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《湖北中医学院》 2009年
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苈桃抗纤方对肺泡Ⅱ型上皮细胞转化的影响及作用机制

杨毅  
【摘要】: 研究背景:肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)是以运动性呼吸困难进行性加重,以喘息、气短、干咳、喘憋为临床表现,以限制性通气功能障碍、低氧血症、慢性进行性弥漫性肺间质纤维化为特点的肺间质性疾病。肺纤维化既是多种肺疾病、多种系统性疾病的共同结局,又有无原发疾病的特发性肺间质纤维化。 近年来,随着细胞和分子生物学等生命科学理论研究,多种研究手段的应用,从器官、组织、细胞、分子的不同层次,对肺纤维化的发生、诊断、防治的研究不断深入,取得极大的进展。 研究表明,肺纤维化是由早期组织损伤、炎症变化发展而来,而肺部受感染或损伤后,肺泡上皮细胞和是最早受到损伤的靶细胞。由于肺泡表面约93-97%的肺泡Ⅰ型上皮细胞为终末细胞,不能进行分裂增殖,故具有增殖分化能力的肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar typeⅡcell,ATⅡ)是参与组织损伤修复的主要细胞,所以,最初肺损伤后发生于组织修复时的肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转化(epithelial to mesenchymaltransition,EMT)在肺纤维化发生发展过程中发挥着极其重要的作用。 近年来随着对肺纤维化的发病机理的深入研究,无论中、西医均在治疗上取得相当进展。导师在长期的临床实践中,依照经验创立苈桃抗纤方,对肺间质纤维化患者进行雾化治疗,取得了一定的疗效。为了提高它的可信度和可重复性,为临床实践提供更好生命科学理论基础,在本实验中,我们主要研究苈桃抗纤方对肺泡Ⅱ型上皮细胞向问质细胞转化、EMT转化率以及对肺泡Ⅱ型上皮细胞转化过程中相关细胞转导通路的影响,在细胞及分子水平上探讨苈桃抗纤方抗肺纤维化的生物学基础。 目的:由于肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转化(EMT)是发生肺纤维化的重要因素,故在本次实验中,我们应用转化生长因子(transforminggrowth factor TGF-β1)诱导人肺上皮细胞系(A549)EMT发生,观察TGF-β1对A549增殖及形态变化的影响,研究苈桃抗纤方雾滴干预后对肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转化的影响,从基于雾化中药制剂影响EMT发生的角度,初步探讨苈桃抗纤方防治肺纤维化的生物学基础。 方法:使用不同浓度苈桃抗纤方体外干预A549细胞。免疫组化法检测细胞内TGF-β1的相对含量;通过TGF-β1体外诱导细胞EMT的发生,ELISA法检测细胞角蛋白(cytokeratin)及波形蛋白(Vimentin)表达,计算细胞EMT转化率;Real-time PCR法检测苈桃抗纤方对细胞内Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原mRNA表达的影响;Western Blot检测细胞磷酸化(phosphorylation)Erk1/2的表达。 结果:不同浓度苈桃抗纤方体外作用A549细胞48h后,胞内TGF-β1的定量表达,相较正常对照组明显减少(40.35±1.65,37.84±0.95,37.45±0.78 VS 45.13±2.01),(P0.01)具有显著差异性。TGF-β1体外诱导A549细胞EMT发生后,ELISA检测细胞cytokeratin和vimentin表达显示,相较正常对照组,vimentin阳性表达明显增强,而cytokeratin阳性表达相对减弱;RT-PCR检测表明,A549细胞内Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原mRNA表达显著增强。经不同浓度苈桃抗纤方体外作用诱导EMT成功的A549细胞48h后,与模型组相比,vimentin阳性表达出现不同程度的减弱,而cytokeratin阳性表达则出现不同程度增强;Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原mRNA表达均出现不同程度下调;phosphorylation Erk1/2的表达减弱。 结论:苈桃抗纤方可以降低TGF-β1诱导的A549细胞EMT转化率,阻断肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转化,减少肺成纤维细胞的产生,从而抑制肺纤维化的发生,达到抗肺纤维化的作用。其可能机制是通过降低细胞内转化生长因子(transforming growth factor TGF-β1)的释放,干预Ⅰ型及Ⅲ型胶原mRNA表达,影响细胞磷酸化Erk1/2的表达。
【学位授予单位】:湖北中医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R285

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙铁英,林嘉滨,张洪胜,吴玉华,周玉珍,孙丽梅,卫生部;48例慢性肺间质疾病临床特征及肺功能分析[J];北京医学;2002年04期
2 姜良铎;张晓梅;肖培新;;特发性肺间质纤维化的病因病机探讨[J];中华中医药杂志;2008年11期
3 王海涛,刘昊,颜京霞,田艳霞,江小华;N-乙酰-L-半胱氨酸对染矽尘大鼠肺间质成纤维细胞MMP-2表达的影响[J];第三军医大学学报;2005年19期
4 陈芳;吴符火;;中药抗炎治疗肺纤维化的综述[J];福建中医学院学报;2006年05期
5 陈兴无;上皮损伤和肺纤维化[J];国外医学.呼吸系统分册;2002年02期
6 谷丽,朱元珏;特发性肺间质纤维化与肺肌成纤维细胞[J];国外医学.呼吸系统分册;2005年05期
7 刘三都,鲍崇忠,杨庆坤,舒德云,贾建英,王吉超;肺乐宁抗结核性肺纤维化临床研究[J];贵阳中医学院学报;1999年04期
8 王新华,张弘,徐志瑛;特发性肺间质纤维化的中西医结合治疗[J];贵阳中医学院学报;2000年04期
9 杨和春;;浅谈肺系疾病的上盛下虚证治[J];湖北中医杂志;1989年05期
10 仝润芍;;血府逐瘀汤加减治疗弥漫性间质性肺炎46例[J];河南中医;1996年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张晓梅;孙雪松;姜良铎;孙海燕;周平安;;芪红汤对特发性肺间质纤维化患者肺功能及血氧的影响[J];中医药临床杂志;2008年01期
2 王静;乔学英;卢付河;周志国;宋玉芝;霍俊杰;刘欣;;诱导痰及血清TGF-β1水平对非小细胞肺癌急性放射性肺炎的预测价值[J];癌症;2010年03期
3 钟卫;王辉;;中西医结合治疗特发性肺纤维化临床观察[J];北方药学;2011年10期
4 庞彩苓,徐志瑛;肺纤维化的中医药研究进展[J];浙江中医学院学报;2005年04期
5 章九红;;益气养阴通络方治疗免疫抑制盲区间质性肺病20例临床观察[J];北京中医药;2008年03期
6 姜良铎;张晓梅;肖培新;;特发性肺间质纤维化的病因论治[J];北京中医药;2008年04期
7 樊茂蓉;韩克华;王书臣;;特发性肺间质纤维化中医证候规律临床研究[J];北京中医药;2012年04期
8 何明;张晓梅;苑惠青;钟湘;杨效华;郝素英;刘薇;;银杏叶提取物治疗SARS后肺间质纤维化的疗效与机理研究[J];中华中医药杂志;2005年12期
9 宋康;骆仙芳;石亚杰;夏永良;杨超;李柏颖;王媛;;虎杖对肺纤维化大鼠Th1/Th2细胞因子干预作用的实验研究[J];中华中医药杂志;2006年12期
10 宋康;骆仙芳;杨珺超;夏永良;石亚杰;李柏颖;;虎杖对肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β_1表达的影响[J];中华中医药杂志;2007年12期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 曹丽蒙;李红健;周成;蒋玉凤;;临床药师在临床实践过程中对一些问题的思考[A];2010年临床药学学术年会暨第六届临床药师论坛论文集[C];2010年
2 张京春;;活血化瘀方药对肺纤维化影响的临床和实验研究近况[A];华北五省市区及广东省中西医结合防治SARS学术会议论文集[C];2003年
3 叶俏;代华平;黄克武;娄宝辉;丁毅;王辰;;吸烟与特发性肺纤维化合并肺气肿的相关性研究[A];中华医学会第三届全国间质性肺病暨弥漫性泛细支气管炎学术会议论文汇编[C];2010年
4 孙增涛;廉富;魏葆琳;张虹;刘恩顺;李小娟;封继宏;;益气活血散结法对特发性肺纤维化作用的临床与实验研究[A];中华中医药学会内科第十二次肺系病学术交流大会论文集[C];2006年
5 宋康;石亚杰;夏永良;杨群超;李柏颖;;虎杖对肺纤维化大鼠血清INF-γ,IL-4干预作用的实验研究[A];中华中医药学会内科第十二次肺系病学术交流大会论文集[C];2006年
6 宋建平;李伟;李瑞琴;秦俊莲;张瑞;徐建明;田黎;马莉娜;张丽敏;;《金匮》不同方药对肺纤维化大鼠模型早期阶段(14天)的影响——肺纤维化早期阶段中医基本病机探讨[A];仲景医学求真(续一)——中华中医药学会第十五届仲景学说学术研讨会论文集[C];2007年
7 宋康;石亚杰;夏永良;杨群超;李柏颖;;虎杖对肺纤维化大鼠血清INF-Y、IL-4干预作用的实验研究[A];中华中医药学会内科分会学术年会资料汇编[C];2007年
8 刘蕊;俞欣玮;;络病学说的发展及现代研究[A];全国第十一届中医医史文献学术研讨会论文集[C];2008年
9 胡静;郭永洁;刘旭凌;符胜光;庞慧芳;;凉血活血法对肺纤维化小鼠羟脯氨酸和转化生长因子-β_1含量的影响[A];中医药防治感染病之研究(九)——第九次全国中医药防治感染病学术交流大会论文集[C];2009年
10 宋康;杨珺超;陈君峰;鲁建锋;夏永良;;补肺汤对肺纤维化大鼠血清INF-γ、IL-4表达水平影响的实验研究[A];2009年中华中医药学会内科分会全国中医内科临床科学研究专题研讨会论文汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 荆阳;麻杏芎葶合剂对哮喘大鼠气道神经—免疫炎症影响的实验研究[D];成都中医药大学;2010年
2 陆志伟;辅助性T淋巴细胞与特发性肺间质纤维化关系的初步研究[D];北京协和医学院;2011年
3 陈云;论肺络[D];山东中医药大学;2011年
4 樊任珠;痹痛灵颗粒对胶原诱导关节炎关节滑膜及肺部病变血管新生影响的研究[D];南京中医药大学;2011年
5 李霞;纤克颗粒对肺纤维化大鼠TNF-α、TGF-β_1及MMP-9、TIMP-1表达的实验研究[D];长春中医药大学;2011年
6 任敦强;HMGB1诱导免疫损伤致肺纤维化的细胞分子机制及天龙总黄酮的干预作用[D];广州医学院;2011年
7 邱新萍;五脏阴阳整体论对痹证发生的机理研究—关节痹证与肺痹发生的临床与实验研究[D];北京中医药大学;2012年
8 孙亚男;中风病“毒损脑络”临床症状与实验室指标的关联研究[D];北京中医药大学;2012年
9 刘文锋;益气养阴法治疗特发性肺纤维化的临床研究[D];北京中医药大学;2012年
10 周迎春;开心胶囊抗大鼠心肌梗塞后心室重构的实验研究[D];广州中医药大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张军昌;骨髓来源的纤维细胞在特发性肺纤维化中募集及相关信号的研究[D];郑州大学;2010年
2 权春分;邵氏“五针法”对哮病急性发作期的临床研究[D];河南中医学院;2010年
3 朱玉龙;120例特发性肺间质纤维化患者证型分布特点及其与血液流变学,凝血功能相关性研究[D];新疆医科大学;2010年
4 杨志杰;益气养阴法治疗肺间质纤维化的临床研究[D];山东中医药大学;2010年
5 杨坚;尿激酶对于不同中医证型ILD干预作用的临床研究[D];山东中医药大学;2010年
6 丁晓倩;COPD及慢性支气管炎大鼠肺组织HIF-1α、VEGF表达及相关性研究[D];石河子大学;2010年
7 贾晓鑫;麻杏芎葶合剂对支气管哮喘大鼠肺组织PKC、MMP-9影响的实验研究[D];成都中医药大学;2010年
8 毛娅;麻杏芎葶合剂加泼尼松治疗肺间质纤维化的临床疗效观察[D];成都中医药大学;2010年
9 张孝飞;青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡及胶原合成的影响[D];桂林医学院;2010年
10 黄(王莹);儿童弥漫性实质性肺疾病/间质性肺疾病病因的临床研究[D];广西医科大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 宋建平;特发性肺纤维化的中医论治[J];浙江中医学院学报;1997年02期
2 苑慧清;肺痿(肺纤维化)治疗思路探讨[J];北京中医;1996年05期
3 章巍,刘新民,李海潮,张红;博来霉素致大鼠肺纤维化模型肺组织MMP-2、MMP-9、MT1-MMP及TIMP-1、TIMP-2的表达[J];北京大学学报(医学版);2002年06期
4 张荣华,周子成,洪多伦,艾九松;三七抗肝纤维化的实验研究[J];第三军医大学学报;2000年04期
5 李京红,宋明臣;肺间质纤维化治疗的研究进展[J];国外医学.呼吸系统分册;1998年01期
6 王海斌;特发性肺纤维化治疗现状与进展[J];国外医学.呼吸系统分册;1999年02期
7 黄志卫,马忠森,王秀丽,吴艳峰,董春玲,赫国志;刺五加对人胚肺二倍体纤维母细胞生长的影响[J];广西医科大学学报;2004年01期
8 刘卫敏,徐启勇,林宇辉,叶燕青,戴莉,刘瑛琳;浓当归注射液对肺纤维化发生发展过程的影响[J];武汉大学学报(医学版);2001年04期
9 周淼;益阴活血汤对大鼠肺纤维化作用的实验研究[J];河南中医学院学报;2004年01期
10 石玉枝,孙晓虹,艾明理,霍建民,乔宏;当归、维生素E对平阳霉素致大鼠IPF保护作用的实验研究[J];哈尔滨医科大学学报;1995年05期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 辛洪涛;宋秀杰;徐少华;牟晓燕;王静;靳长俊;黄琛;;芪丹(颗粒剂)对大鼠肺间质纤维化时TGF-β、TNF-α表达的影响[A];中国中西医结合学会第七次全国实验医学学术研讨会论文汇编[C];2004年
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中国期刊全文数据库 前10条
1 施娟娟;徐启勇;叶燕青;黄莺;马红艳;;肺纤维化形成过程中肺泡Ⅱ型上皮细胞对肺成纤维细胞的影响及相关机制的探讨[J];重庆医科大学学报;2007年12期
2 黄莺;叶燕青;施娟娟;马红艳;;肺纤维化形成过程中大鼠成纤维细胞对肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响[J];武汉大学学报(医学版);2008年04期
3 宋明臣,何冰,邱忠民,汤秀英;博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织表面活性物质蛋白A B C mRNA的表达[J];中华结核和呼吸杂志;1998年07期
4 胡兆昆;;环磷酰胺所致致死性肺纤维化[J];国外医学.内科学分册;1983年12期
5 董惠芳,马慧;特发性肺纤维化21例治疗体会[J];中国综合临床;1997年02期
6 戚颖,王建平;特发性肺纤维化2例误诊分析[J];山东医药;2000年06期
7 耿惠;慢性粒细胞白血病继发肺纤维化一例报告[J];青海医药杂志;2000年08期
8 杨国嵘,朱任之,孙少华;TGF-β与肺纤维化[J];国外医学.生理.病理科学与临床分册;2000年04期
9 孟莹,李旭,蔡绍曦;局部组织肾素—血管紧张素系统在肺纤维化中的作用[J];实用医学杂志;2002年12期
10 夏蕾,徐启勇,叶燕青;大鼠肺纤维化中细胞间粘附分子的表达及卡托普利对其影响[J];临床内科杂志;2003年09期
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1 辛建保;向菲;汪世灏;马万里;;黄芪对肺纤维化大鼠MMP-2和TIMP-1的表达的影响[A];第七次全国中西医结合呼吸病学术交流大会论文汇编(一)[C];2004年
2 杨珺超;宋康;陈君峰;鲁建锋;夏永良;;以肺纤维化为病理基础的肺气虚证大鼠模型的建立[A];全国中医内科肺系病第十四次学术研讨会论文集[C];2010年
3 刘勇;李俊;王胜霞;高建;;当归补血汤总苷抗大鼠肺纤维化的实验研究[A];全国第十一届生化与分子药理学学术会议论文集[C];2009年
4 张燕萍;樊茂蓉;王书臣;苗青;张文江;王伟;崔云;李艳艳;;肺纤平对博莱霉素所致肺纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响[A];中华中医药学会内科第十二次肺系病学术交流大会论文集[C];2006年
5 霍速 ;纪树荣 ;赵文汝 ;陈东进;;肺纤维化患者的吸气训练[A];第四届全国康复治疗学术大会论文摘要汇编[C];2004年
6 康秀华;张伟;;骨髓间充质干细胞对博莱霉素致小鼠肺纤维化的影响及作用机制研究[A];中华医学会第三届全国间质性肺病暨弥漫性泛细支气管炎学术会议论文汇编[C];2010年
7 张丽霞;张淑文;;SARS恢复期肺纤维化中西医结合诊治的研究[A];2004年全国危重病急救医学学术会议论文集[C];2004年
8 李玉花;胡马洪;陈扬波;张庚;许秀娟;季春莲;金东;赖志珍;;大黄素抗大鼠肺纤维化实验及对IL-7的影响[A];2009年浙江省危重病学学术年会论文汇编[C];2009年
9 刘杰文;李卓;茹永新;王彤;张焱焱;于晓霞;;中药复方(HT冲剂)抗肺纤维化的预防和治疗作用及其机理的研究[A];中国中西医结合学会成立20周年纪念大会论文集[C];2001年
10 董静;苗维纳;;丹参对实验性肺纤维化形成的影响[A];第八届全国生化药理学术讨论会暨第七届Servier奖颁奖大会会议摘要集[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 王萍;董瑞让中医走向世界“肺纤维化”防治领域的前沿[N];健康报;2011年
2 张纾难;中药有助逆转肺纤维化[N];健康报;2003年
3 河北 刘涓;解读肺纤维化[N];家庭医生报;2009年
4 刘燕玲;抗肺纤维化中药进入临床试验[N];健康报;2003年
5 河北省职工医学院附属医院内科 刘涓;肺纤维化尤需防感染[N];健康报;2009年
6 北京同仁医院呼吸科主任医师 孙永昌;肺纤维化:明确病因是关键[N];保健时报;2009年
7 北京中日友好医院 张纾难;肺纤维化的治疗原则[N];中国中医药报;2000年
8 静雨 译;自发性肺纤维化新疗法[N];中国医药报;2002年
9 李 戎 闫智勇 唐 勇 李文军  王 兴 张天娥 刘明芳 罗蜀蓉;肺纤维化的中医药治疗综述[N];中国中医药报;2003年
10 刘燕玲;恢复期非典患者肺纤维化预防受关注[N];健康报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨毅;苈桃抗纤方对肺泡Ⅱ型上皮细胞转化的影响及作用机制[D];湖北中医学院;2009年
2 李丽娜;CpG ODN对肺纤维化形成的作用及其可能机制[D];吉林大学;2010年
3 张波;肺纤方干预肺纤维化大鼠微血管新生的实验研究[D];北京中医药大学;2010年
4 张彦萍;纤溶酶原激活物抑制剂-1siRNA抗博来霉素诱导的大鼠肺纤维化作用及机制[D];河北医科大学;2011年
5 杨俊玲;肿瘤坏死因子-α抑制剂及4种细胞因子表达在肺纤维化诊治中的应用与评价[D];吉林大学;2007年
6 肖莉;白细胞介素13(IL-13)致肺纤维化作用及干预机制的研究[D];中国医科大学;2004年
7 王世鑫;二氧化硅粉尘致肺纤维化机制及早期生物标记物研究[D];重庆大学;2004年
8 黄泽清;骨形态生发蛋白-4在酸吸入致大鼠急性肺损伤中的作用及作用机制探讨[D];中国医科大学;2006年
9 卫伟;抑制活化素受体样激酶5对炎性肺损伤后细胞外基质代谢的影响[D];第二军医大学;2007年
10 陈瑞;化纤汤对博莱霉素诱导的大鼠肺损伤干预作用的实验研究[D];湖北中医学院;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘娟;枇杷叶三萜酸对大鼠肺纤维化的防治作用及其部分机制研究[D];安徽医科大学;2010年
2 欧阳彬;外源性IL-10对博莱霉素所致小鼠肺纤维化的干预研究[D];中南大学;2010年
3 牛海艳;以核转录因子Egr-1、NF-κB为靶点治疗硅肺纤维化的初步实验研究[D];中南大学;2003年
4 高燕;利用蛋白质芯片技术探索肺纤维化早期标志物及硒代金属硫蛋白的防护作用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
5 王耀勇;白细胞介素-10在博莱霉素诱导大鼠肺纤维化中的作用[D];武汉大学;2004年
6 李新春;基质金属蛋白酶12在放射性肺损伤组织异常重建和肺纤维化启动中的作用及治疗靶点的探索[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
7 余俊杰;肺纤维化对大鼠勃起功能的影响[D];泸州医学院;2011年
8 肖小花;针灸治疗肺纤维化的文献研究[D];成都中医药大学;2011年
9 贺夏红;罗格列酮和地塞米松对博莱霉素诱导的肺纤维化中Caveolin-1表达的影响[D];中南大学;2010年
10 贺海彪;肺纤灵Ⅲ对博莱霉素所致小鼠、大鼠肺纤维化的干预作用和机制研究[D];苏州大学;2010年
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