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《湖北中医学院》 2004年
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化痰活血方对高脂血症大鼠降脂作用及其机理的实验研究

叶勇  
【摘要】: 目的 对文献进行整理分析,探讨痰浊瘀血在高脂血症形成中的作用。通过观察化痰活血方对高脂血症大鼠及其含药血清对牛主动脉内皮细胞的影响,揭示该方对高脂血症的作用及作用机制。 方法理论研究:采用文献搜集整理、分析的方法。实验研究分在体和体外两部分:1、在体观察化痰活血方对高脂血症大鼠的影响,采用高脂乳剂复制高脂血症大鼠模型,将大鼠随机分成空白组,模型组,阳性对照组(力平脂),化痰活血方大、中、小剂量组。(1)酶法检测血中TC、TG、LDL_(-C)、HDL_(-C)、HDL_(2-C)的含量;免疫比浊法检测ApoAI、ApoB_(100)的含量;非变性聚丙烯酰胺梯度胶电泳法检测血浆中sdLDL含量;(2)通过检测全血粘度、血浆粘度、红细胞压积,观察血液流变学变化;(3)黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,TBA法测定MDA含量,硝酸还原酶法测定NO含量。(4)光镜观察肝脏形态学的变化。(5)免疫组化法检测肝脏LDL-R的表达水平。(6)逆转录-聚合酶链反应法检测LDL-RmRNA、PPARαmRNA、ACOmRNA的表达水平。2、体外观察化痰活血方含药血清对牛主动脉内皮细胞eNOS的影响,用化痰活血方含药血清作用于3-5代牛主动脉内皮细胞10h后,应用Western印迹法从蛋白质水平检测该方含药血清对牛主动脉内皮细胞eNOS的影响。 结果 理论研究认为高脂血症主要病因病机为饮食不节,脾胃受损;年老体弱,脏气虚衰;情志内伤,脏腑失调;痰浊瘀血,阻碍气机等。本病与五脏相关,病变中心在脾。从本病的演变、导师临床经验及现代研究结果认为,痰浊、瘀血为本病的病机关键。实验表明化痰活血方具有以下作用:1、显著降低大鼠血中TC、TG、LDL_(-C)、sdLDL、ApoB_(100)水平,与模型组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01);显著增加大鼠血清HDL_(-C)、HDL_(2-C)、ApoAI的水平,与模型组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01);2、降低全血粘度(高、低切)、血浆粘度、红细胞压积值,与模型组比较有显著性差异(P<0.01);3、显著增加大鼠血NO、SOD的水平,降低MDA的水平,与模型组比较有显著性差异(P<0.01);4、显著增加LDL-R在大鼠肝脏的表达,与模型组比较有显著性差异(P<0.05);5、显著增加LDL-RmRNA、PPARαmRNA、ACOmRNA在大鼠肝脏的表达,与模型组比较有显著性差异(P<0.01);6、病理学观察显示:空白组肝小叶清晰可见,结构正常,肝组织的形态学表现正常;模型组肝组织出现了弥漫性肝细胞脂肪变性,肝细胞变大,胞浆内脂滴多为大泡型,细胞核被挤向细胞周边;化痰活血方各组与力平脂组肝组织仅见轻度脂肪变性。7、化痰活血方含药血清明显增加牛主动脉内皮细胞eNOS蛋白质表达水平。 结论 1、理论研究表明,高脂血症与五脏相关,病变中心在脾,痰浊、瘀血为病机关键。2、实验研究表明,化痰活血方降低大鼠血中TC、TG、LDL_(-C)、sdLDL、ApoB_(100)水平,升高HDL_(-C)、HDL_(2-C)、ApoAI水平,具有降脂作用;其降脂作用机制可能是通过上调LDL-R、LDL-RmRNA、PPARαmRNA、ACOmRNA的表达,促进脂质的合成代谢。降低大鼠的全血粘度、血浆粘度及红细胞压积;降低大鼠血清中MDA含量,升高SOD活性和NO含量;能保护大鼠肝脏细胞结构。该方含药血清显著增加牛主动脉内皮细胞eNOS蛋白质表达水平,纠正高脂血清所引起的eNOS的下调,具有保护血管内皮细胞功能。
【学位授予单位】:湖北中医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R259.8

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