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《华中师范大学》 2006年
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酶催化光度法在环境及食品分析中的应用

廖丽霞  
【摘要】:随着各种分析仪器自动化程度的提高,分析检测的灵敏度、检测限、准确度等都得到很大的改善,然而这些仪器大都造价昂贵,且需要专门的技术人员,不利于推广应用。此外,所面对的分析对象日益复杂,采用现代分析仪器直接测定往往比较困难,因此需要借助各种预处理方法。如液液萃取,微波萃取、蒸馏、离心、沉淀等,它们操作步骤繁多,处理时间长,试剂用量大,此外,在预处理中还容易损失样品,产生较大误差。 本论文利用酶法分析方法与简单易行的紫外-可见分光光度法结合起来对环境及食品样品进行分析检测,将其应用于雨水、白酒及唾液中有关组分的测定。样品无需预处理,且操作步骤简便。将酶法分析方法直接应用于唾液中乙醇的测定,无需借助分析仪器,通过反应前后溶液颜色的显著改变,即可定性判断出唾液中是否含有乙醇,为鉴定酒后驾车肇事提供了良好的判定依据,也为商品化试剂盒的研制作了基础性的研究,具有较强的实际意义和潜在的社会价值。本工作由以下三部分组成: 1、采用过氧化氢酶对雨水中过氧化氢的含量进行了测定。它是基于反应产物在505nm处有较强的吸收,利用此波长下的吸光度值测定过氧化氢的含量。在最佳实验条件下,线性范围为0.0030~0.3000mmol/L,回收率为95.7%~106.0%,相对标准偏差为1.99%~3.58%。该法具有线性范围宽、操作简便、回收率高等特点。 2、将醇氧化酶的酶促反应和过氧化氢酶的指示反应相结合,对饮酒者唾液中的乙醇含量进行了测定。本文首次提出用酶催化光度法测定饮酒者唾液中乙醇的含量。实验表明在最优实验条件下,测量指示反应产物在505nm处的峰值吸收,可间接测定乙醇的含量。本法在0.06860~5.115mmol/L范围内呈良好线性关系,回收率为92.1%~103.4%,相对标准偏差为2.60%~3.06%。用于实际样品的测定,结果满意。 3、采用甲醛脱氢酶对白酒中的甲醛进行了测定。它是基于甲醛与NAD~+(氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的反应,后者的还原产物在340nm处具有最大吸光度值,利用此波长下的吸光度值间接测定甲醛的含量。在最优化的实验条件下,测得其线性范围为0.01452~0.2904mmol/L,回收率为96.0%~103.8%,相对标准偏差RSD
【学位授予单位】:华中师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:O657.3

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