收藏本站
《华中农业大学》 2008年 硕士论文
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

猪繁殖与呼吸综合征重组假型杆状病毒基因工程疫苗研究

王升平  
【摘要】: 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的传染病。PRRS自1987年首次报道发现于美国以来,现已遍及世界各主要养猪国家与地区,并已成为危害养猪业最严重的传染病之一。同其它病毒性疾病的防制一样,免疫接种仍是预防与控制PRRS的主要措施。目前用于预防PRRS的主要商用疫苗是传统的常规弱毒疫苗和灭活疫苗,但由于存在弱毒疫苗散毒和灭活疫苗免疫效果不理想等原因,使得这两种疫苗的使用都存在着一定的争议。因此,研制更安全、高效、廉价的新型疫苗成为研究者关注的焦点。 ORF5基因编码的囊膜糖蛋白GP5是PRRSV的主要免疫原性蛋白,也是目前研制PRRSV新型疫苗的主要靶蛋白。但单独基于天然ORF5基因构建的一些试验性疫苗普遍存在诱发中和抗体缓慢和不高的问题。最近研究证实将通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE)插入ORF5基因的中和表位和覆盖表位间,获得修饰后的ORF5基因ORF5m,可以使ORF5基因的中和表位充分暴露,从而诱发更强的免疫反应。另外,GP5蛋白与ORF6基因编码的M蛋白在成熟的病毒粒子和感染的细胞内可以形成异源二聚体GP5/M,并且这种异源二聚体的形成能促进GP5蛋白的翻译后修饰、转运,从而促进免疫动物产生更强的特异性免疫应答。 杆状病毒载体是目前应用十分广泛的载体之一,主要应用于基因治疗、基因功能研究、疫苗开发等领域。近年来研究发现,这种载体可以携带以哺育动物启动子驱动的外源基因表达盒进入哺乳动物细胞,从而在哺乳动物细胞内使外源基因得到高效稳定的表达,而其自身基因组并不复制和表达。同时,经过适当的修饰或预处理,杆状病毒表达载体还可介导外源基因在哺乳动物体内获得表达。 目前利用杆状病毒作为体内基因投送的载体已受到广泛的关注。但研究证实血清补体系统是杆状病毒体内基因转导过程中的主要抑制因素。因此,为了消除杆状病毒的补体敏感性,本研究利用水泡性口炎病毒G蛋白对杆状病毒进行了修饰,构建了囊膜表面展示有水泡性口炎G蛋白的杆状病毒载体。在此基础上将由CMV启动子驱动的PRRSV ORF5m基因和PRRSV ORF6基因两个独立的表达盒以转座的方式重组入杆状病毒基因组中,获得重组杆状病毒BV-G-5m/6。 将重组病毒以3种不同剂量(10~9pfu/只,10~8pfu/只,10~7pfu/只)经肌肉注射免疫Balb/c小鼠,同时与共表达PRRSV ORF5m和ORF6基因的常规DNA疫苗pCI-5m6进行比较。结果重组病毒BV-G-5m/6所诱发的免疫反应呈剂量依赖性,但3种不同剂量的重组病毒所诱导的IFN-γ水平和中和抗体水平均明显高于常规DNA疫苗免疫组,其中10~9pfu重组病毒免疫组所诱导的免疫反应最强,二免后3周平均中和抗体水平达到1:32以上,ELISA检测IFN-γ水平达90pg/ml以上。表明重组杆状病毒BV-G-5m/6是一种具有良好发展前景的猪繁殖与呼吸综合征候选疫苗。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 王文祥;周鸿伟;;猪繁殖与呼吸综合征的流行趋势与防控对策[J];养殖技术顾问;2011年08期
2 刘燕云;;猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断和预防[J];中国猪业;2011年08期
3 庄雨龙;;一例猪瘟与猪繁殖与呼吸综合征的诊断与防制[J];养殖技术顾问;2011年09期
4 张海明;曹蓝;;猪繁殖与呼吸综合征流行现状[J];中国猪业;2011年08期
5 许世勇;;猪繁殖与呼吸综合征的综合防控措施[J];中国畜牧兽医;2011年09期
6 孙海燕;葛铭;;猪细小病毒疫苗研究进展[J];饲料博览;2011年06期
7 刘立平;庞彦;罗贵名;;规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒血清学调查[J];兽医导刊;2011年S1期
8 常超;姜宇;杨朋欣;姜丽萍;李来旭;;猪繁殖与呼吸综合征的防制[J];中国猪业;2011年06期
9 王恕轩;欧阳增理;刘刚;丁玉春;;高致病性猪繁殖与呼吸综合征病(HP-PRRS)的研究近况[J];畜禽业;2011年07期
10 刘涛;王瑞;陈宏智;;发酵床猪场猪蓝耳病和猪传染性胸膜肺炎混合感染的诊治[J];猪业科学;2011年07期
11 赵立军;;猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的RT-PCR应用和分析[J];河南畜牧兽医(综合版);2010年07期
12 张红;郑杰;张发明;张洪;张坦;王文泉;陈玲;;猪繁殖与呼吸综合征病毒(平谷株)的分离和鉴定[J];当代畜牧;2011年09期
13 陶静;叶红;;新城疫F蛋白基因工程疫苗的研究现状[J];安徽农业科学;2011年17期
14 唐金明;花群义;张烈韬;鲁刚;;我国动物基因工程疫苗的研究进展[J];养殖技术顾问;2011年07期
15 刘从军;丁玉春;樊吉林;;猪繁殖与呼吸综合征病毒实验室诊断技术的研究[J];畜禽业;2011年07期
16 陈进会;赖维莉;颜其贵;;重组M蛋白间接ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体[J];中国动物检疫;2011年04期
17 马米玲;郝雪峰;关贵全;刘志杰;李有全;刘爱红;;猪繁殖与呼吸综合征病毒HN-HW株全基因组分子特征分析[J];中国兽医科学;2011年08期
18 朱月华;姜平;李玉峰;王先炜;;猪繁殖与呼吸综合征诊断与疫苗研究进展[J];动物医学进展;2011年08期
19 孙建富;郝建伟;荣福龙;姜力;姜丽萍;白宇;;猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定及ORF5基因的序列分析[J];中国畜牧兽医;2011年09期
20 杨彩然;杨宗泽;王金锋;房海;贺英;张艳英;高光平;史秋梅;;猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株NSP2基因的序列分析[J];黑龙江畜牧兽医;2011年13期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 韩松;金宁一;李霄;;表达PRRSV GP5、M蛋白重组鸡痘病毒的构建与鉴定[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
2 徐引弟;王治方;张青娴;焦海燕;郭成留;;猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株与普通株二重RT-PCR鉴别方法的建立与应用[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年
3 希尼尼根;程安春;汪铭书;陈孝跃;文明;周伟光;郭宇飞;陈斌;贾仁勇;;猪繁殖与呼吸综合征病毒四川分离株ORF5基因的克隆及序列分析[A];中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第七次学术研讨会论文集[C];2004年
4 邓雨修;李玉峰;姜平;蒋文明;汤景元;;不同引物RT-PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的比较研究[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(上)[C];2005年
5 朱连德;;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异和疫苗免疫保护[A];中国猪业发展大会暨中国畜牧业协会猪业分会第二届会员代表大会论文集[C];2007年
6 吴凤笋;李文刚;唐桂芬;;猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究的概况[A];第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛论文集(下册)[C];2008年
7 周艳君;安同庆;薛强;仇华吉;刘金霞;王云峰;田志军;彭金美;童光志;;猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的表达及其单克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
8 梁大明;;关于防控猪繁殖与呼吸综合征的反思[A];中国畜牧兽医学会养猪学分会2009年学术年会“回盛生物”杯全国养猪技术论文大赛论文集[C];2009年
9 李俊;王金宝;张祯涛;周顺;;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分子生物学研究进展[A];山东畜牧兽医学会养猪专业委员会第一届学术研讨会论文集[C];2007年
10 李昌;金宁一;梁代清;夏学功;;植物生物反应器生产基因工程疫苗的研究进展[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(上)[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 高志强;猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组分子遗传特征分析[D];中国农业大学;2003年
2 江云波;猪繁殖与呼吸综合征病毒新型基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2007年
3 仇华吉;猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-la株基因组解析及其囊膜蛋白结构与功能分析[D];东北农业大学;2001年
4 温建新;含有CpG基序的PRRSV ORF5基因的真核重组表达载体的构建及其免疫反应的研究[D];山东农业大学;2008年
5 周艳君;猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定[D];东北农业大学;2005年
6 薛强;猪繁殖与呼吸综合征病毒双基因多组合DNA疫苗的构建及其免疫效力评价[D];中国农业科学院;2003年
7 唐勇;猪伪狂犬病鉴别诊断研究与猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组序列的测定[D];华中农业大学;2004年
8 田志军;表达PRRSV GP5蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其免疫效力的研究[D];东北农业大学;2005年
9 洪琦;口蹄疫—伪狂犬病二价与口蹄疫—猪细小—伪狂犬病三价基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2005年
10 祝卫国;猪圆环病毒2型(PCV2)的研究[D];西北农林科技大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王升平;猪繁殖与呼吸综合征重组假型杆状病毒基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2008年
2 金迪;表达PRRSV GP5蛋白的重组伪狂犬病毒的免疫效力研究[D];华中农业大学;2007年
3 邵蕾;猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备及初步应用[D];吉林农业大学;2007年
4 周盛华;快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫胶体金诊断试纸条的研制[D];东北农业大学;2008年
5 袁婧;猪繁殖与呼吸综合征直接免疫荧光诊断方法的建立及其应用[D];东北农业大学;2008年
6 郭海龙;猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪体内细胞因子与病毒的定量检测[D];中国农业科学院;2002年
7 安同庆;利用噬菌体展示技术鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原表位[D];中国农业科学院;2004年
8 刘伍梅;PRRSV感染Marc-145细胞的病毒形态发生学、细胞超微结构变化及细胞凋亡的研究[D];四川农业大学;2005年
9 鲁韦韦;猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立[D];南京农业大学;2008年
10 王娜;猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞的差异蛋白组学研究[D];福建农林大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 见习记者 孔颖超;康宝基因工程疫苗项目开工[N];长治日报;2011年
2 记者 陈卫东;上海内蒙古联合实施基因工程疫苗产业化[N];科技日报;2000年
3 吕月琴;为基因工程疫苗再添新活力[N];大众科技报;2008年
4 汉文;首剂禽类基因工程疫苗在鄂诞生[N];中国畜牧兽医报;2005年
5 ;禽畜“医保”听令基因工程疫苗[N];天津日报;2006年
6 刘健 汤波;首个禽类传染病基因工程疫苗通过鉴定[N];农资导报;2004年
7 潘社群;戴长柏:基因工程疫苗及多肽研究“排头兵”[N];昆明日报;2008年
8 汤波、刘健、吴晓华;长江大学研制出新型禽类传染病基因工程疫苗[N];湖北日报;2004年
9 汤波 程超;我国研制出首剂禽类传染病基因工程疫苗[N];中国食品质量报;2004年
10 记者 张咏晴;畜牧业杀手遇克星[N];文汇报;2001年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978