16S rRNA基因序列分析[J];动物医学进展;2010年12期
10 岳黎;唐赟;杨艳;刘亮;宋嫣;谭洪;王晓玉;;石油污染土壤中高效苯酚降解菌的分离鉴定及特性研究[J];安徽农业科学;2011年20期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 边银丙;;略论食用菌DNA分子标记技术的地位与前景[A];首届全国食用菌中青年专家学术交流会论文集[C];2006年
2 杨霞;张红英;夏平安;王川庆;;鸡源鲍氏志贺菌16S rRNA基因序列测定及同源性比较[A];中华预防医学会微生态学第二届特种医学暨河南省、山东省预防医学会微生态学学术研讨会论文集[C];2006年
3 侯军;石立三;刘方;;产抗真菌物质的菌株鉴定及抗菌成分的研究[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年
4 肖红莉;张艳辉;许雷;;广谱性农药降解菌株的分离及相关基因克隆[A];中国生物化学与分子生物学会农业生物化学与分子生物学分会第八次学术研讨会论文集[C];2008年
5 刘宁;李社增;鹿秀云;李宝庆;郭庆港;马平;;番茄灰霉病生防细菌BAB-1菌株鉴定及发酵培养基筛选[A];中国微生物学会《第二届全国农业微生物研究及产业化研讨会》和《第十一届全国杀虫微生物学术研讨会》暨《湖北省暨武汉市微生物学会和内蒙古微生物学会2008年会》论文摘要[C];2008年
6 黄福祥;马建彬;朱西儒;谢小保;;地衣芽孢杆菌菌株鉴定和生化特征的研究[A];第三届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第二届全国生物农药研讨会论文集[C];2004年
7 韩文革;韩玉庆;周春玲;;2000—2005年住院肺结核病人耐药情况分析[A];2006中国防痨协会全国学会会议论文集[C];2006年
8 何月秋;周惠萍;吴毅歆;范成明;李顺德;;利用稻瘟病菌突变体鉴定水稻抗稻瘟病基因研究[A];第八届海峡两岸菌物学学术研讨会论文集[C];2007年
9 彭哲;朱朝敏;幸琳琳;刘芮汐;;结核分支杆菌北京基因型菌株与重庆地区结核患儿耐药表型的研究[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编(上册)[C];2010年
10 郭艳玲;王甦民;李传友;刘洋;;应用IS6110-限制性片段长度多态性和Spoligotyping技术进行结核分枝杆菌菌株鉴定的研究(摘要)[A];中华医学会结核病学分会2004年学术会议论文汇编[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 周本军;菌株JF122同步铬还原与苯酚降解的过程机理及其环境意义[D];合肥工业大学;2013年
2 罗涛;结核分枝杆菌北京家族菌株的起源、进化及其与现代人类迁移的联系[D];复旦大学;2012年
3 董国菊;荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens P-72-10菌株对烟草黑胫病的生防机理研究[D];西南大学;2012年
4 蔡海宝;产几丁质酶海洋放线菌C203的分离鉴定及其酶基因的克隆[D];华南热带农业大学;2007年
5 刘东波;生孢噬纤维菌的分离、鉴定及生物学特性的研究[D];东北师范大学;2004年
6 方立超;光合细菌益生特性的实验研究[D];第三军医大学;2005年
7 郭正彦;Streptomyces alboflavus 313发酵液中抑菌成分的研究[D];西北农林科技大学;2009年
8 张文娟;Streptomyces djakartensis NW35菌株发酵液的抑菌活性及抑菌成分研究[D];西北农林科技大学;2013年
9 肖荣;短乳杆菌M8菌株的筛选及其slpM基因的克隆与表达研究[D];湖南农业大学;2012年
10 高小宁;植物内生细菌菌株Em7对油菜菌核病的防治研究[D];西北农林科技大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 于珊珊;Halomonas sp. SD-01菌株的分离鉴定及其所产胞外低温碱性蛋白酶的研究[D];东北师范大学;2006年
2 占宝林;杀线虫真菌的筛选及菌株DF09002的鉴定、发酵优化与产酶特性研究[D];海南大学;2010年
3 黄晨阳;同工酶和RAPD标记在金针菇菌株鉴定和遗传多样性研究中的应用[D];福建农林大学;2002年
4 吕梅;Lichtheimia属HSM菌株酯酶发酵条件及酶学特性研究[D];湖北工业大学;2014年
5 王振军;RAPD技术对结核分枝杆菌菌株鉴别及其耐药相关性研究[D];青岛大学;2005年
6 吴旻;纤维素酶高产菌株的选育[D];南京理工大学;2004年
7 麻琼丽;产脂肪酶菌株的筛选、鉴定及产酶条件优化[D];海南大学;2010年
8 朱宏阳;ε-聚赖氨酸产生菌株的筛选和发酵条件研究[D];南京工业大学;2005年
9 陈琳;产低温蛋白酶菌株Halomonas sp.SD-02的分离鉴定及其酶的提纯与特性研究[D];东北师范大学;2007年
10 陈丽莉;纤维素酶生产菌的选育及纤维素降解特性的研究[D];长春理工大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026