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《湖北中医药大学》 2011年
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金刚藤有效物质部位抗炎药效学及其作用机理研究

黄显章  
【摘要】:金刚藤(Smilax china L.)又名菝葜,为百合科(Lillacaee)菝葜属的一种多年生落叶攀援灌木,根茎入药。该中药材收载于2010年版《中国药典》,具有祛风利湿、解毒散瘀的功效;其中药制剂金刚藤胶囊临床用于治疗妇科炎症疾患,效果确切。本论文在前期实验室研究基础上,对金刚藤抗炎有效物质部位(含黄酮和皂苷、鞣质类成分)进行了系统的药理学研究,旨在诠释该中药材的药效物质基础,为其中药制剂的临床疗效提供科学依据。 系统查阅了国内外金刚藤的植物学、化学成分、药理学和临床研究文献,完成了综述。 据文献报道,金刚藤药材所含黄酮、皂苷和鞣质类成分具有抗炎、抗菌作用,采用溶剂法和大孔吸附树脂纯化技术,从金刚藤药材中提取纯化得到其有效物质部位(总黄酮33%,总皂苷13%,鞣质29%),从而为金刚藤有效物质部位与金刚藤原制剂抗炎镇痛的药效学比较研究奠定了基础;将金刚藤有效物质部位首先通过明胶沉淀法分离出鞣质,然后通过聚酰胺吸附色谱法洗脱出皂苷,富集黄酮类成分,得到金刚藤总黄酮,其含量达74%,从而为探讨金刚藤黄酮类成分的抗炎作用机理奠定了基础。 对金刚藤有效物质部位的抗炎镇痛作用进行了较系统的研究。采用苯酚胶浆注入大鼠子宫造成大鼠慢性盆腔炎模型,探讨金刚藤有效物质部位对慢性盆腔炎模型大鼠子宫炎症的影响;采用二甲苯致小鼠耳肿胀法和鸡蛋清水溶液致大鼠足跖肿胀法探讨其抗炎作用;采用小鼠扭体法观察其镇痛作用。研究结果表明,金刚藤有效物质部位能明显减轻慢性盆腔炎模型大鼠子宫的炎症反应,能明显减轻小鼠耳肿胀及大鼠足跖肿胀反应,能明显减少小鼠的扭体次数,表明金刚藤有效物质部位对大鼠和小鼠致炎模型具有显著的治疗作用,在小鼠扭体试验中表现出良好的镇痛作用,且其部分药效学指标优于原制剂金刚藤胶囊。 金刚藤有效物质部位的体外抑菌作用研究结果表明,金刚藤有效物质部位对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用,其抑菌效果优于金刚藤胶囊;金刚藤有效物质部位对淋球菌亦有抑菌作用,而金刚藤胶囊对照组则无此作用。 以金刚藤有效物质部位能够配制的最大浓度(0.108g/m1)和最大胃容量(1.0ml/20g体重)给小鼠一日二次灌胃给药,使一日总剂量达10.8g/Kg(相当于成人日用量216倍),观察给药后的即时毒性反应和七天内的存活情况,结果未见明显即时毒性反应,观察期内一般情况良好,体重增加,全部小鼠均存活。急性毒性试验表明,观察期内金刚藤有效物质部位安全无毒。 采用苯酚胶浆注入大鼠子宫造成大鼠慢性盆腔炎模型,给药后用酶联免疫法检测大鼠子宫组织中PGE2的含量,用荧光法测定大鼠子宫组织中组胺和5-羟色胺的含量,探讨金刚藤有效物质部位的抗炎作用机理。结果表明金刚藤有效物质部位能够显著减少慢性盆腔炎模型大鼠子宫组织中PGE2、组胺和5-羟色胺的含量,表明金刚藤有效物质部位是通过抑制PGE2、组胺和5-羟色胺等炎症介质的合成及释放途径发挥抗炎作用。 建立了基于TPH-1细胞的COX-1和COX-2体外抗炎模型,利用该模型探讨了金刚藤有效物质部位、金刚藤总黄酮及金刚藤主要有效成分落新妇苷、黄芪苷对COX-2的选择性抑制作用。结果表明,该四种物质对COX-2的抑制作用均有一定的选择性,IC50(COX-1)/IC50(COX-2)均大于1,而金刚藤有效物质部位及总黄酮对COX-2抑制作用较单体成分效果显著,表明了中药多成分的协同作用。 对金刚藤有效物质部位、总黄酮及其主要有效成分落新妇苷、黄芪苷对LPS诱导的THP-1细胞释放IL-1β、IL-6和TNF-α等细胞因子的影响进行了研究,结果表明各有效物质均能不同程度的抑制IL-1β、IL-6和TNF-a的生成与释放,以及能不同程度降低IL-1β、IL-6和TNF-amRNA的表达,其中金刚藤有效物质部位、金刚藤总黄酮对IL-1β、IL-6和TNF-α的抑制作用更为显著。由此可以推测,金刚藤有效物质抑制细胞产生IL-1β、IL-6和TNF-α等细胞因子是其发挥抗炎作用的另一途径。
【学位授予单位】:湖北中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R285;R284

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【参考文献】
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