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《华中农业大学》 2007年
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春石斛兰品种的倍性鉴定及RAPD分子遗传图谱的构建

黄少玲  
【摘要】: 本研究采用染色体计数和流式细胞仪测定两种方法,对春石斛品种的倍性进行了鉴定,并以044(Dendrobium Lucky Gal‘Emito’)(母本)与051(D.Fantasy‘Crown’)(父本)的F_1代90株为作图材料,利用RAPD标记,围绕春石斛分子遗传图谱的构建,进行了春石斛RAPD反应体系优化和RAPD标记分离分析等方面研究,并初步最终构建了春石斛分子遗传图谱。 主要结果如下: 1、春石斛的倍性鉴定 利用DNA流式细胞仪测定法鉴定了53个由日本引进的春石斛栽培品种和26个国产原生种的染色体倍性。结果表明,待测品种植株中有二倍体、三倍体及二倍体加四倍体、三倍体加六倍体和四倍体加八倍体等嵌合体。利用染色体制片法鉴定了17个栽培种和4个原生种的倍性,待测品种植株中不仅有二倍体、三倍体和四倍体,而且还可能有二倍体加四倍体的嵌合体。比较这两种植株倍性鉴定方法,流式细胞仪光度术测定细胞核DNA含量,试样制备简单,测量快速,精度高,因此是进行倍性鉴定的理想方法之一,其鉴定结果与染色体计数结果有所不同,但是可以作为染色体计数方法的有效参照。染色体计数法虽然操作过程比较繁琐,但却是最可靠、最直接的鉴定方法。 2、作图群体RAPD多态性分析 从420个RAPD随机引物中筛选获得在双亲间存在多态性的引物90个,多态性比例为21.4%。用筛选出的90个随机引物对F_1群体进行多态性分析,共获得稳定的多态性带型215个。经卡方检测,获得的215个RAPD多态性位点中,有122个RAPD标记符合孟德尔遗传规律(1∶1),可用于作图。 3、春石斛分子遗传图谱的构建 利用RAPD标记构建了一张包含9个连锁群、由121个标记位点组成的春石斛分子遗传图谱,图谱总长度6568.7cm,标记间平均距离为50.11cm,连锁群长度变动在128.8cm~1043.0cm之间。标记最多的连锁群有21个标记,最少的有3个。
【学位授予单位】:华中农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S682.31

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