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壮药铁包金的资源与品质研究

滕红丽  
【摘要】:铁包金为广西壮族地区常用的一味重要的民族药(壮药名:Gaeunourwz勾耨叻),始载于《岭南采药录》,并为《广西中药材标准(1990)》所收载。该标准收载的铁包金为鼠李科勾儿茶属植物老鼠耳(细叶勾儿茶)Berchemia lineata(L.)DC.的干燥根。老鼠耳(细叶勾儿茶)主要分布于广西、广东、福建、海南、台湾等省区,在越南、印度、锡金、日本等国家也有分布;生长于低海拔的山野、路旁、坡地或开旷地上。其性味淡、涩,平,具有散瘀,止血,止痛,镇咳,消滞(壮医:除湿毒,祛风毒,清热毒,调气道谷道,通龙路火路)等多种功效,用于多种肿瘤、炎症、黄疸型肝炎、肺结核咯血、颈淋巴结肿大、咳嗽、消化道出血、风湿痹痛、痛风、头痛、腹痛、糖尿病、心脏病、精神分裂、妇女经痛、风火牙痛、睾丸肿痛、荨麻疹、痔疮、痈疮、疔疮、跌打损伤等病症;外用治外伤出血、烫火伤、毒蛇咬伤等。 文献报道及我们的前期研究工作表明,铁包金用于复方中治疗肿瘤和多种炎症性疾病有较好的疗效,是广西正在研制的抗肿瘤新药“壮药复方铁草胶囊[2006年国家科技支撑计划项目(2006BAI06A17)]”、“壮药排毒胶囊”[2009年广西壮族自治区食品药品监督管理局医疗机构制剂项目(桂L100001)]及“复方红豆杉胶囊”[2000年广西民族药制剂(2000ML-3号)]的主要药物组分之一。随着对铁包金的研究开发和临床应用的深入,铁包金的药用价值越来越受到重视。 在系统查阅了国内外铁包金的植物资源、化学成分、药理作用、临床应用及产业开发等研究文献的基础上,我们发现涉及到铁包金资源与质量的基础研究很少,对其资源和商品品种以及主要活性成分尚不了解,其市售商品混乱,目前尚无对铁包金药材进行有效的质量控制以及根据质量对铁包金商品品种进行有效选择的方法以保证疗效。因此,本论文对铁包金的资源、品种、生药性状和显微鉴别、薄层鉴别、含量测定、指纹图谱、抗肿瘤作用及其活性部位的成分、铁包金在相关制剂中的提取工艺和质量控制方法等进行了系统的研究,以期为该民族药物的现代研究和临床应用提供科学依据。 通过对广西壮族地区、西南地区药材市场的铁包金药材和产地原植物的系统调查,发现广西壮族地区临床常用的铁包金药材并非只是细叶勾儿茶的根,实际包括细叶勾儿茶(老鼠耳)Berchemia lineata(L.)DC.多叶勾儿茶Berchemia polyphylla Wall.ex Laws.var.polyphylla.光枝勾儿茶Berchemia polyphylla var.leioclada (Hand.-Mazz.)Hand.-Mazz.以及多花勾儿茶Berchemia floribunda(Wall.)Brongn.等多种植物的茎藤或根。这些植物的茎藤或根实际上在西南各地区同等作为铁包金药材入药。其中,细叶勾儿茶资源较少,而光枝勾儿茶、多叶勾儿茶以及多花勾儿茶是市场上铁包金的主流品种。这为铁包金药材的深入研究奠定了基础。 通过采集原植物标本,观察和描述了铁包金的根、茎、叶的性状和组织结构特征,摄制了各种显微鉴别特征图。研究发现,铁包金根、茎、叶的性状,根、茎横切面结构,叶的粉末和叶缘的显微特征明显,可作为该类药材鉴别的依据,并能把不同来源的铁包金药材品种区别开,从而建立了铁包金的生药鉴别方法。 根据本属植物普遍含有有效成分黄酮类成分尤其是槲皮素的特点,对广西产铁包金药材进行了薄层色谱法定性鉴别与分析,并对主要采自广西武鸣县甘圩镇的10批铁包金药材样品用高效液相色谱法测定了其槲皮素成分的含量。色谱柱为迪马ODS C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-甲醇(5:1)A:0.1%磷酸溶液B(梯度:0-30min,20-6 0%A);流速0.85mL/min;检测波长36 0nm,柱温30℃。槲皮素在0.69μg-4.83μg范围内线性关系良好,r=0.9998(n=7),平均回收率为99.8%(RSD:1.27%,n=6)。建立了铁包金药材中槲皮素的含量测定方法,从而为更好地控制铁包金药材质量提供了一定的科学依据。 参照相关文献,采用高效液相色谱法,首次对铁包金药材进行了指纹图谱研究,初步建立了铁包金2个种[细叶勾儿茶Berchemia lineata(L.)DC.,光枝勾儿茶Berchemia polyphylla var. leioclada(Hand.-Mazz.) Hand.-Mazz.]多个样品药材的HPLC指纹图谱。其中细叶勾儿茶以芦丁为参照峰,建立了乙酸乙酯提取部分15个特征峰的标准指纹图谱(确定了各个峰的相应丰度);光枝勾儿茶以槲皮素为参照峰,建立了乙酸乙酯提取部分18个特征峰的标准指纹图谱(确定了各个峰的相应丰度)。为铁包金药用植物的深入研究及其应用提供指纹信息,并为铁包金药材的质量控制提供科学依据。 对铁包金(细叶勾儿茶)提取物的体内抗肿瘤作用进行了实验研究。以S180肉瘤、小鼠肝癌H22腹水瘤作为实验瘤株,观察铁包金提取物对s180肉瘤、H22腹水瘤抑瘤率;对s180肉瘤、H22腹水瘤进行肿瘤生存期试验。结果,铁包金提取物明显抑制S180肉瘤和H22腹水瘤小鼠体内肿瘤的发生和发展,其不同剂量对S180肉瘤抑瘤率分别为62.8%、55.8%和53.5%;对H22腹水瘤抑瘤率分别为70.4%、64.2%和38.3%;铁包金提取物能显著提高S180肉瘤和H22腹水瘤小鼠的生命延长率,其不同剂量生命延长率分别达到46.0%、35.5%、42.3%和33.7%、40.7%、38.7%。铁包金提取物抑瘤作用与剂量呈正相关关系,而肿瘤生存期试验结果与剂量关系不明显。铁包金提取物体内试验表明能延缓荷瘤小鼠的瘤体生长,明显延长荷瘤小鼠的生存期,还能改善荷瘤小鼠免疫机能作用。 本文还在上述研究的基础上考察了制剂中铁包金的质量。以干膏收率及铁包金中的主要成分槲皮素的含量为考察指标,对以铁包金(细叶勾儿茶)为主药的壮药排毒胶囊剂的乙醇提取工艺进行正交试验研究,考察乙醇的浓度、乙醇的用量、乙醇回流时间、回流次数等对提取效果的影响,确定了该制剂中铁包金的最佳工艺。同时,为了有效地控制该制剂的质量,采用薄层色谱法对制剂中铁包金进行了定性鉴别,采用高效液相色谱法对制剂中铁包金所含的槲皮素进行了含量测定,建立了壮药排毒胶囊的质量标准,用于壮药排毒胶囊的质量控制。 上述研究以第一作者在中文核心刊物发表论文6篇,EI收录1篇,列入2011年第三批中药材广西地方标准项目1项。该项研究成果为铁包金药材及其制剂的质量标准的制定提供了技术支撑,从而为我国铁包金这一民族药物的现代研究和临床应用提供了科学依据。


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