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《湖北中医学院》 2006年
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化纤汤对博莱霉素诱导的大鼠肺损伤干预作用的实验研究

陈瑞  
【摘要】:目的:肺间质纤维化是一组早期有肺泡细胞损伤和各种炎性细胞浸润,继后出现胶原纤维沉积,并逐渐演变了弥漫性肺间质纤维化的疾病群。活动性呼吸困难、X线胸片弥漫阴影、限制性通气障碍、弥散功能降低和低氧血症乃至后期的呼吸衰竭为其临床特点。由于目前该病发病率逐年增加,但发病机制尚未完全阐明,又缺乏有效的治疗药物,故寻找行之有效的防治药物是目前医疗界迫切需要解决的问题。因此探讨中医中药防治该病具有广阔前景和深远的意义。本课题观察具有益气通阳、行气活血化痰功能的化纤汤对博莱霉素肺纤维化大鼠疗效,并从其对血清部分细胞因子、肺组织氧自由基、肺组织TGFβ1表达以及线粒体膜流动性等方面的影响,探求其作用机制。 方法:健康144只Wistar大鼠,体重180-240g,随机分为六组:正常对照组(A)、模型组(B)、强的松组(C)、中药大剂量组(D)、中剂量组(E)和小剂量组(F),每组24只。采用气管内滴注博莱霉素造模法造模,各组均于造模后第2天开始灌胃给药。正常对照组与模型组每日一次灌胃生理盐水10ml/kg·bw,强的松组大鼠给予醋酸强的松混悬液,给药剂量为10ml/kg·bw,中药各剂量组分别给予相应浓度中药10ml/kg·bw每日灌胃一次(强的松与中药用量相当于成人常用量,按照体表面积折算)。各组动物分别于7d、14d、28d随机处死8只。①通过观察(HE染色光镜观察和透射电镜观察)化纤汤对博莱霉素肺纤维化模型病理形态学的影响,从而对其治疗作用进行客观评价,并从中重点了解Ⅱ型肺泡细胞线粒体结构改变;②分别采用TBA法和比色法测定肺组织匀浆液MDA及GSH含量,观察化纤汤对肺组织部分氧自由基含量的影响,探讨其对肺纤维化模型肺组织的保护机制;③用ELISA方法检测血清TGFβ1及Th2型细胞因子IL-4水平,观察化纤汤对以上损伤性细胞因子的影响,探讨其对肺纤维化发生和进程的作用机制:④TGFβ1是肺纤维化形成的关键细胞因子,采用RT-PCR法检测肺纤维化大鼠肺组织TGFβ1各时间点表达的影响,观察化纤汤对其的影响,明确化纤汤治疗肺纤维化的部分作用途径;⑤分别用Rhl23和PI染色肺组织细胞悬液,流式细胞仪检测大鼠肺组织中线粒体膜流动性,观察化纤汤对各时间点肺组织中细胞线粒体膜完整性的影响,探求其治疗肺纤维化的另一作用途径(该实验治疗组仅选择中药中剂量组)。 结果:①大鼠博莱霉素肺纤维化模型病理形态学改变:第7天肺泡间隔增厚,伴有炎性细胞浸润,间质内成纤维细胞增多,病灶内肺泡萎缩,肺泡内大量炎性细胞浸润;14d肺泡间隔明显增宽,成纤维细胞和胶原基质明显增多;28d肺泡结构破坏,肺泡壁显著增厚,肺间质纤维化瘢痕形成,毛细血管腔闭塞;超微病理示第7d、14d,Ⅱ型肺泡上皮细胞增生、肿胀,线粒体肿胀,嵴缩短、断裂或消失,甚至空
【学位授予单位】:湖北中医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R285

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