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《湖北中医学院》 2006年
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“三联法”对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡与增殖影响的研究

陈洪波  
【摘要】:目的 以中药熏洗、手法弹拨、练功疗法(以下简称“三联法”)治疗兔膝骨关节炎(Osteoarthritis,OA),通过对膝关节软骨标本进行透射电镜超微结构观察,采用流式细胞术、免疫组化、末端原位标记、原位杂交分别检测软骨细胞凋亡与增殖状况。观察“三联法”治疗兔膝OA的效果及其对OA软骨细胞凋亡和增殖的影响,并通过与三法的单独运用、外用扶他林对照比较,研究它们治疗OA疗效的差别,为临床中医药外治OA提供实验依据。 方法 取56只四月龄健康日本大耳白兔,随机分为7组(每组8只):8只不造模作为正常对照组,其余48只用结扎右侧股静脉的方法造模,8周后复制成右膝骨关节炎模型,随后分为模型对照组、中药熏洗组、功能锻炼组、手法弹拨组、三联法组、扶他林组,治疗4周后取兔右膝关节的关节软骨,取外侧胫骨平台制作石蜡切片,股骨外髁作超薄切片,剩余关节软骨作软骨细胞分离。分别进行透射电镜观察,采用流式细胞术、免疫组化、末端原位标记、原位杂交分别检测软骨细胞增殖和凋亡状况。 结果 (1)超微结构观察 三联法组软骨细胞超微结构接近正常对照组,可见细胞形态正常,细胞核呈卵圆形,染色浅,核仁清晰,内质网较多,胞膜完整,基质匀称;模型对照组细胞形态不规则,染色质浓聚,核仁消失,细胞器减少,部分内质网扩大呈囊状;其他各治疗组除可见部分内质网轻度扩大外,各组间软骨细胞超微结构相比无明显差别。(2)软骨细胞凋亡与增殖的影响 软骨细胞TUNEL免疫组化观察凋亡细胞核呈棕黄色,主要位于软骨浅层,各层均有分布。三联法组的表达最低,与其他各组间比较差异有统计学意义(P<0.05);软骨细胞PCNA免疫组化观察PCNA阳性细胞主要位于软骨浅表层,三联法组的表达最高,与其他各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(3)软骨细胞中bcl-2mRNA表达的影响 模型对照组、中药熏洗组、功能锻炼组、手法弹拨组、扶他林组、三联法组显著高于正常对照组(P<0.05);各治疗组显著高于模型对照组(P<0.05),其中尤以三联法组最为显著(P<0.01),但中药熏洗组、功能锻炼组、手法弹拨组、扶他林组之间无明显差异(P>0.05)。 结论 “三联法”能延缓和减少兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡,促使软骨细胞增殖,并维持OA软骨细胞增殖和凋亡的平衡。治疗兔膝骨关节炎比单独运用中药熏洗、手法弹拨、练功疗法和外用扶他林效果更明显。
【学位授予单位】:湖北中医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R274

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【共引文献】
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