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《湖北中医学院》 2002年
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肾衰合剂对大鼠实验性急性肾衰竭的防治作用及其机理研究

周瑾  
【摘要】: 目的:肾衰合剂是导师涂晋文教授针对急性肾衰竭(ARF)“热、瘀、湿、毒”的主要病机特点,以清热、解毒、化瘀泄浊、凉血养阴为治疗大法,并结合现代研究成果拟定的经验复方,应用于临床取得了较好疗效。为了探索一条运用中药复方结合透析疗法降低重症ARF病死率的有效途径,本课题着重研究了肾衰合剂对实验性急性肾衰竭大鼠模型的影响,并从肾脏血流动力学、自由基损伤、钙超载、致炎性细胞因子、表皮生长因子等方面,深入探讨了其防治急性肾衰竭可能的作用机制,为临床推广应用该复方提供充分的实验依据。 方法:雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药维拉帕米组(verapamil,Vp)及中药肾衰合剂组(SSM)共四组,以肌注甘油法建立大鼠急性肾衰竭模型。正常组及模型组于造模同时均予以生理盐水0.1ml·kg~(-1)灌胃,西药组及中药组则分别予以Vp0.4mg·kg~(-1)、SSM22.5g·kg~(-1)灌胃,并按此剂量每天灌胃1次,直至处死。分别于造模后24hr,(1)观测各组大鼠存活率及肾功能(BUN、Scr),并以光镜观察造模后不同时相(24hr、3d、5d)肾组织形态改变;(2)电镜观察肾脏组织的超微结构;(3)分别采用放免分析法及硝酸还原酶法测定血ET、TNF-α及NO;(4)以机械筛网分离结合酶消化法分离单个肾小管上皮细胞,采用荧光示踪法测定[Ca~(2+)]_i;(5)采用黄嘌呤氧化酶法及硫代巴比妥酸法检测大鼠肾皮质SOD、MDA;(6)分别于造模后不同时相(24hr、3d、5d),采用免疫组化法及原位杂交法,检测肾组织PCNA及EGFmRNA的表达。 结果:与模型组相比,SSM能(1)提高ARF大鼠的存活率,降低24hr时Scr及BUN,改善肾功能,其疗效略优于维拉帕米;(2)减轻ARF肾脏病变程度,减少24hr肾小管坏死数及管腔内管型数;(3)对肾脏的超微结构如肾小管上皮细胞微绒毛、线粒体、内质网、肾小球上皮细胞足突、内皮细胞等形态结构均有一定的保护作用,其疗效略优于维拉帕米;(4)提高肾皮质SOD活性,降低MDA含量;(5)提高血清NO水平,同时降低血浆ET含量;(6)显著降低血清TNF-α的水平,疗效明显优于维拉帕米;(7)拮抗小管上皮细胞[Ca~(2+)]_i的升高;(8)使ARF中期(第3d时)肾组织病变较同期其它两组明显减轻,并使肾小管细胞再生修复提前,至ARF恢复期(第5d时)肾组织结构恢复重建良好;作用明显优于维拉帕米;(9)促进ARF中期肾小管上皮细胞PCNA的表达及EGF前体mRNA的合成,从而增加EGF的合成释放,而维拉帕米无此作用。 结论:综上所述,我们认为:(1)肾衰合剂能通过显著调节内皮源性舒缩血管物质的比例,从而改善肾供血供氧,继而减轻肾小管上皮细胞的损伤,拮 湖北中医学晚 傅士研允生毕业论文 抗钙超载,洁抗氧自由基损伤,并能清除炎症始动介质,从而起到了改善肾功 能、减轻肾脏病变程度、提高ARF存活率的作用;(2)同时通过促进ARF中期 小管上皮细胞合成释放表皮生长因子;促进并加快了其增殖,使肾脏处于病理 损伤状态下的时间缩短,肾组织的再生修复提前,因而缩短了病程,而西药维 拉帕米无明显作用。 总之,肾衰合剂对ARF具有良好的保护和加速修复的作用,其疗效确切; 具有广泛的临床应用前景。
【学位授予单位】:湖北中医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R277.51

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