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《湖北中医学院》 2008年
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补肺通络解毒法对肺癌治疗作用及机理的实验研究

倪娅  
【摘要】: 目的:补肺通络解毒方(BTJ)是来自于临床治疗肺癌的有效验方,具有补肺益气、祛痰化瘀、清热解毒、通络消瘤之功效。本课题以中医“络脉络病”理论为指导,应用多种现代医学检测技术在整体、细胞、分子及基因水平上研究补肺通络解毒方抗Lewis肺癌及抗转移作用,并深入探讨其作用的分子机制,为抗肿瘤及抗转移药物的开发及其在临床上的应用提供实验和理论依据。 理论探讨:1、提出“肺虚络痹毒结”是肺癌的基本病机。①脏气亏虚是致病之本:肺气阴两虚是贯穿肺癌始终的主要病机,脾肾虚衰是肺癌病机的最终归宿。②络痹毒结为致病之标:痰瘀痹络是肺癌发生的重要因素,癌毒结聚是肺癌发生的关键。③脏虚络痹相互影响,互为因果。2、根据病机,提出补脏通络解毒是肺癌的基本治疗法则。①补脏以治其本。补脏以气血为先,以阴阳为本。②通络解毒以治其标。通络是治疗肺癌的重要环节,涤毒是治疗肺癌的关键。 方法:以国际公认的肺癌实验研究动物模型—小鼠Lewis肺癌移植瘤模型作为体内试验研究对象,在计算抑瘤率和病理学观察的基础上,运用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测瘤组织细胞周期蛋白Cyclin D1、细胞核抗原(PCNA),TUNEL细胞凋亡原位检测法检测瘤组织细胞凋亡,PCR-ELISA法检测瘤组织端粒酶活性,免疫组织化学法检测瘤组织微血管密度(MVD),RT-PCR法检测瘤组织CD44 mRNA表达,从而对不同剂量的补肺通络解毒方对小鼠Lewis肺癌的抑制作用及其抗移植瘤自发性转移作用进行了系统研究。 结果:1补肺通络解毒方对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及其机制研究 ①补肺通络解毒方低、中、高剂量组及环磷酰胺组瘤重与空白对照组相比均明显降低(P<0.01)。中剂量组抑瘤率可达47.88%。在不同浓度组间比较,中剂量组的抑制作用显著强于低剂量组(P<0.01),但随药物浓度的进一步增加,抑制作用反而显著下降(P<0.01)。 ②瘤组织病理学:光镜下,补肺通络解毒方各组均可见到不同程度的片状坏死区,瘤组织及其周围微血管减少,并可见到细胞凋亡的形态学改变:染色质聚集、细胞核固缩、核碎裂及溶解等,以中剂量组最明显。透射电镜下,可见到药物组肿瘤细胞线粒体明显肿胀,溶酶体和脂质小体增多,细胞核核仁消失、染色质边集于核膜下、染色质浓缩。 ③补肺通络解毒方低、中、高剂量组均能明显降低瘤组织细胞周期蛋白Cyclin D1的表达(P<0.05)。中剂量组的抑制作用显著强于低剂量组和环磷酰胺阳性药物对照组(P<0.01)。但随药物浓度的进一步增加,抑制作用反而显著下降(P<0.01)。 ④补肺通络解毒方低、中、高剂量组均能明显降低瘤组织细胞核抗原(PCNA)的表达。高、中剂量组的抑制作用显著强于低剂量组(P<0.01),但高、中剂量组抑制作用差异不明显(P>0.05)。与环磷酰胺组相比,补肺通络解毒方各组作用略低(P<0.05)。 ⑤补肺通络解毒方低、中、高剂量组均能明显提高瘤组织细胞凋亡指数(P<0.01)。中、高剂量组提高瘤细胞凋亡指数作用强于环磷酰胺阳性对照组(P<0.05,P<0.01)。 ⑥补肺通络解毒方低、中、高剂量组均能明显降低瘤组织细胞端粒酶的活性(P<0.01)。补肺通络解毒方中剂量组对端粒酶活性的抑制作用显著强于环磷酰胺阳性对照组(P<0.01)。 2.补肺通络解毒方抗小鼠Lewis肺癌移植瘤自发性转移作用及其机制研究 ①补肺通络解毒方低、中、高剂量组均能明显降低瘤组织微血管密度(P<0.01),但未表现出明显的剂量效应。补肺通络解毒方中剂量组降低瘤组织微血管密度的作用显著强于环磷酰胺阳性对照组(P<0.01)。 ②补肺通络解毒方中、高剂量组均能明显降低瘤细胞CD44 mRNA表达量(P<0.01),但未表现出明显的剂量效应。与环磷酰胺组相比,补肺通络解毒方中、高剂量组作用略低(P<0.05)。 结论:补肺通络解毒方具有显著抑制小鼠Lewis肺癌及抗移植瘤自发性转移作用;能显著降低瘤细胞Cyclin D1、细胞核抗原(PCNA)、CD44 mRNA的表达,提高瘤细胞凋亡率,降低瘤组织细胞端粒酶的活性,降低肿瘤微血管密度;其抗肿瘤主要分子生物学机理可能与该复方抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、降低端粒酶活性、抑制肿瘤细胞与血管内皮细胞间的粘附、抑制肿瘤新生血管生成有关。提示:补肺通络解毒法是中医治疗肺癌一种有效方法。
【学位授予单位】:湖北中医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R273

【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
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【同被引文献】
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