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《湖北中医学院》 2005年
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反流宁汤对反流性食管炎作用及机制的实验研究

秦海金  
【摘要】:目的: 探讨反流宁汤对十二指肠胃混合性反流性食管炎(Reflux esophagitis,RE)模型大鼠的作用、反流性食管炎发生及其易复发的可能机制。 方法: 140只清洁级Wistar大鼠在安静环境下饲养,自由进食、饮水1周后,留取24只作为空白对照组(A组),26只行假手术(即进腹后不进行任何手术再关腹),其余参照文献王雯等通过改良Clark等的方法,行食管十二指肠端侧吻合术造十二指肠胃混合性RE模型(造模前24小时禁食,不禁水)。造模后继续喂养一周(造模后第一天禁食不禁水)后进行分组。于26只行假手术大鼠中随机取24只作为假手术组(B组);90只行食管十二指肠端侧吻合术大鼠中剔除死亡的后取72只随机分为3组,每组24只,分别为模型组(C组)、反流宁汤组(D组)及西药对照组(E组)。分组后继续喂养7天后进行给药。D组予反流宁汤2ml灌胃,一日一次(每ml含生药1.34g);E照组予奥美拉唑混悬液2ml灌胃,一日一次(每ml含生药0.26g);A组、B组、C组给予0.9%的氯化钠注射液2ml灌胃,日一次。于治疗后第7、14、28天每组分别随机取8只断头处死,自胃食管交界上0.5cm处向咽喉部截取2cm食管,作肉眼观察后用10%的甲醛固定、切片,分别做光镜观察及一氧化合酶(Nitric oxide synthase,NOS)、P53及增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的免疫组化检查。结果: 1 给药7天后模型组肉眼观可见食管黏膜病变广泛,点状或条片状,甚至为全周性发红、糜烂,或有溃疡出现,光镜下观察可见食管上皮内炎性细胞浸润、黏膜固有层乳头延伸、鳞状上皮增生及黏膜糜烂或溃疡形成,而空白对照组及假手术组大体肉眼观及光镜观察均正常,说明造模成功。 2 给药7天后反流宁汤组与西药对照组大体肉眼观仍有点状、条片状发红、糜烂或溃疡,但全周性的很少,肉眼观积分两组与模型组相比,明显降低,均有显著性差异(P0.05)。光镜下观察仍可见上皮细胞内炎性细胞浸润、黏膜固有层乳头延伸、鳞状上皮增生及黏膜糜烂或溃疡形成,光镜下积分两组与模型组相比有显著性差异(P0.05)。给药14天及28天后反流宁汤组与西药对照组的食管黏膜的大体肉眼观及光镜下观察基本上都恢复正常,两组与模型组相比有显著性差异(p0.05),而与空白对照组比较则无显著性差异(p0.05);反流宁汤组与西药对照组相比则无显著性差异(P0.05)。说明对照所用西药与反流宁汤治疗RE在组织学水平均有效,且二者疗效均相当。 3 假手术组在给药7天后,PCNA的免疫组化染色灰度值较正常组高,二者有显著性差异,而NOS和P53的与空白对照组相比则无显著性差异(p0.05),但在给药14天与给药28天后NOS、P53及PCNA的免疫组化染色灰度值与空白对照组相比均无显著性差异(p0.05),所以可排除手术创伤对实验结果的影响。 4 NOS、P53及PCNA的免疫组化染色灰度值,模型组与空白对照组比较明显较高,有显著性差异(p0.05),而在分别给药7天、14天、28天后反流宁汤组和西药对照组与模型组相比明显降低,有显著性差异(p0.05),说明RE的发生可能与食管内NOS、P53及PCNA的表达有关。 5 西药对照组与反流宁汤组的食管肉眼观及光镜下观察在给药14天后均已 溯北中医学陇 2002级硕士研究生毕业论文 经恢复正常,与空白对照组及给药28天后相比均无显著性差异(p0 .05);但在 给药28天后,其NOS、P53及PCNA的免疫组化染色灰度值与空白对照组仍较高, 西药对照组与其相比有显著性差异(p0 .05),而反流宁汤组与其相比则无显著 性差异(p0.05)。反流宁汤治疗RE,与西药对照相比能降低其复发率〔习,结合 此次实验结果,说明反流性食管炎在组织学水平治愈后,而分子学水平未完全恢 复正常可能是其易复发的关键原因,而食管内NOS、P53及PCNA的含量未完全恢 复可能是其原因之一;反流宁汤在治疗RE组织学损害的基础上可较好的使食管 豁膜内NOS、P53及PCNA的含量恢复到接近正常、甚至正常水平,可能是其降低 RE复发的原因之一。 结论: 反流宁汤对实验性RE的治疗有效;RE的发生可能与食管赫膜内NOS、P53、 PCNA的表达有关;RE易复发可能与治疗后食管勃膜内NOS、P53、PCNA的表达 仍未完全恢复正常有关;反流宁汤能降低RE的复发率可能与它能较好地恢复食 管豁膜内的NOS、P53及PCNA表达有关。 主题词: 反流宁汤; 反流性食管炎; 一氧化合酶; 增殖细胞核抗原; P53
【学位授予单位】:湖北中医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R285.5

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