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《湖北中医学院》 2005年
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涤痰汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用研究

张勇  
【摘要】:目的: 对于缺血性脑卒中急性期的治疗,溶栓治疗是目前公认最有前景的治疗方法,但同时带来的再灌注损伤限制了其在临床上的应用。再灌注损伤是一个多环节、多级联的病理生理过程,因为中药复方存在化学成分多样性及生物活性广泛性的特性,从而为阻断脑缺血再灌注损伤发生、发展的多途径、多水平损害提供了理论上的可能性。涤痰汤是中医治疗以痰证为主要病机的脑部疾患的常用方剂,有大量临床研究表明,以涤痰汤化裁治疗缺血性脑卒中有确切疗效,故本研究拟观察涤痰汤对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。有人认为中医的痰与现代医学的炎症因子及其产物密切相关,故拟从对缺血再灌注损伤大鼠脑组织TNF-α表达及细胞凋亡率的影响方面探讨涤痰汤的保护机制。本实验可为开发有效的神经保护剂提供科学依据,从而扩大溶栓治疗的临床应用。 方法: 清洁级成年Wistar大鼠54只,体重250~300g,随机分为假手术组、模型组和涤痰汤组。采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,缺血2h后实现再灌注。待大鼠苏醒,假手术组及模型组予生理盐水灌胃,治疗组予涤痰汤灌胃,每日2次,连续3天。术后72h,观察各组大鼠的整体状念、神经功能缺损程度、脑组织含水量、脑梗死范围、病理形念学的改变,并采用免疫组化法检测脑组织TNF-α的表达情况和采用流式细胞仪检测脑细胞凋亡率的变化。 结果: 1.术后24h假手术组大鼠精神状态良好,饮食正常,整体状态同术前。模型组和涤痰汤组精神明显较术前差,饮食减少,毛色暗淡,自发活动明显减少。术后72h,模型组整体状态无明显改善,与模型组比较,涤痰汤组大鼠整体状态有明显改善。 2.术后2h,假手术组大鼠无神经功能缺损,模型组、涤痰汤组大鼠神经功能缺损评分均为1分;术后24h,模型组、涤痰汤组大鼠神经功能缺损程度皆明显加重;术后72h,涤痰汤组大鼠神经功能缺损程度明显改善,与模型组比较有显著性差异(P0.05)。 3.术后72h,假手术组大鼠脑组织含水量为(78.87±0.58)%,模型组大鼠脑组织含水量为(82.15±0.47)%,与假手术组比较,模型组脑组织含水量显著增高(P0.01):涤痰汤组脑组织含水量为(80.91±0.68)%,与模型组比较显著降低(P0.01)。 4.术后72h,假手术组大鼠未见梗死脑组织;模型组脑组织梗死范围为(23.42±1.92)%;涤痰汤组脑梗死范围为(20.38±2.02)%,与模型组比较显著降低(P0.01)。 5.HE染色显示,假手术组大鼠脑组织缺血区的神经细胞、细胞骨架及血管均未见受损。模型组缺血中心区神经元、胶质细胞和血管大量坏死,可见少量皱缩 湖北中医学院f吹卜学位论文 涤疾汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护研究 神经元和小胶质细胞,细胞骨架消失或严重破坏。半暗带可见部分缺血变化的皱 缩神经元,较多星形胶质细胞和增生的大量小胶质细胞,细胞骨架轻微改变。与 模型组比较,涤痰汤组大鼠脑组织缺血区范围明显缩小,受损程度明显减轻。 6.术后72h,免疫组化显示,脑组织中染色呈深棕色的为TNF一。阳性细胞, 主要见于受损的神经细胞及部分胶质细胞,假手术组大鼠皮质中正常神经元的胞 浆可见TNF一Q少许表达,单位面积阳性细胞数为(6.56士1 .68)个;模型组大鼠 缺血侧皮质的神经细胞可见TNF一Q大量表达,单位面积阳性细胞数为(125.07士 13.48)个,与假手术组比较显著增高(P0.01):涤痰汤组大鼠缺血侧皮质中TNF- 。的表达显著减少,单位面积阳性细胞数为(105.34士10.66)个,与模型组比较 有显著性差异(P0.05)。 7.术后72h,流式细胞仪检测发现,假手术组细胞凋亡率为(7 .25士4.38)%; 模型组脑组织细胞凋亡率为(37.50士7.36)%,与假手术组比较有显著差异 (P0 .01);涤痰汤组脑组织的细胞凋亡率为(29.18士4.99)%,明显低于模型组 (P0.05),提示涤痰汤对细胞凋亡有明显抑制作用。 结论: 1.通过观察各组大鼠的整体状态、神经功能缺损程度、脑组织含水量、脑梗 死范围、病理形态学的改变,表明涤痰汤对大鼠脑缺血再灌注损伤具有神经保护 作用。 2.涤痰汤可能是通过抑制大鼠缺血侧脑组织INF一。的表达及细胞凋亡的机制 发挥神经保护作用。 关键词: 涤痰汤脑缺血再灌注损伤神经保护 肿瘤坏死因子细胞凋亡
【学位授予单位】:湖北中医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R285.5

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