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《华中师范大学》 2002年
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绞股蓝细胞培养的初步研究

李跃春  
【摘要】: 本文以绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino)的幼叶为材料,诱导和筛选愈伤组织,讨论了不同光照和不同理化因子培养细胞的生长、生理生化特性和次生物质的积累的规律实验结果如下: 1.通过实验得出,不同种类、不同浓度的激素极其组合对细胞的效应均不相同,绞股蓝愈伤组织诱导、增殖的最佳培养基是:B_(5+)2,4-D2.O+KT0.5 2.不同因子对培养细胞的增殖影响的效应如下: (1) 在黑暗和光照下,培养细胞的生长周期为27天,细胞增殖曲线为“S”型,可大致分为延迟型、指数生长期和静止期。 (2)适宜的接种量为3g.鲜重/50ml培养基;蔗糖的最佳添加量为30g/l;葡萄糖的最佳添加量为40g/l;作为碳源,葡萄糖的效果优于蔗糖。琼脂糖的浓度为0.05%。最有利于细胞的生长。 3.在光照和黑暗条件下:培养细胞的可溶性蛋白质含量变化曲线相似,在第15天和第21天均出现两个高峰,黑暗条件下的含量低于光照条件下的含量;培细胞的过氧化物酶活性变化曲线相似,在第3天和第15天均出现两个高峰;培养细胞的超氧化物酶歧化酶活性变化曲线相似,均出现两个高峰,光照条件下的第一个高峰出现在第15天,而黑暗条件下出现在第18天,两种情况下的第二个高峰均出现在第24天。 4.培养细胞的次生物质的积累主要在细胞的静止期。不同光照对培养细胞的总皂甙的含量没有显著的影响,在光照下总黄酮的含量较黑暗条件下的高。在接种量为3g.鲜种/50ml培养基时,总皂甙和总黄酮的含量最高;在蔗糖的最佳添加量为30g/l,葡萄糖的为40g/l时,这两种次生物质的含量最高。琼脂糖的浓度为0.1%时,最有利于总皂甙和总黄酮的积累。
【学位授予单位】:华中师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:S567.2

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