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《湖北中医学院》 2003年
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前列腺增生细胞信号因子表达及仙甲汤调控机制的研究

曹继刚  
【摘要】: 目的 探讨前列腺增生的基本病机,从细胞信号因子角度研究前列腺增生的病理机制,初步阐明仙甲汤抑制前列腺增生的作用机理,初步揭示前列腺增生“肾虚血瘀”病机理论的科学内涵。 方法 ①本实验设6组:将90只3月龄SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠随机取15只作正常对照组,其余75只进行造模。经阴囊摘除双侧睾丸,随机分为模型组、癃闭舒组、仙甲汤低剂量组、仙甲汤中剂量组、仙甲汤高剂量组,从去势第8天起,每只大鼠皮下注射丙酸睾酮,连续30天。②检测各组大鼠前列腺指数及光镜观察前列腺组织形态学的变化。③透射电镜观察各组大鼠前列腺细胞超微结构的变化。④放射免疫法检测各组大鼠血清及前列腺组织性激素含量的变化。⑤免疫组化法观察各组大鼠前列腺组织相关生长因子EGF、TGF-β_1表达情况。⑥原位杂交法观察各组大鼠前列腺组织蛋白激酶A(PKAmRNA)、蛋白激酶C(PKCmRNA)表达情况。⑦免疫组化法观察各组大鼠前列腺组织凋亡抑制基因蛋白bcl-2和凋亡诱导基因蛋白bax表达情况。⑧流式细胞术检测各组大鼠前列腺细胞凋亡率的变化。 结果 ①大鼠前列腺重量、前列腺指数与上皮细胞高度:模型组显著高于其他各组(P<0.01),仙甲汤高剂量组在这几方面与正常组比较无显著性差异(P>0.05),且优于癃闭舒组(P<0.05)。②大鼠前列腺细胞超微结构:模型组有明显增生性改变,仙甲汤各剂量组前列腺细胞增生性改变较模型组显著减轻。③双氢睾酮含量:模型组大鼠血清与前列腺组织双氢睾酮含量均明显高于正常组(P<0.01),而仙甲汤各剂量组较模型组显著下降(P<0.01)。④EGF、TGF-β_1阳性表达率:模型组大鼠前列腺组织EGF阳性表达率与正常组、仙甲汤中剂量组和高剂量组及癃闭舒组比较有极显著性差异(P<0.01),TGF-β_1阳性表达率与仙甲汤高剂量组及正常组有显著差异(P<0.05);仙甲汤高剂量组TGF-β_1阳性表达率与正常组无显著性差异(P>0.05)。⑤PKAmRNA、PKCmRNA阳性表达率:正常组大鼠前列腺组织PKAmRNA阳性表达率最高,而模型组阳性表达率最低,与仙甲汤各剂量组及癃闭舒组比较有极显著性差异(P<0.01);PKCmRNA阳性表达率相反,正常组最低,各治疗组极显著低于模型组(P<0.01)。⑥bcl-2、bax阳性表达率:模型组bcl-2、bax表达率与正常组比较有显著性差异(P<0.05),与仙甲汤低剂量组比较无显著性差异(P>0.05),而仙甲汤中剂量组、高剂量组及癃闭舒组与正常组比较无显著性差异(P>0.05)。⑦细胞凋亡率:正常前列腺细胞存在一定的凋亡率,而模型组前列腺细胞凋亡率显著下降(P<0.01);仙甲汤各剂量组细胞凋亡率又显著高于模型组和正常组(P<0.01)。 结论 本课题提出了“肾虚血瘀”是前列腺增生基本病机的观点,并首次根据肾主生长发育的理论阐释了前列腺增生的发病机理。通过实验研究发现模型组大鼠前列腺组织双氢睾酮含量明显升高,TGF-β_1、bax、PKAmRNA阳性表达率下降,EGF、bcl-2、PKCmRNA阳性表达率上升,前列腺细胞凋亡率下降,前列腺重量增加。说明前列腺组织双氢睾酮积聚、生长因子调控失衡、蛋白激酶信号因子调控紊乱、凋亡基因表达不平衡,前列腺细胞凋亡受到抑制,是前列腺增生的主要发病机制。实验研究表明,仙甲汤可显著减轻模型大鼠前列腺重量,降低上皮细胞高度,降低前列腺组织双氢睾酮含量,提高前列腺组织TGF-β_1、bax、PKAmRNA 博士学位论文 阳性表达,降低前列腺组织即F、bel《、PKCmRNA阳性表达,促进前列腺细胞凋 亡。推测其作用机制可能是通过调控前列腺细胞性激素信号通路、生长因子信号 通路和蛋白激酶信号通路,诱导前列腺细胞凋亡以抑制前列腺的增生。 仙甲汤是根据前列腺增生基本病机“肾虚血瘀”理论立法组方的,其抑制实 验性前列腺增生的作用机制初步揭示了前列腺增生“肾虚血瘀”病机理论的科学 内涵。
【学位授予单位】:湖北中医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R277.52

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【参考文献】
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