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柿蒂活性成分的研究

张晓凯  
【摘要】: 柿蒂是柿树科植物柿Diospyros kaki Thumb的干燥宿萼,分布在我国大部分地区,主产河南、山东,福建、河北、山西等地亦产,资源极其丰富.柿蒂柿蒂性味苦、涩、平,具有降逆气,止,呕吐的功用.其富含多种营养元素和活性物质,具有悠久的药用历史及文献记载.但是,这些临床作用与柿蒂的物质基础(活性成分)之间的关系至今尚不完全清楚,此文的目的之一是探索柿蒂的活性成分与临床疗效的关系.二是鉴于柿蒂是林果产业的副产品,储量大,实有进行综合开发利用的必要,以提高企业的经济效益和国家资源的利用率.本文主要对柿蒂化学成分的提取、分离、结构鉴定及其主要活性成分进行了含量测定. 干燥柿蒂粗粉以10倍量95%乙醇渗漉,合并渗漉液,减压回收乙醇,浓缩液加水稀释,搅拌,放置过滤,得滤液和沉淀.将滤液加入到聚酰胺柱,进行柱层析分离,分别得到化合物Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ.取沉淀部分,以碱乙醇溶解、过滤,得滤液,滤液减压回收,残留物加入到柱层硅胶柱上端,进行柱色谱分离,依次用CHCl_3:MeOH梯度洗脱,收集15~25号流份,得到化合物Ⅱ,收集26~30号流份,结晶后,得到化合物Ⅰ。通过熔点测定、TLC、及UV、IR、~1H-NMR、~(13)C-NMR、2D-NMR、MS等的分析,确定了五种化合物结构,分别为:齐墩果酸((3β)-3hydroxy-olean-12-en-28-oic acid,Ⅰ),熊果酸(3β-hydroxy-urs-12-en-28-oicacid,Ⅱ),没食子酸(Gallic acid,Ⅲ),没食子酸乙酯(Ethyl gallate,Ⅳ),槲皮素(Quercetin,Ⅴ),其中没食子酸乙酯首次自柿蒂中分离获得. 采用超声技术提取了柿蒂中的熊果酸与齐墩果酸,并建立了高效液相色谱法测定柿蒂中熊果酸与齐墩果酸含量的方法.色谱条件为:色谱柱为Kromasil C18柱(250 mm×4.mm,5μm,带保护柱),流动相为甲醇:水(88∶12),检测波长209nm,流速0.8 ml/min;柱温28℃.在该条件下,齐墩果酸、熊果酸与其它峰的分离度较高,可得到满意的色谱图.利用外标法进行了定量分析,结果表明高效液相色谱法方法简便、准确易行,结果准确.鉴于熊果酸和齐墩果酸在柿蒂中的含量,实有工业利用的价值.


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