收藏本站
《湖北中医药大学》 2017年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

活血消瘿方治疗结节性甲状腺肿的临床经验及调控PI3K/Akt信号通路的机制研究

曾明星  
【摘要】:目的:通过中医理论研究,提高临床辨治结节性甲状腺肿水平;通过对活血消瘿方临床应用经验的研究,提高临床应用能力;通过活血消瘿方对PI3K/Akt信号通路的调控机制研究,探索其作用的具体靶点。方法:(1)理论探讨:通过查阅古今文献,对结节性甲状腺肿的中医病名、病因病机、治疗进行了总结,特别是对痰血瘀阻这一重要病机进行了系统研究。(2)活血消瘿方临床应用经验研究:从其组方、各药药效、药物学、制作工艺、临床应用规律等方面进行了总结。(3)实验研究:将SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为6组,于SPF级实验室中分笼、恒温、恒湿饲养。适应性饲养2周后,予0.1%的PTU溶液灌胃造模8周。自第9周始,给予药物灌胃4周。4周后,腹腔注射麻醉:心脏取血,分离血清,使用Elisa法检测血清TGF-α水平;分离甲状腺组织:取左侧甲状腺一部分用于制作石蜡切片及行TUNEL法检测细胞凋亡,一部分用于行qRT-PCR检测PI3KmRNA、AktmRNA及mTORmRNA表达水平;取右侧甲状腺行Western-Blot检测PTEN、EGFR、ERK1/2、BAX、CyclinD1、FOXO3a蛋白表达情况,收集数据,进行统计学分析。结果:(1)理论研究:甲状腺实性结节可以用“瘿结”命名,以甲状腺结节为主要表现的结节性甲状腺肿可以用“结瘿”命名。正气亏虚是结节性甲状腺肿发生的内因,情志失调是其发生的诱因,饮食起居失常是其高发的重要原因,痰瘀贯穿于其整个病程之中,是其重要的病理环节,也是导致其迁延难愈及复发的潜在因素。痰血瘀阻在结节性甲状腺肿中既有痰瘀同病的一般特点,也具有其自身特点,临床主要表现为:甲状腺肿大、甲状腺局部疼痛、甲状腺结节等。在不同病证中的表现不同,在继发或并发症中的表现不同,病情轻重不同、表现也不同。结节性甲状腺肿痰血瘀阻主要有以下几种形式:肝郁气滞,痰瘀互阻;火毒炽盛,痰凝血瘀;脾虚失运,痰滞血瘀;阴虚火旺,痰结瘀阻;阳虚寒凝,痰瘀内生。在治疗时需:明确痰瘀的主次、轻重及层次;以调气畅志为先;注意饮食宜忌、慎起居;注意兼症的治疗;随症配伍;内外合治、慢病缓图;防变防复。从痰瘀论治结节性甲状腺肿有八大治法:理气化痰活血、活血化痰消瘿、清热化痰活血、健脾化痰活血、养阴化痰活血、温阳化痰活血、化痰活血软坚、宣肺化痰散结,临床需针对具体的疾病进行具体分析,灵活运用。(2)活血消瘿方对病程小于6个月、低回声、囊性、边界清楚、无血供或低血供、结节最大直径小于3厘米的结节性甲状腺肿结节效果较好,疗程以3-6个月为宜。(3)在组织病理学方面:模型组可见:滤泡肿胀,大小差异明显,小部分融合成大泡,大部分变小;上皮排列多不规则,由单层上皮发展为复层上皮,滤泡上皮内伸形成乳头状的复杂结构;局部滤泡增生明显,形成团块,周围血管丰富,表明结甲模型复制成功。药物干预后:滤泡肿胀减小,内部乳头状结构减少,周围增生减少,血管生成减少,上皮细胞排列较为规则,且随着活血消瘿方浓度的增加改善愈加明显。(4)甲状腺细胞凋亡指数(tunel法)检测显示:模型对照组凋亡指数显著降低,与空白对照组相比,差异具有统计学意义(p0.01),说明在结节性甲状腺肿大鼠模型中存在抵抗凋亡现象。与模型对照组相比,西药组及活血消瘿方干预组,各大鼠甲状腺组织的凋亡指数均显著升高,差异均具有统计学意义(p0.01)。西药干预组与中药干预组比较:西药组与活血消瘿方高剂量组凋亡指数无统计学差异(p0.05),而明显高于活血消瘿方低、中剂量组,差异具有统计学意义(p0.01)。活血消瘿方各剂量组之间比较:呈现剂量依耐性变化,即凋亡指数:高剂量组中剂量组低剂量组,差异具有统计学差异(p0.01)。(5)qrt-pcr法检测各组大鼠甲状腺mrna表达显示:与空白对照组相比,模型对照组pi3kmrna、aktmrna及mtormrna的表达量均升高,差异具有显著统计学意义(p0.01),说明在结节性甲状腺肿大鼠模型中存在pi3k/akt信号通路的异常激活。与模型对照组相比,活血消瘿方中、高剂量组pi3kmrn、aktmrna及mtormrna的表达量均有所下降,差异具有显著统计学意义(p0.01);西药干预组及活血消瘿方低剂量组变化均不明显,差异无统计学意义(p0.05)。西药干预组与中药干预组相比:西药干预组与活血消瘿方低剂量组差异无统计学意义(p0.05),与活血消瘿方中、高剂量组差异具有显著统计学意义(p0.01)。中药各干预组之间比较:高剂量组优于中剂量组,中剂量组优于低剂量组,差异具有显著统计学差异(p0.01)。(6)western-blot法检测大鼠甲状腺组织相关蛋白表达显示:与空白对照组相比,模型对照组pten、bax及foxo3a蛋白的表达量均降低,差异具有显著性统计学意义(p0.01)。与模型对照组相比:活血消瘿方中、高剂量干预组pten、bax及foxo3a蛋白表达量均有所上升,差异具有显著统计学意义(p0.01);活血消瘿方低剂量组与西药干预组pten、bax及foxo3a蛋白表达量无明显变化,差异无统计学意义(p0.05)。西药干预组与中药干预组相比:西药组与活血消瘿方低剂量组差异无统计学意义(p0.05),与活血消瘿方中、高剂量组差异具有显著统计学意义(p0.01)。中药各干预组之间比较:高剂量组优于中剂量组,中剂量组优于低剂量组,差异具有显著性统计学差异(p0.01)。与空白对照组相比:模型对照组egfr、erk1/2及cyclind1蛋白的表达量均升高,差异具有统计学意义(p0.01)。与模型对照组相比:活血消瘿方中、高剂量组egfr、erk1/2及cyclind1蛋白表达量均下降,差异具有显著统计学意义(p0.01);西药干预组及活血消瘿方低剂量组下降不明显,差异无统计学意义(p0.05)。西药干预组与中药干预组相比:西药干预组与活血消瘿方低剂量组差异无统计学意义(p0.05),与活血消瘿方中、高剂量组差异具有显著统计学意义(p0.01)。中药各干预组之间比较:高剂量组优于中剂量组,中剂量组优于低剂量组,差异具有显著统计学意义(P0.01)。(7)Elisa法检测大鼠血清TGF-α显示:与空白对照组相比,模型对照组血清TGF-α升高,差异具有统计学意义(P0.01)。与模型对照组相比:活血消瘿方中、高剂量干预组血清TGF-α均下降,差异具有显著统计学意义(P0.01);西药干预组及活血消瘿方低剂量组下降不明显,差异无统计学意义(P0.05)。西药干预组与中药干预组相比:西药干预组与活血消瘿方低剂量组差异无统计学意义(P0.05),与活血消瘿方中、高剂量组差异具有显著统计学意义(P0.01)。中药各干预组之间比较:高剂量组优于中剂量组,中剂量组优于低剂量组,差异具有显著统计学意义(P0.01)。结论:(1)结节性甲状腺肿中医理论体系完善,痰血瘀阻的病机理论对于临床论治具有重大的指导意义;(2)活血消瘿方理法方药完备,工艺完善,特色明显,值得进一步推广应用;(3)结节性甲状腺肿模型大鼠存在凋亡抵抗现象,而P13K/Akt信号通路的激活可能是其抵抗凋亡的具体机制之一;(4)活血消瘿方可通过调控P13K/Akt信号通路相关基因及蛋白的表达而诱导凋亡、抑制增殖,进而发挥治疗及防治恶变的作用,具体机制为:通过升高PTEN蛋白的表达,防止结节恶变;升高血清TGF-α水平,继而激活EGFR的表达,抑制PI3K/Akt信号通路激活,上调FOXO3a蛋白的表达,抑制CyclinD1的活性,延缓细胞生长,抑制增殖;促进BAX蛋白表达,诱导凋亡的发生;下调ERK1/2蛋白表达,抑制CyclinD1的活性,激活FOXO3a的表达而抑制增殖;下调mTOR基因的表达,抑制与增殖有关蛋白质的翻译,抑制细胞增殖。
【学位授予单位】:湖北中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R259

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 牛伟新,秦新裕,王承棓;结节性甲状腺肿的临床病理分析[J];上海医学;2000年12期
2 刘东坡,杨植,程德敏;结节性甲状腺肿并发急性化脓性甲状腺炎诊治体会(附11例分析)[J];中国实用外科杂志;2000年02期
3 孙学军,黄凤瑞,李银良,褚海波,潘龙文;结节性甲状腺肿36例术后复发原因和预防[J];临床军医杂志;2001年04期
4 闫剑平,吴乃中;结节性甲状腺肿继发淡漠型甲亢1例报告[J];华北煤炭医学院学报;2001年01期
5 邓如岗,王志明,吕新生,李新营,唐杰荣,张鸽文;结节性甲状腺肿的外科治疗[J];中国普通外科杂志;2004年05期
6 梁平;;手术治疗结节性甲状腺肿的临床分析[J];中国当代医药;2010年06期
7 翟文裕;吴冬梅;;结节性甲状腺肿术后复发相关因素分析及治疗[J];新疆医学;2013年05期
8 袁中平;;结节性甲状腺肿治疗要分别对待[J];老友;2007年11期
9 樊世林,妥占录;结节性甲状腺肿并出血纤维化骨化一例[J];临床外科杂志;2000年01期
10 王文华;结节性甲状腺肿临床与病理42例分析[J];浙江临床医学;2001年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李同美;高下;丁小琼;;结节性甲状腺肿的癌变[A];中华医学会第十次全国耳鼻咽喉-头颈外科学术会议论文汇编(下)[C];2007年
2 陈如意;;彩超诊断结节性甲状腺肿并发腺瘤25例[A];中国超声医学工程学会第八届全国腹部超声学术会议论文汇编[C];2010年
3 孙忠民;李飞燕;尚东;党晓敏;杨岚;;1例非毒性结节性甲状腺肿肺、肋骨转移[A];中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编[C];2013年
4 马军;;西黄丸治疗结节性甲状腺肿患者1例[A];西黄丸临床应用研究论文集[C];2009年
5 陈如泉;;结节性甲状腺肿诊治的几个问题[A];内分泌代谢病中西医结合研究——临床与基础[C];2010年
6 谷莹;;甲状腺微小乳头状癌与微小结节性甲状腺肿的超声鉴别诊断[A];2012年浙江省超声医学学术年会论文集[C];2012年
7 温建平;金有靓;;结节性甲状腺肿彩色超声诊断及误诊分析[A];中国超声医学工程学会第八届全国腹部超声学术会议论文汇编[C];2010年
8 于明德;;十二指肠多发性憩室并结节性甲状腺肿1例[A];第十三届全国临床医学影像学术会议论文汇编[C];2003年
9 张一峰;徐辉雄;刘畅;王帅;吴蓉;刘媛媛;郭乐航;;声脉冲辐射力弹性成像在结节性甲状腺肿中的初步研究[A];中国超声医学工程学会第三次全国浅表器官及外周血管超声医学学术会议(高峰论坛)论文汇编[C];2011年
10 涂晓坤;陈继东;陈如泉;;活血消瘿方对结节性甲状腺肿大鼠甲状腺FGF-2表达的影响[A];中华医学会第十二次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2013年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 郑曲;富碘复方瘿宁合剂治疗结节性甲状腺肿临床经验总结及实验研究[D];辽宁中医药大学;2015年
2 曾明星;活血消瘿方治疗结节性甲状腺肿的临床经验及调控PI3K/Akt信号通路的机制研究[D];湖北中医药大学;2017年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王翔宇;结节性甲状腺肿的中医分型及与尿碘的相关性探讨[D];湖北中医药大学;2015年
2 杨雯雯;结节性甲状腺合并甲状腺癌的临床特征分析[D];新疆医科大学;2015年
3 柏洋;结节性甲状腺肿伴有甲状腺癌病例的危险因素分析[D];大连医科大学;2015年
4 张雯;贝牡莪消丸治疗结节性甲状腺肿的临床疗效观察[D];黑龙江中医药大学;2016年
5 王盼盼;理气消瘿方治疗结节性甲状腺肿的临床疗效观察[D];湖北中医药大学;2016年
6 郭巍;温通法治疗阳虚络阻型结节性甲状腺肿的临床疗效观察[D];湖北中医药大学;2016年
7 谢维捷;中医情志因素与结节性甲状腺肿发病的相关性研究[D];广州中医药大学;2014年
8 王军;80例甲状腺腺瘤与结节性甲状腺肿的彩色多普勒超声鉴别诊断[D];山西医科大学;2009年
9 付言涛;结节性甲状腺肿再次手术原因分析及对策[D];吉林大学;2005年
10 刘立彬;结节性甲状腺肿与尿碘的相关性研究以及NIS在结节性甲状腺肿中的表达[D];天津医科大学;2014年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026