复方甲亢片对甲亢大鼠合并心脏病变的影响及其作用机理研究

【摘要】：目的 通过采用灌胃法诱导建立甲亢大鼠合并心脏病变的模型，运用生化、电镜、高效液相色谱法、逆转录多聚酶链法(RT-PCR)，检测高甲状腺素水平下，大鼠心肌结构、超微结构、生理功能、激素水平、细胞因子、病理基因，确定造模的可靠性。使用复方甲亢片、纯中药、甲巯咪唑等进行干预，比较三种药物的疗效，从而得出结论。探索复方甲亢片治疗甲亢大鼠合并心脏病变的机理，以期为中西药结合治疗甲亢性心脏病提供理论依据。 方法 清洁级SD大鼠60只，体重约250±15g，雌雄各半。随机分为五组，正常组、模型组、纯中药组、复方甲亢片组、甲巯咪唑组。每组十二只。正常组每天上午给以2ml蒸馏水喂服，其余四组均造模。造模方法，左旋甲状腺素钠片混悬液上午喂服，每日1mg／kg，每天一次。连续十七天。自造模第十七天始，正常组仍继续每天上午给以2ml蒸馏水喂服，其余四组均继续造模，继续左旋甲状腺素钠片混悬液上午喂服，每日1mg／kg，每天一次。此外下午加喂正常组与模型组大鼠每日灌2ml蒸馏水，复方甲亢片组每日下午加灌复方甲亢片混悬液2ml(相当于生药8g／kg)，纯中药组每日下午加灌服纯中药液2ml(相当于生药8g／kg)。甲巯咪唑组每日下午加灌服甲巯咪唑液2ml(相当于12mg／kg)。共连续五十天实验结束。实验结束后，每大鼠以20％乌拉坦麻醉(剂量0.5ml／100g体重)，腹腔注射麻醉。以生理二道仪记录心电图，眼眶取血，心脏称重，检测血浆BNP、血清TT_3、TT_4，心肌匀浆测羟普氨酸和Na~+-K~+-ATP酶。心肌HE染色进行病理切片检测，超薄切片进行透射电镜检测。免疫组化检测MMP2、bFGF、TNF-α因子。逆转录-多聚酶链反应法(RT-PCR)检测肌球蛋白重链的表型(α-MHC和β-MHC)。 结果 1、复方甲亢片能比较明显改善甲亢大鼠合并的心脏疾病症状，提高生存率。 2、经检测大鼠血清TT_3、TT_4水平，检测大鼠心率及心律，显示模型组大鼠血清TT_3、TT_4水平、心率和心律失常发生率显著升高。心脏指数为最大。正常组大鼠血清TT_3、TT_4水平、心率和心律失常发生率最低，心脏指数为最低。经药物治疗后所有用药组血清TT_3、TT_4水平都有不同程度降低，心率、心律失常发生率、心脏指数也有不同程度下降。以复方甲亢片组血清TT_3、TT_4水平、心率、心律失常发生率、心脏指数降低为最明显。从统计结果看，正常组与模型组相比P＜0.01，有极显著差异。经治疗后，纯中药组和甲巯咪唑组与模型组相比P＜0.05，均有显著差异，说明两种药物均有效。复方甲亢片组与模型组相比P＜0.01，有极显著差异，与甲巯咪唑和纯中药相比P＜0.05，均有显著差异。说明复方甲亢片有效，并且效果优于纯中药和甲巯咪唑。 3、光镜下检测，HE染色显示正常组心肌细胞排列整齐，横纹清楚，间质较少，几乎看不到成纤维细胞。与正常组相比可见到模型组心