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《华中农业大学》 2005年
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猪SCAP和INSIG家族基因的克隆、染色体定位及生物学特征研究

邱欢  
【摘要】:目的: 通过对猪的脂肪和胆固醇代谢相关基因,包括SCAP、INSIG1和INSIG2的克隆、染色体定位及其生物学特征的鉴定,探讨猪的脂肪沉积的分子机理,为这些基因的功能研究奠定基础。 方法: 1 通过同源比较法,设计用于扩增特异基因的引物; 2 利用RT-PCR技术,扩增特异基因的cDNA片段; 3 利用5’和3’RACE技术,获取特异基因的5和3’末端cDNA序列; 4 对特异基因的扩增产物进行回收、克隆和测序; 5 利用RT-PCR技术,获取特异基因的组织表达谱; 6 通过基因组PCR获取特异基因的基因组序列; 7 利用辐射杂交板技术,对特异基因进行染色体定位。 结果: 1.本研究获得了505 bp的INSIG1部分编码区以及143 bp的INSIG1差异剪接体(INSIG1 variant 3)。该差异剪接体由野生型INSIG1(INSIG1 variant 1)发生292 bp的缺失所造成。猪INSIG1序列所编码的INSIG1蛋白质序列和人INSIG1有97.6%的同源性。RT-PCR检测表明INSIG1在心、肝、脾、肺、肾、肠、睾丸、脑、脂肪和肌肉中均有表达。INSIG1差异剪接体的表达在心脏和肌肉中没有检测到。对人、大鼠和小鼠EST数据库的检索和对小鼠来源的RNA进行的RT-PCR检测表明,该差异剪接现象存在于在人和猪中,而在啮齿类动物中没有发生。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:Q78;Q953

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